松鼠的资料范文

松鼠的资料篇1

[关键词] 头孢曲松钠；儿童；鼠伤寒沙门菌；肠炎；临床疗效

[中图分类号] R259 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742（2013）04（c）-0121-02

腹泻是发展中国家儿童常见病，约导致240万/年5岁以下儿童死亡[1]。1996―1999年美国调查引起细菌性食物中毒的常见病原菌时发现，沙门菌位居第2位（33%）。沙门菌食物中毒一直居我国细菌性食物中毒的首位（64%）[2]。目前常见的非伤寒沙门菌感染以鼠伤寒沙门菌为主[3]。鼠伤寒沙门菌肠炎与其他细菌所致的肠炎相比，其导致的腹泻时间较长且更难治疗。夏季是鼠伤寒沙门菌的感染高峰，容易通过食物传播，而新生儿、婴幼儿免疫功能相对低下，是鼠伤寒沙门菌的易感人群，多见于胃肠道疾病。林雄伟[4]等报道，

1 资料与方法

1.1 一般资料

该院儿科住院的小儿鼠伤寒沙门菌肠炎患儿共治疗86例。所有患儿均有黄绿色稀水便或脓血便，伴有不同程度发热，治疗前均收集大便做常规检查，粪便细菌培养均为鼠伤寒沙门菌。按入院先后随机分为头孢曲松钠组60例，其中男33例，女27例，年龄2个月～8岁，平均年龄11月，美洛西林钠/舒巴坦钠组26例，男17例，女 9例，年龄4月～11岁，平均年龄9月。

1.2 治疗方法

头孢曲松钠组，20～80 mg/（kg・d），加液静滴，1次/d；美洛西林钠/舒巴坦钠组（开林） 50～75 mg/（kg・次），加液静滴12 h/d。两组均口服蒙脱石散、妈咪爱，脱水者口服ORS液或静脉补液，但不用其他抗生素。

1.3 疗效判定标准

①显效：用药24～48 h后大便次数减少至≤2次/d或恢复到正常次数，大便常规检查正常，临床症状完全消失。②有效：用药48～72 h大便次数减少至≤2次/d，大便性状好转，大便常规检查RBC、WBC较前减少，临床症状基本消失。③无效：用药72 h大便次数仍2次/d或症状无明显好转，甚至病情加重而必须更换药者。

1.4 统计方法

全部数据用SPSS 11.0软件统计，计数资料用χ2检验。

2 结果

头孢曲松钠组总有效率78.3%，高于美洛西林钠舒巴坦钠对照组，差异有统计学意义（χ2= 33.7，P

60例头孢曲松钠组患儿中有13例（21.7%）对头孢曲松钠耐药，26例对照组患儿中有23例（88.5%）对美洛西林舒巴坦钠耐药，所有耐药患儿大便培养药敏结果显示对头孢西丁、哌拉西林他唑巴坦、头孢他定、美罗培南、亚胺培南等药敏感，选用敏感药物治疗后均症状好转，且复查多次复查大便常规、大便培养正常。

3 讨论

伤寒沙门菌是革兰阴性菌，与人类关系密切的约有50个血清型，其中鼠伤寒沙门菌最常见，约占25%～35%[5]，该菌主要通过粪-口传播，细菌侵入胃肠道后在小肠黏膜上皮细胞繁殖，造成肠黏膜充血、水肿及出血，亦产生肠毒素，故患者大便次数增多，性状多变，可以呈水样、蛋花样或脓血便，主要通过大便培养确诊。目前鼠伤寒沙门菌鼠伤寒沙门菌对氯霉素、氨苄西林等普通抗生素及磺胺类药物普遍耐药，对氟喹诺酮类药物耐药的病例亦日益增多，对第3代头孢菌素亦出现耐药。有研究显示2003―2008年鼠伤寒沙门菌对氨苄西林的耐药率，从4.4%～51.4%，对头孢噻肟的敏感率从100%降至82.8%，对磺胺甲唑/甲氧苄啶的敏感率从100%降至52.8%[6]。2010年复旦大学附属儿科医院一项研究显示，鼠伤寒沙门菌的耐药率普遍高于其他沙门菌。其对氨苄西林的耐药率已高达91.4%，对磺胺甲基异唑-甲氧苄啶耐药率亦高达82.8%，对第3代头孢菌素如头孢噻肟、头孢曲松的耐药率也接近30%[7]。

