血常规检测仪器法与手工法的比较

【中图分类号】R457【文献标识码】A 【文章编号】1672-3783(2010)07-0165-02

【摘要】随机抽取了500份静脉血标本,使用库尔特全自动血细胞分析测定白细胞、淋巴细胞、中间细胞、中性粒细胞、红细胞、血红蛋白、血小板,并与传统的手工法进行对照,两组数据的标准差和变异系数经统计学处理,除中间细胞分类外差别均无显著性(p>0.05),变异范围均属良好,污染率几乎为零。结论:库尔特全自动血细胞分析仪对于血常规只能作为正常标本的筛选,异常标本必须用显微镜手工法检测。

【关键词】库尔特全自动血细胞分析仪;手工法;光学显微镜

血细胞计数和分类是医院检验科最常用的检验项目之一,随着医学检验的不断发展以及电子技术在医学检验领域中的广泛应用,库尔特全自动血细胞分析仪已广泛应用于临床,在一定程度上取代了传统的手工法计数及光学显微镜染色镜检分类法,那么,使用现代化的先进仪器对白细胞、淋巴细胞、中间细胞、中性粒细胞、红细胞、血红蛋白、血小板的检测,其结果的可靠性如何?为了探讨这个问题,笔者随机抽取了500份住院病人静脉血标本,用库尔特全自动血细胞分析仪测定了白细胞、淋巴细胞、中间细胞、中性粒细胞、红细胞、血红蛋白、血小板,并与传统的手工法结果进行对比分析,现报告如下:

1、 材料和方法

1.1、材料

1.1.1、仪器:库尔特全自动血细胞分析仪(Coulter-JT),普通光学显微镜,计数池。

1.1.2、试剂:采用库尔特全自动血细胞分析仪(Coulter-JT)的配套试剂,包括溶血剂、稀释液、清洁液。

1.1.3、标本来源:随机选取住院病人500人,其中男270人,女230人,年龄20岁―80岁之间,抽取静脉血0.5―1.0ml,以EDTA-K220µl抗凝,混匀待检。

1.2、方法:对同一病人血标本进行仪器法和手工法分别测定白细胞、淋巴细胞、中间细胞、中性粒细胞、红细胞、血红蛋白、血小板。

1.2.1、仪器测定:采用库尔特全自动血细胞分析仪(Coulter-JT)及其配套试剂,使其保持最佳工作状态,经质控物测试后,在标准状态下,开始检测准备好的标本,严格按仪器使用说明进行操作。

1.2.2、 手工法测定【1】:①血细胞计数:取同一份病人静脉血20µl,用0.38ml 白细胞稀释液稀释后,混匀充入标准计数池内,静置2―3分钟后,低倍镜计数计数池内四角四个大方格内的白细胞数,并换算成每升血液的白细胞数。②显微镜分类:用同一份病人的静脉血制作适宜、头体尾分明、边缘整齐的血膜片,经瑞姬氏染色后,油镜下,在血膜片的体尾交界处分类200个白细胞。③红细胞计数:取同一份病人静脉血10µl,用2.0ml 红细胞稀释液稀释后,混匀充入标准计数池内,静置2―3分钟后,低倍镜计数计数池内中间大方格的四角和中央5中方格内的红细胞数,并换算成每升血液的红细胞数。④血红蛋白测定:用氰化高铁血红蛋白法测定血红蛋白。取同一份病人静脉血20µl,加入5ml血红蛋白转化液中,混匀,室温静置5分钟后,以转化液调零,于λ=540nm(光径1cm)测吸光度A,并换算成每升血液中的血红蛋白的量。⑤血小板计数:取同一份病人静脉血20µl,用0.38ml 血小板稀释液稀释后,混匀10分钟后,混匀充入标准计数池内,静置15―20分钟后,用高倍显微镜精确计数中央大方格5个中方格内的血小板数,并换算成每升血液中的血小板数。

