浅谈接触DNA检验提取纯化的方法比较与法学应用

摘要：目的：探讨分析接触DNA检验提取纯化的方法比较与法学应用。

方法：对接触DNA检验提取纯化的方法进行比较分析，对法学应用价值进行探讨。

结果：接触DNA检验提取纯化的方法包括C-有-柱纯化法、磁珠纯化法、elean-up系统纯化法，C-有-柱纯化法是接触DNA检验提取纯化的实用性较好的方法，且检验的成功率较高。对于特殊的、疑难的、微量的、降解的生物检材据有较好的检验效果。DNA检验在法学中的应用主要体现在对刑事案件、民事纠纷、尸源的个体识别上。

结论：接触DNA检验提取纯化的方法中C-有-柱纯化法实用性较好、成功率较高。DNA检验在法学中的应用价值巨大，是处理各类刑事案件的重要检验技术。

关键词：DNA检验提取纯化方法比较法学应用

【中图分类号】R9【文献标识码】B【文章编号】1671-8801（2013）03-0288-01

接触DNA检验是法学中重要的检验技术，同时也是DNA检验热点技术和难点技术。接触DNA检材是指脱落的人体皮肤粘膜细胞，主要包括脱落的口腔细胞和脱落的体表细胞及人体的排泄物和分泌物[1]。所有与人体皮肤粘膜有过接触的东西，均能使接触者的脱落细胞留下。脱落细胞作为物证可在犯罪现场、犯罪嫌疑人和被害人的生活用品上存在。但犯罪分子如果对犯罪现场进行破坏，对较为明显的生物物证进行处理，脱落的人体代谢细胞痕量微小常被忽视，给案件的侦破带来较大的困难。在这些痕量微小的脱落的人体代谢细胞中提取到满足法医需要的DNA，是案件成功侦破的关键，是案件侦破的重要线索和案件定性及量刑的科学证据。采用有效的方法对接触检材进行提取，在接触DNA检验中是较为关键的步骤[2]。本文旨在探讨分析接触DNA检验提取纯化的方法比较与法学应用，具体报告如下。

1仪器及材料

电泳仪（GE）；紫外检测仪（GE）；离心机（贝克曼）；恒温水浴锅（上海柏欣）；离心管（Eppendorf）；PEPIPET（Eppendorf）；吸头；吸管，菌株（Y1090 r）；蛋白胨（安琪酵母股份有限公司）；酵母提取物（安琪酵母股份有限公司）；氯化钠（天津科密欧有限公司）；硫酸镁（天津科密欧有限公司）；Ttis；EDTA；SDS；盐酸；硼酸；醋酸；醋酸钾；氢氧化钠；乙醇；琼脂糖；葡萄糖溶菌酶。

2方法

2.1C-有-柱纯化法。采用5%Chelex100法能够对大部分的生物检材DNA进行提取，同时由于生物检材的不同，相应加入5%Chelex100的量也不同。人体的骨骼、牙齿、毛发、指甲等硬组织需要加入DTT和PK，而其他的人体组织只需要加入pK。对于1根脱落的毛囊，加入10μl的5%Chelex100，进行离心，如上清直接的PCR扩增为阴性，需要使用C-有-柱纯化法进行纯化浓缩。C-有-柱纯化法可对留在汉潜指纹、脱落的毛囊、脱落的毛干、果皮、汗渍等痕量微小的脱落的人体代谢细胞进行提取，检出Amel和9-15个STR基因座。其中不同厂家的平衡酚的差别较大，有的平衡酚起到反作用，降解DNA。在检测过程中，如果使用平衡酚进行抽提后，水相离心的上清浑浊，则需要进行延长离心时间，或者重复提取，直到上清清亮。目前主要Microcon100方法进行浓缩纯化DNA[3]。

2.2磁珠纯化法。具有的优点是能够定量、操作简便、检测速度快，缺点是采用二步法以后用Chelex100对的DNASTR图谱不够全面、没有检出检材。且此法较采用直接有机法进行纯化的效果差。磁珠纯化法对毛干、指甲的STR检验的成功率较C-有-柱纯化法低[4]。

2.3elean-up系统纯化法。能够对染料、血红素进行去除，具有重要作用。

3法学应用

DNA检验在法学中的应用主要体现在对刑事案件、民事纠纷、尸源的个体识别上，例如对杀人案件、案件、亲子鉴定纠纷等案件中发挥着重要的作用，对于个体识别认定具有决定性意义。

4讨论

接触DNA检验提取纯化的方法包括C-有-柱纯化法、磁珠纯化法、elean-up系统纯化法，C-有-柱纯化法是接触DNA检验提取纯化的实用性较好的方法，且检验的成功率较高。对于特殊的、疑难的、微量的、降解的生物检材据有较好的检验效果。对于血斑、精斑、组织等常规的生物检材，在DNA的提取液同等量的情况下，C-有-柱纯化法和DNA IQ系统所提取浓缩的DNA量最多。就检材的范围而言，C-有-柱纯化法作为系统的提取纯化DNA的方法，可适用于所有生物检材。具有成本低、效率高、成功率高的特点。采用Chelex100法能够得到大部分的生物检材的DNASTR图谱，如果未得到结果可用有机纯化法获得。

随着DNA检验提取纯化技术的发展，更多的痕量微小的生物检材被利用，为案件的侦破提供主要的线索。事实证明，DNA在法学中的证明作用是其他证据无法替代的。DNA已经作为有效证据在司法判决、民事诉讼、刑事调查中发挥重要作用。

综上所述，接触DNA检验提取纯化的方法中C-有-柱纯化法实用性较好、成功率较高。DNA检验在法学中的应用价值巨大，是处理各类刑事案件的重要检验技术。

参考文献

[1]范晶.聚丙烯酰胺凝胶中DNA银染色检测方法的改进及其效果比较[J].中国医药导报，2011，（19）：16-17

[2]党华伟，毛炯，王惠，黄江平，白小刚.疑难生物检材法医DNA检验的现状与进展[J].法医学杂志，2012，（01）：43-44

[3]许发芝，吴胜国，李吕木，丁小玲.一种直接用于PCR扩增的山羊瘤胃微生物DNA提取方法的建立[J].中国微生态学杂志，2012，（01）：50-51

[4]王嘉，田逢春，王世元，刘晓.一种定位DNA序列短串联重复的办法[J].西南大学学报（自然科学版），2011，（09）：11-12