该研究中鼠伤寒沙门菌对头孢曲松钠的耐药率约为21.7%，对美洛西林钠舒巴坦钠耐药率达88.5%，耐药患儿大便培养均对庆大霉素、阿米卡星及左氧氟沙星敏感，可能与儿童很少使用该类药物有关。鉴于鼠伤寒沙门菌耐药率不断上升，所以临床医师要谨慎选用抗生素，避免滥用，并开展流行病学调查、研究其耐药机制，以更好为临床服务。

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松鼠的资料篇2

【摘要】 目的 探讨理肺化纤方对实验性大鼠的肺纤维化的防治作用。 通过气管内注射博莱霉素复制大鼠肺纤维化模型，给予理肺化纤方后，以肺指数和肺病理形态（包括光镜及透射电镜）为指标，观察理肺化纤方对实验性大鼠肺纤维化的。结果 该方能减轻博莱霉素诱导的大鼠肺泡炎及肺纤维化的程度。结论 理肺化纤方具有防治肺纤维化的作用。

【关键词】 理肺化纤方；肺纤维化

【Abstract】 Objective To discuss preventing and treating effect on rat model of pulmonary fibrosis by Lifei Huaxian prescription.Methods Reproducing rat model of pulmonary fibrosis by injecting bleomycin to trachea，then treat the rat models by Lifei Huaxian prescription，and observe the prescription’s effect on the target of pulmanory index and pulmanory pathology.Results decoction can depresses pulmanory index(P

【Key words】 Lifei Huaxian prescription；pulmanary fibrosis

肺间质纤维化（肺纤维化）为一组病因各异，表现相似的疾病谱，是多种弥漫性肺间质疾病的一种病理改变，是对损伤的过度修复。本病对人类健康危害极大，发病机制尚不十分明确，临床治疗效果不佳［1］。在中医传统著述中，没有与肺纤维化完全对应的病名，后世医者根据其临床表现将其归为“喘证”“痰饮”“咳嗽”“肺痿”“肺胀”“肺痹”“短气”等疾病范畴。临床症状多因肺气郁闭，血络阻滞，湿饮停聚三者互结所致，治疗当以宣肃肺气，活血通络，利湿化饮为主，根据此治疗原则，通过理肺化纤方（LFHX）即升降散（僵蚕、蝉蜕、姜黄、大黄）合理加用葶苈子、白芥子等药，进行复方，补充了中医经方防治肺纤维化的空白。本研究从形态学角度出发，旨在观察LFHX对博莱霉素大鼠肺纤维化的作用，从细胞水平探讨其作用机制，为临床防治肺纤维化提供依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 动物 SD大鼠60只，雌雄各半，体重250±20g，购自青海省实验动物中心，动物合格证号第零零壹号。

1.1.2 药品 LFHX煎剂：生药由甘肃中医学院附属药剂科提供，加水浸泡1h后煮沸30min，滤过取汁，再加水煎煮30min，滤过取汁。水浴浓缩为每毫升含1g生药，备用。博莱霉素：日本化药株氏会社，生产批号：Y32480，以无菌生理盐水稀释成2.5mg/ml的溶液，备用。强的松：浙江仙据制药股份有限公司，生产批号：030629，研成粉末，以蒸馏水溶解配成25%的混悬液，备用。

1.1.3 仪器 MP120-2型扭力天平（分度值：0.1mg，上海第二天平仪器厂）、CH型普通光学显微镜（日本OLYMPUS）、BX60-32-FB3-F01显微照相系统（日本OLYMPUS）、JEM-1230显微镜（日本电子株氏会社）

1.2 方法

1.2.1 动物分组 将购置大鼠分笼，喂标准颗粒饲料，自由饮水，在室温22±5℃，湿度75%，通风的条件下适应2天后按体重编号，依据随机数字表法分为5组，每组12只，雌雄各半。5组分别为：空白对照组，模型组，强的松对照组、LFHX治疗组、强的松加LFHX治疗组。

1.2.2 建立动物模型 各组大鼠分别用乙醚麻醉，仰卧于固定台上，固定头部及四肢，切开颈部皮肤，分离皮下组织，模型组、强的松对照组、LFHX治疗组、强的松加LFHX治疗组动物于气管软骨环之间穿刺一次性缓慢注入博莱霉素溶液，剂量为5mg/kg；空白对照组动物于气管软骨环之间穿刺，一次性缓慢注入生理盐水(2ml/kg)。然后立即将动物直立旋转，尽量使药液在肺内分布均匀。

