老年原发性高血压患者ACE基因I/D多态性与厄贝沙坦降压疗效的关系

[摘要] 目的 探讨老年原发性高血压患者ACE基因I/D多态性及其与厄贝沙坦降压疗效的关系。方法 入选老年原发性高血压患者30例，予单药厄贝沙坦150 mg/d治疗8周，观察降压疗效，同时采用PCR法确定入选患者ACE基因I/D多态性的分布情况。结果 服用厄贝沙坦后，老年原发性高血压患者ACE基因II型与ID+DD型收缩压降幅为（12.21±1.97）mmHg vs（12.25±3.13）mmHg（P>0.05）， 舒张压降幅为（5.93±1.54）mmHg vs（5.88±1.89）mmHg（P>0.05）， 两组患者血压降幅无显著差异无统计学意义。结论 未发现老年原发性高血压患者ACE基因I/D多态性与厄贝沙坦的降压疗效有关。

[关键词] ACE基因I/D多态性；原发性高血压；厄贝沙坦；老年

[中图分类号] R972.6 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742（2013）07（c）-0104-03

原发性高血压（Essential Hypertension， EH）是遗传与环境因素共同作用所致的多基因遗传病，是冠心病、脑卒中等心脑血管疾病的独立危险因素，严重影响人类健康。随着分子生物学的发展，高血压相关基因研究及基于基因型的个体化降压治疗成为研究热点。在血压的调节和高血压的发生发展中，肾素-血管紧张素系统（Renin-Angiotensin System， RAS）起着极重要的，有时是关键性的作用。目前高血压病的基因治疗也集中在针对RAS各个成分的基因上，该系统每个成分都被高度怀疑为高血压相关基因[1]。

血管紧张素转换酶（Angiotensin-Converting Enzyme， ACE）基因是RAS基因中主要的基因之一，位于染色体17q23区，约21 kb，含26个外显子和25个内含子。ACE基因的内含子16上有一个287bp的插入（Insertion，I）和缺失（Deletion， D）的多态性。因此ACE基因分为II、DD和ID 3种基因型[2]。该研究旨在探明ACE基因的多态性在老年原发性高血压患者中的分布情况，并探讨此多态性分布与血管紧张素II受体拮抗剂厄贝沙坦降压疗效的关系。以2011年1月―2011年12月该院门诊就诊的初发的1级原发性高血压患者30例为研究对象，现报道如下。

1 对象与方法

1.1 研究对象

选取在该院门诊就诊的初发的1级原发性高血压患者（年龄≥60岁）30例，其中男性16例，女性14例，年龄63～84岁，平均年龄（73.2±5.8）岁。入选患者均符合2005年中国高血压防治指南的诊断标准，即坐位收缩压≥140 mmHg和（或）舒张压≥90 mmHg，并排除继发性高血压、肝肾功能异常及糖尿病。所有患者均填写知情同意书。

1.2 方法

1.2.1 药物干预和血压测定 入选患者均服用厄贝沙坦（赛诺菲公司）单药治疗，150 mg/d，每4周由专人采用水银柱袖带血压计测量坐位右上臂血压，每次测量3次并计算均值，测量时间为上午8∶00―10∶00，共观察8周。

1.2.2 基因组DNA的提取 肝素抗凝外周血4 mL，应用红细胞裂解液提取白细胞，按照基因组DNA提取试剂盒（离心柱型）提供的实验步骤提取DNA。紫外分光光度计（Pharmacia Biotech）测定DNA浓度，并标化样品DNA浓度值至20 ng/μL。

1.2.3 ACE基因多态性测定 采用聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction， PCR）法检测ACE基因的多态性。引物序列：Forward：5'-GCCCTGCAGGTGTCTGCAGCATGT-3'，Reverse：5'-GGATGGCTCTCCCCGCCTTGTCTC-3' （江阴百桥国际生物科技孵化园有限公司设计、合成）。PCR反应体积10 μL，包括：10×buffer（含Mg2+）1 μL， 10 μmol/L上、下游引物各0.2 μL，10 mmol/L三磷酸脱氧核苷（deoxy-ribonucleoside triphosphate， dNTP）0.8 μl，基因组DNA20 ng，20 U/L Taq DNA聚合酶0.05 μL，消毒双蒸水6.75 μl。应用-PCR仪进行PCR扩增，反应条件为：94 ℃预变性3 min，94 ℃变性30 s，56.5 ℃退火30 s，72 ℃延伸60 s，共32个循环，最后72 ℃延伸10 min。PCR扩增产物在1.5%琼脂糖凝胶上电泳，进行多态性分析。

1.3 统计方法

应用SPSS11.5软件进行统计学分析。计数资料用百分数表示，计量资料用均数±标准差（x±s）表示，采用t检验。

2 结果

2.1 ACE I/D基因型在老年原发性高血压患者中的分布情况

PCR产物分为2种片段：597 bp的插入片段（I）和319 bp的缺失片段（D）。ACE基因分为3种基因型：II型（597 bp）；DD型（319 bp）；ID型（597 bp和319 bp的杂合子）（见图1）。

