HPLC法测定止泻灵颗粒中甘油三油酸酯的含量

摘要：目的 建立HPLC法测定止泻灵颗粒中甘油三油酸酯的含量的方法。方法 采用Agilent Extend C18色谱柱，以乙腈-二氯甲烷（60：40）为流动相，流速为0.8 ml・min-1，采用蒸发光检测器，漂移管温度为70℃，氮气流速为1.2 L・min-1。结果 甘油三油酸酯的线性范围为0.281～3.502 μg，r=0.9986，平均回收率为100.81%，RSD为1.3%。结论 所建立的方法简便、定量准确，可用于止泻灵颗粒的质量控制。

关键词：薏苡仁；甘油三油酸酯；HPLC

止泻灵颗粒收载于《卫生部药品标准》中药成方制剂中的第十七册，是由党参、白术（炒）、陈皮、薏苡仁等十味药材组成的复方制剂，具有补脾益气，渗湿止泻的功效，用于脾胃虚弱所致的大便溏泄，饮食减少，食后腹胀，倦怠懒言，以及慢性肠炎见上述证候者等症的治疗，其中薏苡仁的主要有效成份为甘油三油酸酯。在于其他药物进行使用时有可能会出现药物相互作用。目前止泻灵颗粒的质量控制多数采用鉴别、检查等测定方式进行检测，无含量测定的方法，是为了更好地控制止泻灵颗粒的内在质量，确保患者的临床用药安全。本文采用高效液相色谱法测定该制剂中的甘油三油酸酯含量，现报道如下。

1 仪器与试药

Waters e2695高效液相色谱仪（美国）；Waters 2424蒸发光散射检测器（美国）；甘油三油酸酯对照品（批品：111692-201509，中国药品生物制品检定所）乙腈、二氯甲烷均为色谱纯，其他试剂均为分析纯，水为纯化水。

2 方法与结果

2.1色谱条件 色谱柱：Agilent Extend C18；（4.6mm×250mm，5μm）；流动相：乙腈-二氯甲烷（60：40）为流动相；检验波长：264 nm；流速：0.8 ml・min-1；柱温：25℃；ELSD参数：漂移管温度为70℃，氮气流速为1.2 L・min-1。理论板数按甘油三油酸酯峰[2]计算，应不低于3000。

2.2对照品溶液的制备 取甘油三油酸酯对照品适量，精密称定14.03mg，加流动相制成每1ml含甘油三油酸酯0.1403mg，作为对照品储备液（0.1403 mg・ml-1）。

2.3供试品溶液的制备 取装量差异项下的本品，混匀，取适量，研细，取约0.6 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入流动相50 ml，密塞，称定重量，浸泡2 h，超声处理（功率300W，频率50 kHz）30 min，放冷，再进行称重，用流动相补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.4阴性样品溶液 按相应的比例及工艺制备缺薏苡仁的样品，按"2.3"项下方法配制阴性溶液，分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液和阴性供试品溶液10 μl，按照上述色谱条件进样，记录色谱图，见图1，表明在本实验条件下，处方中其它成分与甘油三油酸酯分离度良好，阴性供试品溶液在与对照品峰相应处未出现色谱峰。

2.5线性关系考察 在上述色谱条件下，精密吸取对照品储备液2、4、6、8、10、15、20、25μl，注入液相色谱仪，测定峰的面积，以进样量（μg）的对数（X）为横坐标，以峰面积的对数（Y）为纵坐标，作为曲线标准，并采用最小二乘法来进行计算，最后得出回归方程：Y=1.2719X+3.7359 r=0.9986结果表明甘油三油酸酯在0.281～3.502μg的范围内呈线性关系较良好。

2.6精密度试验 精密吸取对照品溶液（0.1403 mg・ml-1） 10μl，连续进样5次，记录峰面积，其峰面积RSD=0.87%（n=5）。

2.7稳定性试验 取供试品溶液（批号：20141008），每隔2 h，进样1次，进样量10 μl，重复进样5次，记录峰面积，结果5次进样甘油三油酸酯峰面积RSD=1.21%（n=5）。表明供试品溶液在8 h稳定。

2.8重复性试验 取批号为20141008的样品，按"2.3"项的方法进行制备供试品溶液，共5份，测定溶液的含量，为每袋0.38 mg，RSD=0.97%（n=5）。

2.9加样回收率试验 精密称取已知含量的同一批号（批号：141008，含量0.03228 mg・g-1）的样品0.3 g，分别精密加入甘油三油酸酯对照品溶液（0.01631 mg・ml-1）10 ml，按供试品溶液的制备方法制备及上述色谱条件测定，计算溶液的回收率，结果显示，该溶液的回收率平均值为100.81%，RSD=1.3%（n=6）。

2.10样品含量测定 精密吸取甘油三油酸酯对照品溶液与供试品溶液（批号：141008、140611、140307）10 μl，按上述色谱条件测定，记录峰面积，以外标法计算样品中甘油三油酸酯含量分别为每袋0.39、0.41、0.44 mg（n=3）。

3 讨论

取样品进行了回流、索氏提取、超声处理等提取方法进行检测，结果显示超声处理提取方法既方便又提取效率高。

参考文献：

[1]王隶书，程东，于秀明.抗病毒滴丸中连翘苷的HPLC测定[J].中国药师，2005，8（3）：216-217.

辑/金昊天