1.2.3 给药 强的松组在造模第2日开始治疗给强的松灌胃（0.56mg/kg），LFHX治疗组在造模第2日开始治疗给LFHX煎剂灌胃(剂量为成人等效量4g/kg)，强的松加LFHX治疗组给药为上述两组的合剂。空白对照组和模型组给等容积温开水，均连续灌胃28天。

1.2.4 标本采集及制备 末次给药后2h全部杀检。肺组织制备：光镜：将右肺中叶取下，福尔马林固定。电镜：将右下肺靠外侧取1mm×1mm×1cm大小肺组织行戊二醛、锇酸双固定。

1.2.5 主要观察指标及方法 肺指数=肺重/体重

肺组织形态学：①HE染色、Masson染色，普通光镜下观察各组肺组织形态学特征，依据Szaipil等［2］方法将肺泡炎及肺纤维化程度分级：HE染色切片将肺泡炎程度分为-～+++级，Masson染色将肺纤维化程度分为-～+++级。②透射电镜观察。

1.2.6 统计学处理 计量资料采用单因素方差，两两作LSD-t检验，用均数±标准差(x±s)表示；等级资料各组间比较采用非参数秩和检验。P

2 结果

2.1 肉眼观察 空白对照组大鼠体重逐渐增重，活动良好，反应灵敏，双肺呈淡粉色，表面光滑，模型组大鼠精神萎靡、活动减少，反应迟钝，双肺体积略小，可见小片状凹凸不平的苍白灶，LFHX组，强的松组，LFHX加强的松组大鼠双肺未见明显异常改变。

2.2 各组动物肺指数的比较 见表1。

2.3 光镜观察 肺组织切片经HE及Masson染色分别显示肺泡炎及肺纤维化程度。

HE染色切片中空白对照组肺组织结构清晰，毛细血管正常，肺泡腔完整，有少数肺组织近胸膜处单核细胞数量较多。模型组肺组织中可见大面积肺间质中单核细胞浸润，肺泡间隔明显增厚，毛细血管明显增生，病变部位广泛，少数肺组织肺泡腔中亦有单核细胞浸润、大面积出血、部分肺泡呈囊状扩张。强的松对照组、LFHX治疗组、强的松加LFHX治疗组病变主要为肺泡间隔的增宽，极个别肺组织中见到肺泡腔中有单核细胞浸润及出血，程度均较模型组轻(见图1、图2)。

表1 各组动物肺指数的比较 (x±s)

松鼠的资料篇3

[关键词] 复骨方；骨折；愈合；骨组织形态计量学；生物力学；糖皮质激素性骨质疏松

[中图分类号] R285.5 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2014）10（a）-0014-05

Effects of Chinese Medicine Fugu Prescription on fracture healing of rats with glucocorticoid-induced osteoporosis

ZHU Bing1 LI Minyan1 LIU Zhihua2 SHI Jingwen3

1.Department of Pharmacy， Panyu District Hexian Memorial Hospital of Guangzhou City， Guangdong Province， Guangzhou 511400， China； 2.Department of Surgery， Panyu District Hexian Memorial Hospital of Guangzhou City， Guangdong Province， Guangzhou 511400， China； 3.Department of Laboratory， Guangdong Pharmaceutical University， Guangdong Province， Guangzhou 510006， China

[Abstract] Objective To observe the effects of Chinese Medicine Fugu Prescription on fracture healing of rats with glucocorticoid-induced osteoporosis （GIOP）. Methods 48 SD rats were randomly divided into 3 groups， with 16 rats in each group. Rats of basic group were received intramuscular injection of 1 mg/kg saline. Rats of other groups given intramuscular injection of Dexamethasone （1 mg/kg， once a day， 3 times a week） for 8 weeks to establish GIOP animal model. In the end of 8th week， all rats were established the bone fracture in the middle of right femora. On the 2nd day of modeling， basic and model group were given distilled water 10 mL/kg by intragastric administration， treatment group was given Chinese Medicine Fugu Prescription， once per day for 8 weeks. Bone mineral density （BMD） was examined by dual-energy X-ray absorptiometry. Rats were sacrificed after fracture 8 weeks， femurs were removed for biomechanics test and morphologic observation. Results The BMD value of mice femora in the treatment group was higher than that in the model group， there was statistically significant difference between them （t = 11.2532， P < 0.05）. The area percent of trabecular （TbAr%）， the number and the thickness of trabecular （TbN， TbTh） in the model group were all lower than those in the basic group， but the trabecular bone space （TbSp） was higher than that in the basic group， there were statistically significant differences （t = 3.5885， 7.4488， 9.0512， 10.0270， P < 0.05）. The TbAr%， TbN， TbTh in the treatment group were higher than those in the model group， while TbSp was lower than that in the model group， there were statistically significant differences （t = 2.3329， 5.3328， 5.9512， 10.9590， P < 0.05）. The maximum load， the maximum deflection and maximum stress in model group were lower than those in the basic group， there were statistically significant differences （t = 3.8944， 5.3915， 4.4739， P < 0.05 ）. The maximum load， the maximum deflection and maximum stress in the treatment group were higher than those in the model group， there were significant differences （t = 2.9251， 3.7628， 6.6926， P < 0.05）. Conclusion Chinese Medicine Fugu Prescription can increase BMD of GIOP rats with bone fracture， improve bone microstructure， improve bone biomechanical properties. Chinese Medicine Fugu Prescription can promote fracture healing of rats with GIOP.