入选患者II基因型有14例，占总数的46.7%，其中男性6例，女性8例；ID基因型有13例，占43.3%，其中男性9例，女性4例；DD基因型有3例，占10%，其中男性1例，女性2例。

图1 老年EH患者ACE 基因多态性分析

M：DNA Marker，自上而下依次为500 bp，400 bp，300 bp，200 bp和100 bp。

1～5为其中5例患者的ACE I/D基因型电泳结果：1、3、4为II型，2为ID型，5为DD型。

2.2 ACE I/D基因型与厄贝沙坦对老年原发性高血压患者降压疗效的关系

根据ACE基因I/D基因型分布将入选患者分为II组和ID+DD组（由于本组资料中DD基因型只有3例，故将ID型和DD型合为一组）。两组的基线血压值比较，差异无统计学意义。

II组患者服用厄贝沙坦治疗8周，收缩压降幅为（12.21±1.97）mmHg，舒张压降幅为（5.93±1.54）mmHg。ID+DD组患者治疗后收缩压较基线水平下降了（12.25±3.13）mmHg，舒张压较基线水平下降了（5.88±1.89）mmHg。厄贝沙坦的降压疗效在2组不同基因型的患者间比较，差异无统计学意义（P>0.05），见表1。

3 讨论

临床研究发现不同个体对抗高血压药物治疗的临床反应差异很大。基因变异及其多态性是影响个体间药物反应差异的主要因素之一[3]。ACE基因的多态性对血中ACE浓度和活性起着重要作用，其中DD型ACE浓度和活性最高，ID型居中，II型最低。所以，D等位基因在ACE基因表达调控方面起活化作用，而I等位基因则起抑制作用。此外，DD型正常人及EH患者AT1基因表达最高，ID型次之， II型最低，提示D等位基因可能与血压的升高有关[4]。该研究中，DD基因型在老年EH患者中分布最少，II和ID基因型分布比例相当。II基因型和ID+DD基因型相比较，基线收缩压及舒张压均无明显差异，未发现D等位基因对老年EH患者血压水平的影响。该结果可能与研究病例数较少（仅30例）有关，尚有待进一步进行大样本人群的调查。

在高血压病程中，长期过度的RAS激活，尤其是血管紧张素II（Angiotensin II， Ang II）的增加是发生致死及致残性临床转归终点事件的中心环节。Ang II的合成有2种途径：ACE途径和非ACE途径。Ang II可与许多组织的细胞膜上的AT1受体结合使血压升高。血管紧张素转换酶抑制剂仅能抑制ACE途径AngII的产生，而AngII受体拮抗剂则提供了新的治疗方法[5]。

厄贝沙坦是一种口服的血管紧张素II受体（Angiotensin II receptor， AT受体）拮抗剂，血浆半衰期长达11～15 h。厄贝沙坦与血管紧张素竞争性地与AT受体结合，抑制AT1受体的同时激活AT2受体，增加内皮细胞中缓激肽及前列腺素的释放，上调一氧化氮的表达，发挥扩血管及降低血压的作用。同时厄贝沙坦不抑制缓激肽的降解，故而无干咳等不良反应，临床使用中患者依从性较好[6]。

该研究结果显示，对老年原发性高血压（1级）的患者，应用厄贝沙坦单药治疗8周，血压可降至140/85 mmHg左右，疗效基本满意。在这些受试者中，ACE基因II型与ID+DD型相比较，对厄贝沙坦的降压反应无明显差异，这与厄贝沙坦主要作用于RAS的终末环节AT受体有关。

总之，厄贝沙坦可有效治疗老年原发性高血压，ACE基因I/D多态性不影响其降压疗效。

[参考文献]

[1] 胡大一，黄峻，马长生，等. 心血管内科学高级教程[M]. 北京：人民军医出版社，2011：32-35.

[2] 李莉，杨建一，王文娟. RAS及其基因多态性与原发性高血压[J]. Int J Genet， 2006， 29（5）：389-392.

[3] Marteau JB， Zaiou M， Siest G， et al. Genetic determinants of blood pressure regulation[J]. J Hypertens， 2005（23）： 2127-2143.

[4] Jing L， Ningling Sun. A study of angiotensin converting enzyme gene polymorphism in essential hypertension[J].J China-Japan Friendship Hospital， 2005， 19（1）： 19-21.

[5] 马淑彦. 厄贝沙坦与硝苯地平联用治疗高血压临床观察[J]. China Prac Med， 2010，17（5）：146-147.

[6] 叶朝晖. 厄贝沙坦联合尼群地平治疗高血压43例临床疗效观察[J]. Guide of China Medicine， 2010，14（5）： 81-82.

（收稿日期：2013-05-24）