浅析减少食品微生物检验的干扰因素
时间：2022-07-16 09:18:05
【前言】浅析减少食品微生物检验的干扰因素由文秘帮小编整理而成，但愿对你的学习工作带来帮助。无菌实验室使用前和使用后须用紫外灯（如为室内悬吊紫外灯，应为30W，距操作平台1米左右）照射至少30min。杀菌后检验前，不得随意打开无菌室。事先将进无菌室操作所用工作服、发网，口罩、拖鞋等必需品放进无菌室缓冲间用紫外灯照射杀菌。无菌室传递窗内也应紫外照射...
关键词：食品微生物检验； 干扰因素；
引言：众所周知，现在是一个知识大爆炸的年代，人类对自身生存环境的要求越来越高，尤其对食品安全的关注越来越多，也越来越高。从事食品检验的工作人员应该具备相应的知识和操作技能，增强食品安全意识，能够本着为自己负责，为人类健康负责，具有热爱这一行业的良好态度。下面就工作中如何减少食品微生物检验的干扰做下分析。
1.贯彻无菌操作，防止人为污染
1.1拥有健全的无菌实验室及相关管理制度。
无菌实验室使用前和使用后须用紫外灯（如为室内悬吊紫外灯，应为30W，距操作平台1米左右）照射至少30min。杀菌后检验前，不得随意打开无菌室。事先将进无菌室操作所用工作服、发网，口罩、拖鞋等必需品放进无菌室缓冲间用紫外灯照射杀菌。无菌室传递窗内也应紫外照射。紫外灯2周清洁一次，保持紫外线良好穿透力。进入无菌室前，注意自身消毒，用肥皂洗手及腕关节以上部位，用75%酒精喷洒手心手背及腕关节以上部位，换好衣服，戴好发网和口罩，穿上拖鞋方可进入接种操作。
1.2准备器材
开启紫外灯前，将无法干热和湿热灭菌的器材提前放入传递窗口紫外照射至少30min。吸管、平皿、药匙事先清洗好晾干，放入金属桶内，吸管尖嘴朝下，实验操作时用手抽取吸管顶端，避免污染尖嘴；平皿倒置叠放，便于烘干平皿内水分，杀菌效果更好，盖好桶盖，桶盖与桶身通气孔对齐，放入干燥箱，于160-170℃，干燥1.5-2h，进行杀菌消毒。
干燥灭菌后，放置干燥箱内冷却。临用前，把通气孔关闭，取出灭菌桶，整理好后放到传递窗口。每次从传递窗口递拿东西都要及时关闭窗口。
1.3准备药品及高压锅的使用
目前，多数无菌试验所用药品是脱水干粉状的，按照说明书上相关比例配置，再分装，分装时注意瓶塞和试管塞用棉塞或带有通气孔的橡胶塞，不用实木塞和不带通气孔的橡胶塞，否则高压灭菌时，锅内压力变化，使容器内液体飞溅喷出，严重的造成锅的排气孔和排水管道堵塞，酿成事故。最后用纸包好容器口和塞子，扎紧。
高压灭菌锅的使用按说明书进行操作，灭菌时间和温度按药品说明书设置，一般要求121℃，高压灭菌15-20min。
注意：（1）高压锅使用前添加蒸馏水，至加热管以上2cm左右，太少会损坏加热管，且不能产生足够的蒸汽进行灭菌，当然也不能太多（2）锅内物品堆放应有缝隙，否则蒸汽不能通过，影响灭菌；（3）灭菌时间长短要适宜。太短，不很好的杀菌消毒；太长，破坏某些药品成分特性，如琼脂凝固性可能被破坏，影响药品使用，造成浪费；（4）加热后，及时排放冷气至压力降为0，关闭排气阀至达到灭菌所需温度再微微开启排气阀，此时温度压力不会有很大变化。冷气排除很重要，因空气膨胀压大于水蒸汽膨胀压，水蒸汽中含空气，同压力下，含空气蒸汽温度低于饱和蒸汽温度，影响灭菌；（5）灭菌结束后，排气速度不能太猛，否则倒立发酵管内易产生气泡，甚至锅内压力骤降，容器内药品压力大于锅内压力，产生压力差而冲出容器，或沾染塞子而发生污染，影响鉴定；（6）高压灭菌后，排气开盖，将冷却到60℃左右的药品取出，放进传递窗口。琼脂类药品， 放到45℃恒温箱中，使之不凝固。若棉塞脱掉或容器破损，应取出弃之。
