不同采收期的芒果叶中总黄酮的变化规律研究

[摘要] 目的 研究不同采收期的芒果叶中总黄酮的变化规律。 方法 采用乙醇回流法从芒果叶中提取黄酮类物质，并用紫外分光光度法测定不同采收期芒果叶的总黄酮含量。 结果 芒果叶中总黄酮的含量随采收季节不同呈一定幅度变化，其中以1、11月总黄酮含量最高，5～7月含量较低。 结论 不同采收期是影响芒果叶中总黄酮质量的重要因素。

[关键词] 不同采收期；芒果叶；紫外分光光度法；总黄酮

[中图分类号] R927.2 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2013）02（c）-0074-02

芒果叶为漆树科植物芒果（Mangifera indica L.）的叶。芒果叶味酸、甘，性凉、平，具有平喘、止咳、祛痰、抗炎、镇痛、保肝利胆、抗脂质过氧化、抗病毒、抗肿瘤、抗菌等作用，对中枢神经系统和心血管系统等疾病也都有明显疗效[1-2]。芒果叶主要有效成分为黄酮类成分[3-4]，有关黄酮类成分的提取报道已有文献报导[5]，本文报道了不同采收期芒果叶中总黄酮变化规律，为深入研究开发芒果叶中总黄酮成分提供科学依据。

1 仪器与试药

1.1 仪器

UV-1800紫外-可见分光光度仪（上海美谱达仪器厂）；AG285电子分析天平（瑞士METTLER公司）。

1.2 试药

芒果叶采摘于广东省东莞市芒果种植园，经广东医学院药学院闫冲博士鉴定。采摘后于50℃烘箱干燥备用，每周采摘1次，持续1年。芦丁标准品购自南京替斯艾么中药研究所（批号：TCM027-091210）；乙醇等试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 对照品溶液的制备

精密称取干燥芦丁对照品13.40 mg，用50%乙醇定容至100 mL，精密吸取此溶液并用50%乙醇分别稀释成0.080 4、0.026 8 g/L的芦丁对照品溶液，备用。

2.2 供试品溶液的制备

精密称取不同采收期芒果叶各0.5 g，揉碎，用100 mL50%乙醇80℃回流3 h，冷却过滤，即得供试品溶液[6]。

2.3 标准曲线的绘制

准确吸取0.026 8 g/L的芦丁对照溶液1.00、2.00 mL，0.080 4 g/L的对照液1.00、2.00、3.00、4.00 mL分别置于10 mL容量瓶中，准确吸取0.134 g/L的芦丁溶液2.00 mL，至10 mL容量瓶中，分别加入5%亚硝酸钠溶液0.5 mL，摇匀，放置6 min后加入10%硝酸铝溶液0.5 mL，摇匀，放置6 min；再加入5%氢氧化钠溶液4 mL，分别用50%乙醇加至刻度，摇匀，放置15 min后，以空白试剂为对照调0，于紫外分光光度计510 nm处测定，结果显示其吸光度分别为：0、0.025、0.051、0.088、0.183、0.262、0.366、0.867，通过最少二乘法得回归方程Y = 0.092 1 X - 0.000 1[Y：浓度（g/L）；X：吸光度（A510 nm）]，R2 = 0.999 1，证明线性关系良好。

2.4 精密度试验

精密量取0.032 16 g/L的对照品溶液1 mL于10 mL容量瓶中，平行制备6份，按“2.3”项下操作步骤，加入亚硝酸钠、硝酸铝及氢氧化钠溶液，于紫外分光光度计510 nm处测定吸光度分别为0.366、0.366、0.366、0.367、0.366、0.366（RSD = 0.11%，n = 6），表明精密度良好。

2.5 重复性试验

精密称取同一采收期（采摘于08年10月18日）的芒果叶6份（每份0.5 g），揉碎，分别用100 mL 50%乙醇80℃回流3 h，冷却过滤。精密吸取滤液1 mL于10 mL容量瓶中，按“2.3”操作步骤，测定吸光度分别为0.442、0.397、0.432、0.430、0.450、0.408（RSD = 4.74%，n = 6），表明重复性良好。

