Fas/FasL系统在RSA患者蜕膜与绒毛组织的表达及临床意义

【摘要】目的探讨反复自然流产患者蜕膜与绒毛组织fas/fasl的表达和研究其临床意义。方法采用免疫组化法检测33例反复自然流产患者绒毛组织Fas/FasL的表达水平，并以30例健康早孕组为对照。结果反复自然流产患者蜕膜与绒毛组织FasL低于对照组，数据经统计学比较具有显著差异（P0.05），而绒毛组织却无显著差异。结论反复自然流产患者蜕膜与绒毛组织的Fas/FasL失衡可能是反复自然流产的原因之一，需加以重视。

【关键词】反复自然流产；蜕膜；绒毛组织；Fas/FasL

反复自然流产（RSA）是妇产科常见病，约40%～60%不明原因。近年来多数研究表明，正常妊娠中母体对胚胎的免疫反应以Th2体液免疫为主，而Th1细胞免疫过强极有可能导致流产。细胞凋亡已被公认为是引起免疫耐受的一个重要机理，其中致凋亡基因 Fas 和其配体 FasL 在细胞凋亡中起关键作用。妊娠期 Th1/Th2 型细胞因子失衡与 Fas/FasL 介导的细胞凋亡关系密切。本文主要研究本文研究RSA 患者蜕膜和绒毛组织Fas、FasL 表达水平，探讨Fas/FasL 系统在rsa 发病机制及对临床意义。

1资料与方法

1.1一般资料从2010年10月至2011年10月在深圳市盐田区计生中心经过妇检，B超，尿HCG都正常无不孕，无死胎或流产史，要求人流的妇女30例为正常早孕组。年龄25～36岁，平均（29.5±2.6）岁，孕周7～10周，平均（9.1±1.3）周，孕次2～4次，平均（2.5±1.2）次。 同期经我中心排除因遗传，感染及血型不合，抗抗体阳性等因素，确诊为RSA的妇女33例为研究组。年龄26～37岁，平均（30.1±3.1）岁，孕周911周，平均（10.2±1.7）周，孕次3～7次，平均（5.1±2.2）次。以上年龄，孕周，孕次比较，P>0.05，无显著性差异

1.2设备及试剂采用艾美捷科技有限公司的鼠抗人 Fas 单克隆抗体，鼠抗人 FasL 单克隆抗体SP 超敏法试剂盒，按照试剂盒说明书进行操作。

1.3标本收集和处理①两组于术后留取标本妊娠组织，置于10 %中性甲醛溶液中固定8～24 h，低温石蜡包埋，制成蜡块，置20 ℃冰箱干燥保存，待切片及免疫组化染色。②结果判读黄色颗粒为阳性标准，每张切片随机取5个高倍视野，阳性细胞比例50%，阳性（+++）。③采用SPSS 13.0统计学处理软件包进行数据分析，计量资料采用均值±标准差（x±s）表示，P

2结果

2.1对照组和研究组在滋养层细胞组织中的表达

2.2对照组与研究组 Fas、FasL在 蜕膜和绒毛的表达比较，见表3。

表1Fas在正常早孕、反复流产患者滋养层细胞组织中的表达

结果对照组30例研究组33例细胞滋养细胞合体滋养细胞细胞滋养细胞合体滋养细胞6253+1992317++213410+++3613

作者单位：518000深圳市盐田区盐田街道计生中心（何育英）；

深圳市北京大学深圳医院妇产科（蔡巧青）

表2FasL在正常早孕、反复流产患者滋养层细胞组织的表达（例）

结果对照组30例研究组33例细胞滋养细胞合体滋养细胞细胞滋养细胞合体滋养细胞3094+1892216++910212+++01101表3对照组与研究组蜕膜组织比较（例）

