湘西土家药黄瓜香对红细胞自氧氧化溶血的影响

摘 要 目的：研究黄瓜香对红细胞自氧氧化溶血的作用。方法：在540nm波长处，采用可见光分光光度法进行测定。结果：黄瓜香对红细胞自氧氧化溶血表现出不同程度的抑制作用，浓度在0.75g/ml时抑制作用最强。结论：黄瓜香在红细胞自氧氧化过程中能抗氧自由基引发的膜脂质氧化，保护细胞膜，对红细胞自氧氧化损伤有保护作用。

关键词 黄瓜香 红细胞氧化溶血 阴离子氧 自由基

随着自由基医学和自由基生物学的发展，自由基致脂质过氧化损伤作为一个新的致病因素受到国内外广大生物学和医学工作者的极大关注。研究表明：很多疾病的发生发展与自由基反应有关，特别与自由基引发的脂质过氧化反应有关。天然抗氧化剂安全，低毒，符合新世纪人们对健康的需求，因此，从资源丰富的天然药物中寻找抗氧化剂已成为该领域研究的一个重要方向。本实验采取红细胞体外氧化的方法对湘西地区广泛生长的土家族药物黄瓜香进行研究，探讨其抗氧化的作用。

1 材料与方法

1.1 药品及试剂

黄瓜香水提物，PBS（磷酸盐缓冲溶液）实验用水为双蒸水，均由吉首大学医学院机能实验室提供，723型可见光分光光度计。

1.2 实验动物

昆明种大鼠，年龄6~8周，重150~200g，购自湘雅医学院。

1.3 红细胞（RBC）悬液的制备

取大鼠血液肝素抗凝，离心除去血浆用PBS洗3次，然后用PBS配成1%RBC悬液。

1.4 黄瓜香对红细胞自氧氧化的影响

取试管6支分3组，分别加1%RBC 2ml，分别加入含不同浓度（1.00g/ml，0.75g/ml，0.50g/ml）的黄瓜香水提取液的RBS溶液40μl。另取4管各加1%RBC 2ml，其中2管加PBS溶40μl，另2管加蒸馏水40μl，均不加黄瓜香，放37℃水箱温浴24h后离心（2500rpm，１０min），上清液在540nm处测定光密度（O.D值），以不加黄瓜香为100%溶血，计算溶血度［１］。

1.5 溶血度及抑制率的计算

以对照组为100%溶血

溶血度=待测药品 A值/对照组 A值×100%

抑制率=(对照组溶血度-受试药物组溶血度)/正常组溶血度×100%。每次设3支平行管，取平均值为一次实验的数据，实验重复3次，求x±s，经方差分析，Student-New-man-Kauls检验。

2 结果

黄瓜香对红细胞自氧氧化溶血的抑制作用如表1示，黄瓜香对红细胞的自氧氧化溶血有较强的抑制作用，且浓度为0.75g/l时，溶血度为22.0%，抑制率为89.0%，溶血度明显低于黄瓜香其他剂量组，抑制作用占明显优势。提示红细胞自氧氧化溶血度与黄瓜香的浓度呈一定的关系。

3 讨论

黄瓜香学名蔓茎堇、葡伏堇，属堇菜科堇菜属（Viola diffusa Ging）多年生草本植物，其化学成分主要为黄酮、糖类、粘液质，作为蔓茎堇菜的主要有效化学成分的黄酮，黄瓜香是一种很有发展前途的中草药［2］，具有极大的药用价值，但药理作用研究较少。

生物类黄酮是植物次级代谢产物，广泛地存在于植物中，具有抗氧化保护心脑血管、利胆保肝、抗癌、抗衰老等多种生物活性［3］。红细胞处在充足的氧环境中，无细胞器，含有引发并启动催化脂质过氧化作用的金属络合物血红蛋白，膜上又含有丰富的多价不饱和脂肪酸，因此，红细胞膜易受到氧自由基攻击发生脂质过氧化反应［4］。红细胞在体外自氧氧化后，可产生丙二醛（MDA），它是脂质过氧化的主要产物，可交联磷脂及蛋白质，也可使蛋白质的巯基氧化，从而损伤红细胞膜，引起溶血。

黄瓜香提取物体外抗溶血作用实验表明：黄瓜香水提物浓度为0.75g/l时能够显著减少红细胞溶血（P＜0.05），表明黄瓜香提取物是良好的抗氧化剂。

黄瓜香水提物抗氧化作用机制可能在于：黄瓜香提取物成分中含有黄酮结构，能提供大量的酮羟基还原自由基，从而起到抗自由基作用。

（土家族药物黄瓜香的鉴别由吉首大学医学院民族医药研究室提供）

参考文献

1 李宝山，金玉等.珍珠丸1号2号水提液对红细胞氧化溶血及血红蛋白的影响.内蒙古医学杂志，1997，（01）

2 朱天倬，王红兵等.黄瓜香的毒性试验.湖南农业大学学报（自然科学版），1993，（03）

3 李先辉，李春艳，吕江明等.黄瓜香水提物体外抗氧化活性实验.吉首大学学报，2006，（05）

4 阳冠明，叶司原，利基林.山莨菪碱对红细胞自氧化的影响.中国药理学通报，1999，（05）

(收稿日期：2007年5月20日)