济生肾气丸和非那雄胺联合应用对大鼠前列腺增生模型的影响

【摘要】 目的 探讨济生肾气丸和非那雄胺联合应用对鼠前列腺增生模型的影响。方法 将50只雄性 Wistar 大鼠，随机分为模型组(30只)、假手术组(10只)，正常对照组。造模成功后将30只模型鼠随机分为非那雄胺治疗和济生肾气丸和非那雄胺联合应用治疗组、阴性对照组，继续给予皮下注射丙酸睾酮 4 mg/kg 造模,连续4周；假手术组继续给予皮下注射等量橄榄油4周。各组实验鼠分别于注射4周后处死，取出前列腺，光镜下观察其形态学变化，计算各实验组前列腺指数(PI)。结果 与阴性对照组相比，给药4周后非那雄胺与济生肾气丸和非那雄胺联合应用治疗组PI相比较，P

【关键词】非那雄胺;济生肾气丸;前列腺增生;大鼠

良性前列腺增生(BPH)是中老年男性的常见病。50岁以上的男 BPH的发病率可达85%,70岁以上男性发病率为90%[1]。BPH 主要是由于双氢酮在前列腺内过度积聚，导致间质细胞增生而引发，其临床主要表现有尿频、夜尿增多、尿不净、排尿困难等，严重影响患者的生活质量，重者可引起尿潴留、上尿路积水等一系列并发症，最终导致膀胱及肾功能损害[2-4]。非那雄胺(5 mg)为特异性的 5α-还原酶抑制剂，通过对5α-还原酶抑制作用，造成前列腺组织中细胞萎缩和凋亡(程序性细胞死亡)，缩小前列腺体积，改善尿道阻塞，从而改善前列腺增生患者的症状。济生肾气丸的作用是使膀胱颈、前列腺、前列腺包膜平滑肌松弛，尿道和膀胱阻力减低，从而减轻前列腺增生引起的尿道阻塞症状。本研究通过济生肾气丸和非那雄胺联合应用对鼠前列腺增生模型的影响，探讨两药合用疗效是否优于两种药物单用的疗效。

1 材料与方法

1．1 材料 雄性Wistar大鼠，鼠龄5~8个月，体质量120 g左右。购自辽宁中医药大学动物实验中心。丙酸睾酮注射液，上海第九制药厂生产，剂量100 mg/ml。

1．2 实验动物分组 选用成年雄性Wistar大鼠50只，正常对照组10只，假手术组10只，模型组10只，非那雄胺组10只，保列治组10只。

1．3 实验方法

1．3．1 前列腺增生动物模型的制备 选用成年雄性Wistar大鼠50只，常规饲养3 d后，除正常组、假手术组，其余两种药物实验组、模型组的大鼠行去势手术，切除双侧；假手术组行相同手术，仅切开皮肤，暴露双侧，但不予切除。药物实验组及模型组Wistar 鼠予皮下注射丙酸睾酮 4 mg/kg 造模[5]，连续 4周；假手术组 10只 Wistar 鼠皮下注射等量橄榄油。4周后随机处死造模鼠，取出其右侧前列腺，HE染色，光镜下观察示鼠前列腺腺体排列明显密集，腺腔呈锯齿扩张明显，呈状增生突向腺腔内；证实模型造模成功。

1．3．2 药物实验组的应用 将药物实验组 20只 Wistar 鼠随机分为非那雄胺组(10 U/0．1 ml)及保列治组(10 U/0．1 ml)、阴性对照组(0．1 ml 生理盐水。麻醉成功后取下腹正中切口，切开腹壁进入盆腔，暴露前列腺腹侧叶，取右腹侧叶为注射部位,注射完后依次缝合各层切口。假手术组仅切开腹壁，暴露前列腺，但不行任何干预措施。术后各组继续予皮下注射丙酸睾酮 4 mg/（d•kg）维持,假手术组皮下注射等量橄榄油,连续4周。4周后处死各组实验鼠,取出前列腺。

1．3．3 组化标本制备 对实验动物用1%戊巴比妥钠(40 ml/kg)腹腔麻醉后开胸，经左心室70滴/min滴入1%肝素钠的生理盐水500 ml，同时剪开右心耳。继用0．1 mol/L磷酸盐缓冲液(PBS,pH=7．4)配制的固定液(含4%多聚甲醛)灌流固定。取出实验动物的大脑组织，放入含4%多聚甲醛PBS的固定液中进行后固定大约2 h，之后将实验动物的大脑组织切成薄片移入含20%蔗糖的PBS中。在4℃冰箱中存放，至组织薄片沉底，经水包埋，恒冷箱连续横切片，片厚20 μm。经OCT包埋，恒冷箱连续切片，片厚16 μm，-70℃保存备用。