[Key words] Chinese Medicine Fugu Prescription； Fracture； Healing； Bone histomorphometry； Biomechanics test； Glucocorticoid-induced osteoporosis

糖皮质激素（Glucocorticoid，GC）具有抗炎、抗病毒、抗免疫、抗休克等多种作用，由于GC良好和独特的药理作用，很多患者必须长期服用，大剂量长期使用糖皮质激素会对骨骼产生不良影响，造成糖皮质激素性骨质疏松，引发病理性骨折。目前，GC已成为继发性雌激素缺乏、老年因素之后导致骨质疏松症的第三大原因[1]。有调查表明，20%的患者在口服GC后的前12个月内发生了骨质疏松性骨折[2]，口服GC 5～10年后这一比例上升至50%[3]。骨折是糖皮质激素性骨质疏松症（GIOP）最严重的副作用之一，GC引起的骨折常常延迟愈合，致残率极高，又缺乏有效的预防和治疗方法。GIOP所致骨折是临床常见疾患，其发病急、愈合难，是骨科临床领域的一项难题。本研究以肌内注射地塞米松致大鼠GIOP，并建立GIOP大鼠股骨闭合骨折模型，观察分析中药复骨方促进模型大鼠骨折愈合的作用机制，为临床治疗GIOP骨折探索新的药物。

1 材料与方法

1.1 实验动物

选取3个月龄雌性SD大鼠48只，清洁级，体质量（280±20） g，由广东省医学实验动物中心提供，动物合格证号：SCXK（粤）2008-0002。实验过程中，所有动物在同等清洁环境下分笼饲养，饲养房温度（24±1）℃，湿度50%～70%，每天光照与黑暗时间各12 h，喂饲全价营养鼠饲料（购自广东中医药大学实验动物中心，合格证号：No.11002900006734），自由进水。在动物处死前第3、4天及第13、14天颈部皮下注射钙黄绿素20 mg/kg，进行体内荧光标记。

1.2 实验药物

地塞米松磷酸钠注射液（天津药业集团新郑股份有限公司，国药准字号H41021255，批号0807031）；青霉素（广州白云山天心制药股份有限公司，国药准字号H20013260）；麻醉剂水合氯醛为国产分析纯，3.5%水合氯醛（天津科密欧化学试剂有限公司生产，批号20110514）。

实验用中药复骨方由骨碎补、杜仲、续断、千年健、红花、归尾、川芎等组成，药材购自广州大参林药房，由广州市番禺区何贤纪念医院药房加工，药物煎煮后浓缩到含生药0.5 g/mL药液，4℃保存。

1.3 试剂与仪器

钙黄绿素（美国Sigma公司，规格5 g，批号C0875）。实验仪器：双能X线仪DEXA（LUNAR-DPXIQ型，美国GE Lunar公司）；SP1600型切片机（德国Leica公司）；RM2500型包埋机（德国Leica公司）；J-D200生物显微镜（深圳拓天仪器设备有限公司）；TE2000型荧光显微镜（日本Nikon公司）；计算机X射线摄像仪（日本柯尼卡美能达公司）；骨组织形态计量仪（型号OLYMPUS BX-51，美国BIOQUANT公司）；EleetroForce 3200生物材料实验仪（美国Bose Corporation公司）；骨折造模支架参照文献[4]制作。