2.6 稳定性试验

精密吸取芒果叶0.5 g（采摘于08年10月18日）提取液1 mL于10 mL容量瓶中，按“2.3”操作步骤，于紫外分光光度计510 nm处每10分钟测定吸光度1次，结果分别为：0.397、0.397、0.398、0.397、0.396、0.396、0.396。表明样品在60 min内稳定，RSD = 0.19%（n = 7）。

2.7 回收率试验

精密吸取芒果叶（采摘于09年2月21日，总黄酮含量为9.31%）提取液0.50 mL共9份，分别加入芦丁对照品适量（0.18、0.23、0.28 mg）各3份，按“2.3”项下操作步骤，于紫外分光光度计510 nm处测定吸光度分别为0.466、0.467、0.466、0.526、0.526、0.528、0.589、0.591、0.59，计算回收率，平均加样回收率为109.30%，RSD = 0.84%（n = 9）。

2.8 芒果叶中总黄酮测定

精密称取芒果叶0.5 g，揉碎，用100 mL50%乙醇80℃回流3 h，冷却过滤。精密吸取滤液0.50 mL于10 mL容量瓶中，按“2.3”操作步骤，于紫外分光光度计510 nm处测定吸光度。由标准曲线求出各供试品中的总黄酮浓度，并按月汇总计算不同采收期的芒果中总黄酮百分含量，结果表明，不同采收期芒果叶中黄酮的含量有差别，其中以1月、11月份总黄酮含量较高，5～7月含量最低。见表1及图1。

3 讨论

有文献报导芒果中的黄酮类化合物具有免疫调节及抗氧化作用[7-8]：研究结果证实芒果皮黄酮200 mg/（kg·d）、400 mg/（kg·d）剂量组可提高小鼠血液碳粒廓清速率；在体外能显著增强小鼠腹腔巨噬细胞吞噬中性红的能力，免疫调节及抗氧化作用均呈剂量效应关系。王晓波等[9]研究发现芒果叶中总黄酮对O2-及·OH自由基具有一定的清除能力，清除能力与浓度有明显的量效关系，即随浓度增加而增加。芒果叶中总黄酮类成分体外可抑制H2O2诱导肝匀浆的脂质过氧化作用，能减少H2O2诱导的红细胞溶血的发生。研究结果提示芒果中的黄酮类化合物具有免疫调节及抗氧化作用，芒果叶中富含黄酮类成分，具有广泛的开发前景和利用价值，有进一步综合开发的价值。

芒果果实以其形、色、香、味俱佳而有“果王”之称，在热带、亚热带地区著名出口水果中占有重要的地位。我国是芒果主要生产国之一， 广泛分布于广东、台湾、广西、海南以及福建、云南、四川等省、自治区，且四季均可采摘，芒果叶与芒果果实中均含黄酮类成分，芒果叶药材资源非常丰富。但目前缺少芒果叶开发的文献报导，限制了其临床应用。应合理开发芒果叶资源，加强其药效基础研究，为临床应用提供充分的药学、药理学依据， 亦有待在系统的药效学、药代动力学、分子药理学和制剂学等方面进行进一步的研究工作[5]。

本试验结果表明，不同采收期芒果叶中黄酮的含量有差别，其中以1月、11月份总黄酮含量较高，5～7月含量最低。故在进行芒果叶中黄酮成分的研究时应注意采收期的影响。

[参考文献]

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[3] 张小坡，裴月湖，刘明生，等. 海芒果叶中黄酮类成分的研究[J]. 世界科学技术（中医药现代化），2010，12（3）：423-425.

[4] 汪敏，王维民，陈良. 金黄芒果废弃物中总类黄酮含量的测定[J]. 农产品加工·学刊，2006，85（12）：42-44.

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[8] 文良娟，刘昊，王维. 不同品种芒果总黄酮的抗氧化活性[J]. 食品科学，2011，32（19）：79-82.

[9] 王晓波，刘冬英，邹志辉，等. 芒果叶总黄酮抗氧化作用研究[OL]. .

（收稿日期：2012-11-30 本文编辑：袁 成）