1.2.3、统计学处理:①以手工法计数和分类作为参考方法与仪器的分析结果,用计算器进行相关性分析。②采用配对资料t检验的方法。

2、结果

见表一及表二

表一仪器法及手工法检测结果标准差(s)及变异系数(cv)

手工法 仪器法

指标 s cv(%) s cv(%)

WBC 2.43 37.01 2.63 36.37

GR 13.26 20.56 13.15 21.13

LY 12.86 38.68 12.48 42.18

MO 1.48 2.46 2.66 33.36

RBC 0.78 18.85 0.83 20.11

HB 23.88 19.44 24.24 19.06

PLT 74.23 51.38 89.15 53.78

表二 显微镜分类与仪器分类的比较(n=300)

GR(%) LY(%) MO(%)

仪器 镜检 仪器 镜检 仪器 镜检

x 62.8478 62.1378 33.5646 36.5571 3.9292 1.3251

s 13.55 16.82 13.65 16.76 3.01 1.88

r 0.8394 0.8195 0.1057

p >0.05 >0.05

3、 讨论

3.1 从表一统计结果看,库尔特全自动血细胞分析仪对于白细胞计数、红细胞细胞计数、血红蛋白含量、血小板计数与传统的手工法计数结果大致相符。

3.2 从表二统计结果看,显微镜法与仪器法对中性粒细胞、淋巴细胞分类结果两者都接近,相关系数分别为0.8394和0.8195,无显著性差异(p>0.05),而显微镜法与仪器法对中间细胞分类的相关性较差(r为0.1057),差异极显著(p

3.3 本次随机抽取了500份临床标本,同时用传统的手工法和仪器法进行对照,两组数据标准差(S)和变异系数(cv%)经统计学处理,除中间细胞分类外,差别均无显著性(p>0.05),变异范围均属良好,污染率几乎为零。库尔特全自动血细胞分析仪和传统的手工推片法二者对淋巴细胞和中性粒细胞的分类结果无显著差异,而对嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞和单核细胞分类结果略差,而且须保留手工分类技术,尤其是在白细胞计数较低时,自动分类将造成失误,这点希望操作者注意。

3.4 血小板直方图正常者,同手工计数值无显著性差异,但对于血小板数较低的样品,仪器计数可信度较差,应以手工法复查。仪器计数血小板快速简便,精密度高,重复性好,但仪器计数只是一种过筛手段,而手工法能排除小红细胞、红细胞碎片、血小板群集等干扰,并能识别异常血小板,对于异常标本临床检验者应注重手工法进行复核,严防漏诊、误诊,以免给临床提供错误数据。

3.5 库尔特全自动血细胞分析仪和传统的手工法分类的相关性以中性粒细胞和淋巴细胞为佳,而两法对中间细胞分类的相关性较差,说明仪器对中间细胞的识别能力远不如手工推片染色显微镜分类,这正是仪器对中间细胞分类的不足之处,它不像推片染色显微镜分类那样,除根据细胞的大小外,还要根据细胞的染色反应、核的形态以及染色质着色情况,胞浆着色及颗粒才能确定细胞的类型。因此,在临床工作中,确实需要观察中间细胞的情况下,仍应该用手工推片染色显微镜分类法。

笔者认为,在临床工作中,如果白细胞直方图、白细胞总数及其分类均正常的情况下,非血液科病人选择血细胞分析仪进行简单的白细胞分类是可行的,它可以使我们从繁重的手工镜检工作中摆脱出来,减轻劳动强度。然而,也不能完全排除临床上存在的阳性结果,要经常与临床医生保持联系,听从临床医生的反馈意见。对临床特殊情况(如血液病患者),要根据全自动血细胞分析仪的直方图与总数及分类的值对照分析,必须做血涂片染色显微镜镜检。总之,血常规检测仪器法与手工法各有长短,应联合应用,互相补充。

参考文献:

【1】俞善丁等主编。临床基础检验学。第一版,北京:人民卫生出版社,1997:57

作者单位: (宁夏石嘴山市第一人民医院检验科,753200)