1.4 方法

1.4.1 分组及建模 将实验动物随机分为3组，基础组、模型组和治疗组，各16只。每周称体重1次，并按体重调整给药剂量。基础组：给予肌内注射生理盐水1 mL/（kg・d），3次/周，8周后按照文献[4]方法手术造成大鼠右侧股骨骨折，骨折处采用金属内固定，术后3 d常规抗感染处理，予肌内注射青霉素100万U/kg。术后第2天开始给予蒸馏水10 mL/kg 灌胃，1次/d，持续8周。模型组：予肌内注射地塞米松（DEX）1 mg/kg，1次/d，3次/周，8周后手术造成大鼠右侧股骨骨折，骨折处采用金属内固定，术后常规抗感染处理同基础组，术后第2天开始给予蒸馏水10 mL/kg灌胃，1次/d，持续8周。治疗组：前8周造模同模型组，骨折术后第2天以中药复骨方药液10 mL/kg灌胃给药，1次/d，持续8周。

1.4.2 骨密度测定 实验8周末基础组和模型组大鼠腹腔注射麻醉剂，以双能X射线吸收仪及所附带的小动物软件测量大鼠活体全身骨密度（BMD），验证骨质疏松模型的建立是否成功。16周末麻醉后处死大鼠，在无菌条件下取双侧股骨，4℃避光保存在70%乙醇中，应用DEXA以右侧股骨骨痂为中心，扫描2 cm阶段，测定骨痂骨密度值。骨密度采用单位面积内的骨矿物质含量表示（g/cm2）。

1.4.3 放射学观察 骨折术后8周，在麻醉状态下，大鼠俯卧位，双下肢分开，膝关节微屈曲，用X线机拍右侧股骨CR片，摄片条件为：投射球管距离标本90 cm，电压45 kV，电流3.2 mA；观察大鼠骨痂生长及骨折愈合情况。

1.4.4 骨组织形态计量学检测 实验16周末将大鼠按期处死后剥离股骨，分离股骨及所附着的组织，截取股骨干骺端组织，生理盐水冲洗后，进行固定、乙醇梯度脱水，石蜡包埋，Leica机连续切片（5 μm），采用甲苯胺蓝染色，在光学显微镜和荧光显微镜下观察其形态学改变，应用数字图像分析系统测定骨组织形态参数。

1.4.5 生物力学测量[5] 16周末大鼠按期处死后剥离股骨，取术侧股骨，剔除软组织，拔除加锁髓内针，湿生理盐水纱布包裹-20℃冰箱保存备用。采用Electro Force 3200生物材料实验仪分别行术侧股骨三点弯曲实验，支点跨距为20 mm，中央垂直（股骨与载荷成90°角）施加载荷，速率5 mm/min，测量和运算出各样本的最大载荷、最大挠度和最大应力。

1.5 统计学方法

应用SSPS 12.0统计学软件进行数据分析，计量资料数据用均数±标准差（x±s）表示，两组间比较采用t检验；以P < 0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 实验大鼠骨密度的变化

骨折术前模型组与基础组大鼠骨密度比较：实验第8周末骨折术前，模型组大鼠BMD值为（0.219±0.013）g/cm2，基础组BMD值为（0.283±0.015）g/cm2，模型组骨密度值显著低于基础组，差异有统计学意义（t = 12.8970，P < 0.05），说明GIOP模型建立成功。

实验16周末各组大鼠股骨骨密度比较：治疗组股骨BMD高于模型组，模型组BMD低于基础组，差异均有统计学意义（均P < 0.05）。见表1。

表1 实验16周末各组大鼠股骨骨密度比较（g/cm2，x±s）

注：t1为基础组与模型组比较；t2为治疗组与模型组比较

2.2 放射学检查结果

实验16周末，三组大鼠骨折部位愈合良好，骨折对位对线好，治疗组、基础组骨折部位的骨痂皮质厚于模型组，治疗组与基础组骨痂厚度无明显差异。见图1。

①基础组；②模型组；③治疗组

图1 实验16周末三组大鼠骨折部位CR片

2.3 骨组织形态计量学结果比较

骨折术后8周，模型组大鼠股骨骨小梁面积百分数（TbAr%）、骨小梁数量（TbN）、平均骨小梁厚度（TbTh）均较基础组下降，骨小梁分离度（TbSp）较基础组增高，差异有统计学意义（P < 0.05）；治疗组TbAr%、TbN、TbTh均高于模型组，TbSp低于模型组，差异有统计学意义（P < 0.05）。见表2。