1．3．4 尼氏染色冰冻切片吹干，经PBS漂洗5 min×3次，将切片置入1%甲苯胺蓝溶液中37℃孵育90 min，取出后用蒸馏水冲洗，PBS漂洗5 min×3次，梯度酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封片，光学纤维镜下观察。

1．4 前列腺指数 用电子天平称各组实验鼠体质量和双侧前列腺质量,计算前列腺指数(prostate index,PI)。前列腺指数=前列腺质量(mg)/鼠体质量(g)×100%。

1．5 统计学方法 所有数据采用 SPSS11．0 统计软件包分析处理，多组间比较采用方差分析，各组间如果方差不齐则采用非参数法，两组间比较采用 t检验。

2 结果

2．1 各实验组前列腺指数(PI)，见表1。

2．2 各实验组前列腺组织病理学变化 正常对照组及假手术组：腺体组织被覆单层立方或矮柱状上皮，基底膜完整，游离缘可见纹状缘，腺上皮排列规则，无状结构，腔内可见分泌物，腺体无囊性扩张。给药前后镜下结构无差异。

动物模型组：腺体组织明显增多；腺上皮排列较为复杂，状结构多见，并见状延伸与对侧上皮或上皮相连，形成网状结构，显示腺体上皮组织增生活跃；间质也有不同程度增生，毛细血管增生扩张、充血。

非那雄胺与济生肾气丸和非那雄胺联合治疗组相比较腺体萎缩明显，腺体成分增多。非那雄胺与济生肾气丸和非那雄胺联合组间比较，有统计学差异。

3 讨论

BPH 临床表现为刺激症状，如尿频、尿急、尿失禁等，和梗阻症状如排尿费力、射程变短等，病程进一步发展，可出现血尿、尿路感染、尿潴留、上尿路积水等并发症，如不及时诊治,最终导致膀胱及肾功能损害。临床治疗 BPH 目标是缓解或减轻患者的临床症状，预防并发症，减少治疗的不良反应[6]。

非那雄胺(5 mg)为特异性的 5α-还原酶抑制剂，通过对5α-还原酶抑制作用，造成前列腺组织中细胞萎缩和凋亡(程序性细胞死亡)，缩小前列腺体积，改善尿道阻塞，从而改善前列腺增生患者的症状。济生肾气丸，作用于前列腺和膀胱颈平滑肌的α1肾上腺素受体，使膀胱颈、前列腺、前列腺包膜平滑肌松弛，尿道和膀胱阻力减低，从而减轻前列腺增生引起的尿道阻塞症状。单用5α-还原酶抑制剂经临床试验证实治疗 BPH 是有效的［7~8］。

本实验通过研究非那雄胺与济生肾气丸和非那雄胺联合对鼠前列腺增生模型的影响发现，两种药物联用显著地降低了鼠前列腺增生的进展，有望成为临床治疗前列腺增生的中西医的新方法。

参考文献

［1］ Walsh PC.Treatment of benign prostatic hyperplasia.N Engl Med,1996,335：586-587.

［2］ Barry MJ,Roehr born CG.Benign prostatic hyperplasia.BM,2001,323：1042-1046.

［3］ Kortt Michael A,Bootman J Lyle.Phytotheraph in treatment of bengin prostatic Lyperplasia：a critical review.Clinical Therapeutics,1996,18(6)：1227-1241.

［4］ 郭应禄.泌尿外科专集(一)：前列腺增生及前列腺癌.人民卫生出版社，1998：25-54.

［5］ 裴发光，林福地，李金雨，等.前列腺增生组织中细胞凋亡调控基因的表达.临床泌尿外科杂志,2000,15：(7):32-33.

［6］ Barry MJ,Roehrborn CG.Benign prostatic hyperplasia.BM,2001,323：1042-1046.

［7］ Oesterling JE.Benign prostatic hyperplasia：medical and minimally invasive treatment options.N Engl Med,1995,332：99-109.

［8］ De la Rosette JJ,Alivizatos G,Madersbacher S,et al.EAU guidelines on benign prostatic hyperplasia(BPH).Eur Urol,2001,40：256-263.