采用高压灭菌原因：湿热蒸汽有潜热，灭菌效力强；菌体吸收水分，降低凝固温度；湿热穿透力比干热大。
1.4采集样品
1.4.1准备：根据所取样品类型和状态采取不同取样方法，取样工具提前灭菌；戴好发网和工作帽，穿上灭菌工作服，手、指甲及腕部清洗后，用50ppm次氯酸钠浸泡30s，清水冲洗干净，吹干，戴好橡胶手套，手套口包住衣袖口，用75%酒精喷洒手心手背。准备就绪开始取样。
要求：所取样品具有充分的代表性和一致性；整个过程必须无菌操作。
1.4.2过程：用经紫外照射，质量完好，干净卫生，未开封的PE袋装置样品。打开PE袋，用手捏住袋子的外侧由里往外翻，把里面无菌的一面翻到外面拿取样品，将样品和袋子一起退出，样品装到袋子里面。整个取样过程，袋子内侧不能触及除样品之外的任何部位，否则污染袋子，影响样品。最后在袋子上做好标记，挤压出袋中的空气，打好结，放入特制运输箱中，
取表面样品一般用涂抹法，现常用涂抹棒，具体操作按照说明书进行。注意：不能上下晃动瓶体，否则打开瓶盖上的塞子后液体会从里面冒出；塞子打开后不能反复关闭和打开，以防污染；取回后，如不能及时检验，应低温保存。
取空气落菌时注意，培养用琼脂要提前培养24h，选用无菌平皿。取样时门窗要关闭，人员不能随便走动，空气静止沉降5min。标记好所取位置，对角线的顶点要距离墙壁1m。盖好平皿带回实验室。
1.5接种样品或转移菌种
一个宗旨：标记好名称，选好稀释度，所有操作坚持无菌进行。进入无菌室，待一切准备就绪后，点燃酒精灯，一切操作都要在酒精灯附近进行。（1）接种样品时，从吸管桶取出的吸管及试管口都应该用酒精灯进行灭菌，吸管尖嘴不能碰到除要吸取的样品之外的任何部位，以防污染。吸取菌液或样品时，要用吸球，不要用嘴吹吸，避免口腔内的细菌和样品相互污染；吸管吸取的样液一定要准确；（2）转种细菌验证时，接种环和接种针都应在接种之前用酒精灯外焰充分灼烧裸漏的金属部位，杀菌之后才可以接种。
接种样品和转种细菌最好不要在同一个无菌室内进行操作，应各自拥有专门的无菌室。这样就可以避免二者相互影响。
1.6倾倒琼脂
将装有琼脂的三角瓶口在火焰上烤一下，倾倒15-20ml左右的琼脂于平皿内。菌液与琼脂尽量混匀，一般顺时针转3下，逆时针转3下，前后左右晃一下，尽量不要将琼脂晃到平皿壁上，待琼脂凝固后，及时将平皿倒置，放于温度合适的恒温培养箱中培养。
1.7药品的存放
剩余药品，短时间内再用到的，低温保存，用前要做空白实验。这就要求我们在配药之前要算好药品用量，避免浪费和不足，坚持现用现配。
1.8无菌室的整理及污物的处理
1.8.1实验结束后，用镊子夹住无水酒精棉球，点燃后擦拭桌面，或用2%-3%煤酚皂溶液擦拭。地面清理好，关门，打开紫外灯，照射30min。
1.8.2污染的吸管和平皿须经5%的煤酚皂或石炭酸溶液浸泡24h；染色玻片可直接冲洗，冲洗液要用烧杯或三角烧瓶盛放，再浸泡在5%煤酚皂24h，煮沸洗涤，冲洗液和泡好的器材及培养物用121℃，30min高压灭菌；凝集试验用的玻片或平皿需高压灭菌后洗涤；其它被污染的物品也应高压灭菌后洗涤。
1.9做好原始记录，善于总结和分析
严格按照国家或行业标准进行检测，每一步的结果和样品名称都应该做好原始记录，方便总结和查找原因。
2.结语：食品检验工作者，工作中要保持一颗探究的心态，在检验过程中不断思考，不断总结，详细查阅相关文献，进一步验证，解决疑问。要在探究中成长，不断提高自身的良好素质和基本技能。时刻端正好态度，拥有强烈的责任感，正确意识到身上肩负着关乎人类身体健康的重任。不断分析总结减少食品微生物检验的干扰因素。
参考文献
[1] 郭娟，韩朗 有关食品微生物检验注意事项的探讨[J].科技风杂志，2008，10（下）：66.