表2 各组大鼠股骨骨形态计量学测量结果比较（x±s）

注：t1为基础组与模型组比较；t2为治疗组与模型组比较

2.4 大鼠股骨生物力学测量比较

骨折术后 8 周对三组大鼠术侧股骨进行生物力学比较，模型组和治疗组的最大载荷、最大挠度及最大应力均低于基础组，但治疗组结果显著高于模型组，模型组与基础组、治疗组与模型组间比较差异有统计学意义（P < 0.05）。见表3。

3 讨论

骨质疏松症是公认的社会公共卫生健康问题，其发病率位居世界各种常见病的第6位[6]。继发性骨质疏松症是由于疾病或药物等原因所致的骨量减少、骨微结构破坏、骨脆性增加和易于骨折的代谢性疾病[7]。引起继发性骨质疏松症的病因很多，由于GC在临床上的广泛使用，GIOP的发病率亦逐年提高，并成为最常见的继发性代谢性骨病[8]。骨折是骨质疏松的主要并发症，骨折的发生率在服用糖皮质激素的最初3～6个月即明显增加[9]。骨质疏松性骨折以椎骨、腕部及髋部多见，其中以髋部骨折的发生率最高。英国的调查资料显示，75岁以上女性每年有1%发生髋部骨折，髋部骨折占骨折病患的15%～25%[10]。骨质疏松症患者骨强度低，抗骨折能力差，骨折发生率高，愈合慢，易发生内固定松动和再骨折，致残率较高。

骨密度是反映骨量的主要指标，与骨折危险度密切相关。本实验对大鼠肌注地塞米松8周后，模型组大鼠骨密度显著降低，说明大鼠骨质疏松模型复制成功。实验16周末，治疗组股骨全长骨和骨痂BMD均高于模型组，说明复骨方治疗可有效提高模型大鼠的BMD，促进骨折的愈合。

骨的力学强度和骨痂内骨结构是反映骨折愈合的重要指标，骨骼生物力学性能降低是骨折发生的主要原因之一[11]。骨组织形态计量学是应用数学和几何学的方法，研究骨骼组织的结构和骨量等形态学静态特性的测量技术[12]。三点弯曲试验是生物力学中常用的方法。最大载荷反映了骨的刚度，最大应力反映骨质的内在硬度[13]。本实验生物力学检测以及骨形态计量学观察结果显示：骨折术后8周，治疗组大鼠股骨TbAr%、TbN、TbTh均较模型组提高，TbSp较模型组下降，而模型组TbAr%、TbN、TbTh数据较基础组降低，TbSp较基础组升高；治疗组最大载荷、最大挠度及最大应力结果显著高于模型组。实验结果提示，GC可使模型大鼠骨小梁数量、厚度减少，骨量减少，骨小梁分离度增加，骨强度降低，大鼠股骨生物力学性能下降，因而GIOP大鼠骨折风险增大。经中药复骨方治疗后，治疗组大鼠的骨形态参数有所改善，骨量增加，骨小梁分离度降低，连接性加强，骨微结构得到加强改善，实验大鼠的力学性能显著提高，因此，中药复骨方可促进模型大鼠骨折愈合。

我国传统医药治疗骨质疏松、骨折历史悠久，清代陈士铎在《百病辨证录》中对骨折的治疗提出了“血不活则瘀不去，瘀不去则新不能生，新不能生则骨不能合”。因此，中药多应用补肾和活血化瘀类药物治疗骨折。中药复骨方由骨碎补、杜仲、续断、千年健、红花、归尾、川芎等组成，方中骨碎补能提高血钙、血磷水平，激活成骨细胞，能明显增加骨小梁宽度和密度， 减少骨小梁间隙[14]。杜仲能在骨折早期降低血钙，升高血磷，促进骨痂生长和骨折愈合[15]。研究发现，续断能有效促进大鼠成骨细胞分化、增殖，防止成骨细胞凋亡[16]，促进骨髓间充质干细胞增殖和向成骨细胞分化[17]，并且在一定的浓度范围内可以促进人成骨细胞的分化和增殖[18]。千年健能够增加成骨细胞和骨髓基质细胞（MSC）护骨素（OPG）蛋白及其mRNA表达，抑制细胞核因子-κB受体活化因子配基（RANKL）蛋白及其mRNA的表达，使骨形成大于骨吸收[19]。复骨方组方合理，以骨碎补、杜仲、续断和千年健强肾壮骨，同时配伍归尾、川芎和红花行气活血，化瘀止痛。