组别例数FasFasL++++++++++++对照组304168228155研究组3321412571682表4对照组与研究组绒毛组织组织比较（例）

组别例数FasFasL++++++++++++对照组3041394112143研究组33315105717902.3小结

2.3.1就对照组而言，研究组滋养层细胞组织Fas表达无显著差异（P>0.05），而FasL表达下降，差异有统计学意义（P

2.3.2就对照组而言，研究组蜕膜组织中Fas表达增强，差异显著（P

2.3.3就对照组而言，研究组绒毛组织中Fas表达无显著差异（P>0.05），而FasL表达下降。

3讨论

Fas，为Ⅰ类膜蛋白分子，FasL 为Ⅱ类膜蛋白分子，也称 Apo1 或 CD95，属于肿瘤坏死因子/神经生长因子受体家族之一。细胞凋亡的过程主要由 Fas/FasL 介导 Fas 与 FasL 之间的相互作用[1]。Reinhard 等[2]证实，妊娠期 Th1/Th2 型细胞因子失衡与 Fas/FasL 介导的细胞凋亡关系密切。妊娠期由于胎儿大量异体抗原进入母体机体，促使 大量T 淋巴细胞被激活，发生克隆扩增并发生免疫反应作用[3]，Th1 型淋巴细胞表达大量 Fas，机体FasL 与其结合后凋亡，最终导致 表达Fas 的 Th1 细胞大量凋亡，数目减少，具有胚胎毒性作用的 Th1 细胞功能下降，利于妊娠成功。研究发现，RSA患者与正常妊娠者在滋养层细胞组织，蜕膜组织组绒毛组织中，Fas/FasL系统表达异常[4]，这与Minchevanilsson等[5]和赵亮[6]的结论一致。机体主要通过 Fas/FasL信号诱导母体淋巴细胞的凋亡，使胎儿能够免疫逃避母体的溶细胞毒性，从而保证妊娠的顺利进行。而流产患者滋养细胞FasL表达下降，Fas表达增强。一方面由于FasL的表达下降，被异体抗原刺激而大量激活的Th1细胞不能通过Fas/FasL介导的AICD机制失活，从而使过度活化的Th1型T淋巴细胞高度表达Fas，导致Fas表达增强，另一方面，由于Fas/FasL介导的AICD机制失活，大量被激活的T淋巴细胞产生Th1型细胞因子，最终导致流产[7]。Fas/FasL系统表达异常使妊娠期Th1/Th2型细胞因子失衡、母胎免疫排斥[8]，可能在反复流产免疫病因中起重要作用[9]。廖丹等[10]报道，RSA患者可通过免疫治疗后，促进机体向Th2淋巴细胞转化，或范舒舒[11]等主动免疫治疗可通过改变淋巴细胞Fas /FasL 的表达水平，改善细胞免疫状态取得疗效。调节优势应答的类型，达到早预防，早治疗，达到妊娠成功的目标。

参考文献

[1]Green DR， Droin N， Pinkoski M. Activationinduced cell death in T cells. Immunol Rev，2003，193∶ 7081.

[2]Reinhard G， Noll A， Schlebusch H， et al. Shifts in the TH1/TH2balance duringhuman pregnancycorre late with apoptoticchanges. Biochem Biophys Res Commun，1998，245：933938.

[3]赵亮，陈晓，郭振红，Fas/FasL信号在免疫系统中的作用。.国际免疫学杂志，2011，34（01）：4952.

[4]杜丽荣，等. Survivin、Stat3在反复自然流产患者绒毛和蜕膜中的表达.中国妇幼保健，2011，26（01）：117119.

[5]Minchevanilsson L， Nagaeva O， Sundquist KG， et al. Gammadelta T cells of human early pregnancydecidua： evidence for cytotoxicpotency. Int immunol，2000，12（5）：585596.

[6]赵亮，陈晓. Fas/FasL信号在免疫系统中的作用. 国际免疫学杂志， 2011，34（01）：1952.

[7]何双，顾向应. Fas/FasL系统介导的细胞凋亡与卵泡闭锁及稽留流产的关系.中国计划生育和妇产科，2011，19（09）：6567.

[8]徐素粉，王艳玲. Fas/FasL与自身免疫性疾病.医学综述， 2011，17（07）：969971.

[9]陈巧儿，等.免疫治疗原因不明反复流产后Th1/Th2型细胞因子和NK细胞的变化.中国妇幼保健，2005，20：26372639.

[10]廖丹，等.淋巴细胞免疫治疗反复早期自然流产53例.临床医学，2009，29（1）：7576.

[11]范舒舒，许红雁，江欢，马占忠. 复发性自然流产患者主动免疫治疗前后外周血淋巴细胞Fas /FasL 表达水平的研究.中国优生优育，2011，19（9）：6567.