本实验结果证实，中药复骨方能够提高GIOP骨折大鼠的BMD，增加骨小梁数量，使骨小梁增粗，骨小梁间隙变窄，改善骨的显微结构，增强骨强度，提升骨生物力学性能。因此，中药复骨方对模型大鼠骨折的愈合有促进作用。

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松鼠的资料篇4

【关键词】 骨质疏松症； 中医药疗法； 骨钙； 骨密度； 实验研究； 大鼠

补肾活血方为新泰孟氏医院孟照明教授的经验方，为纯中药制剂，其主要功能为调整骨代谢，治疗骨质疏松。处方成分主要由熟地、杜仲、山药、巴戟天、肉苁蓉、牛膝、枸杞、桃仁、红花、赤芍、川芎、当归、血竭等20味药物组成。骨质疏松症是目前随着人口老龄化而增长并且逐渐危及到人们健康的一种疾病。为此，通过建立动物实验模型，对去卵巢大鼠不同时期骨质疏松相关指标进行检测，以期探讨补肾活血方对骨质疏松症的治疗预防作用。

1 材料与方法

1.1 受试物 补肾活血方，由新泰孟氏骨科研究所提供。性状：中药汤剂，供实验用。人体推荐摄入量：1剂/d，煎至300 ml，分早晚2次服用。

l.2 实验动物 SPF级健康成年10 周龄SD大鼠，雌性，30只，体重250～300 g。由山东大学医学部实验动物中心提供，实验动物生产许可证：SCXK2006-0008。动物使用许可证：SYXK20uo-0025，饲养环境为SPF级，实验环境温度23～24 ℃，湿度54%～58%。

1.3 动物饲料 参照AIN93饲料配方配制半成品饲料，用适当的物质替换饲料中来源于大豆的成分，以避免大豆异黄酮等植物雌激素对实验结果的干扰（主要成分为23%酪蛋白，32%玉米淀粉，30%蔗糖，5%纤维，5%玉米油，3.5%混合矿物盐1，1%混合维生素2，0.3%DL-蛋氨酸，0.2%酒石酸胆碱）。由中国医学科学院实验动物研究所提供，饲料生产许可证号：SCXK（京）2006-0003。饲料中钙含量为153 mg/100 g。

1.4 主要仪器设备 双能X线吸收骨密度仪（DEXA，美国NORLAND公司生产的XR.36型）；原子吸收分光光度计（PE股份有限公司生产，PE-2eemam-5100型）。

1.5 试验方法 按照卫生部《药品检验与评价技术规范》（2003年版）“增加骨密度功能检验方法”进行。

1.5.1 手术处理及动物分组 SD大鼠经适应性饲养1周后，按体重随机分为去卵巢组和假手术对照组。大鼠经腹腔注射40 mg/（kg·bw）戊巴比妥钠溶液（1%）麻醉，固定，经背部肋脊角切口行卵巢切除术；假手术组切除卵巢周围部分脂肪，然后对切口分层缝合。术后10 d，按体重将去卵巢动物随机分为去卵巢对照组、补肾活血方组，计入假手术对照组共3组，每组10只。

1.5.2 剂量选择及受试物给予方式 补肾活血方5.00 ml/（kg·bw），作为补肾活血方组。实验期间各组动物喂饲基础饲料，自由摄食和饮用去离子水。试验组分别灌胃给以补肾活血方受试物，去卵巢对照组和假手术对照组灌胃给以去离子水。灌胃量为10 ml/（kg·bw），每日灌胃1次，共13周。

1.6 观察指标 体重：每周称量1次。骨恒重和骨钙测定：动物饲养13周后，处死，剥离左、右侧股骨，剔除干净骨周围附着软组织。取大鼠右侧股骨在105 ℃烘箱中烘干至恒重后（间隔1 h称量差值不超过0.0003 g），称量骨干重。原子吸收法测定右侧股骨钙含量。骨密度测定：测量左侧股骨全长，以双能X线吸收骨密度仪（DEXA）测定股骨中点、远心端和近心端骨密度。

1.7 统计学处理 采用SPSS13.0软件进行统计分析，计量资料以（x±s）表示，采用单因素方差分析和双因素重复测量数据方差分析，组间比较采用LSD-t法。P

2 结果

2.1 受试物对大鼠体重的影响 去卵巢动物体重均明显高于假手术对照组（P0.05）；实验结束时（第13周末）补肾活血方实验组大鼠体重均明显低于去卵巢对照组（P

2.2 受试物对大鼠股骨恒重和骨钙含量的影响 补肾活血方实验组大鼠右侧股骨恒重明显高于去卵巢对照组和假手术对照组（P

2.3 受试物对大鼠骨密度的影响 去卵巢对照组大鼠左侧股骨中点、远心端和近心端骨密度均明显低于假手术对照组（P

经口连续13周每天给以去卵巢模型大鼠补肾活血方5.00 ml/（kg·bw），结果表明，补肾活血方实验组大鼠股骨中点、股骨远心端、股骨近心端骨密度均明显高于去卵巢对照组（P

3 讨论

建立去卵巢大鼠骨质疏松模型研究骨质疏松症已得到公认，并已经被广泛采用[1]。雌性大鼠在卵巢切除后松质骨骨量减少，骨的强度下降，某些部位骨丢失现象加快，这种特征与人正常绝经后高转换型骨质疏松发生的骨丢失现象相类似[2]。本实验研究中，去卵巢大鼠体重均明显高于假手术对照组，补肾活血方试验组大鼠右侧股骨恒重明显高于去卵巢对照组和假手术对照组，补肾活血方试验组和假手术对照组大鼠股骨钙含量明显高于去卵巢对照组，去卵巢对照组大鼠左侧股骨中点、远心端和近心端骨密度均明显低于假手术对照组，表明本实验大鼠骨密度低下模型成功。成年大鼠骨重建周期为30～40 d，为了得到更加明显的实验结果，本研究将补肾活血方的治疗时间定为13周。在本实验中补肾活血方组大鼠体重均与模型组差异无统计学意义，提示补肾活血方可能不具有雌激素的抗体重增加作用，但其理论依据还需进一步探讨。本研究结果表明，大鼠给予补肾活血方后，骨恒重和骨钙含量明显增高，股骨中点、远心端、股骨近心端骨密度均高于去卵巢对照组，说明补肾活血方可促进骨形成，使骨形成大于骨吸收，以治疗骨质疏松的发生。反映了中药补肾活血方可以提高成骨细胞活性，使骨生长增强，有效治疗去卵巢大鼠的骨质疏松症。

骨质疏松是以骨量减少和骨组织细微结构退化（松质骨骨小梁变细、断裂数量减少，皮质骨多孔、变薄）为特征的，导致骨的脆性增加以及骨折危险增加的一种全身骨骼疾病。骨质疏松最终会导致骨折，特别是椎体、髋部股骨颈、转子间、桡骨远端与肱骨近端[3]。中医以为骨质疏松症属于“骨痿”和“骨痹”的范畴，《内经》云：“肾者主蛰，封藏之本，精之处也”。《医经精义》亦云：“肾藏精，精生髓，髓生骨，故骨者肾之所合也；髓者精之所升也，精足则髓足。髓在骨内，髓足则骨强”。根据“肾藏精，主骨生髓”的理论，对骨质疏松的治疗主要以补肾中药为主，而在补肾药中又以补益药中的补阳药物为最多。多数学者以“肾主骨”理论为指导[4]，对中医药防治骨质疏松症进行了大量的临床与实验研究，取得了较好的效果，也进一步加深了中医对本病的认识：本病病因病机的关键在于各种原因所致的肾虚，属本虚标实，病位在肾，与肝、脾有关。本虚以肾（气、阴、阳）为主，涉及肝阴、脾气及气血不足；标实多为瘀血[5]。补肾活血方以熟地、杜仲为君药。熟地性甘，微温；归肝、肾经；具有养血滋阴，补精益髓之功效。杜仲，性甘、温，归肝、肾经；具有补肝肾，强筋骨之功效。以巴戟天、肉苁蓉、牛膝、骨碎补、川芎、当归、桃仁、红花为臣药，山药、枸杞、赤芍、血竭、三七、续断、茯苓、黄芪、木香、陈皮为佐使药。共奏补肾活血，强筋壮骨，益气健脾，活血通络之功。

现代药理学研究表明，补肾药物中含有类雌二醇样物质[6]，可能显著提高雌性大鼠体内的雌激素水平。同时，续断，杜仲等补肾中药中含有黄酮类物质，与己烯雌酚有相类似的结构，从而具有雌性激素样作用[7]，可以促进成骨细胞分化和增殖[8]。补肾活血方对于骨质疏松症有明显的预防及显著的治疗作用，同时，避免了单纯的抗骨吸收药物在降低骨转换率的同时也部分抑制了成骨细胞活性的缺点，为中医药治疗骨质疏松症开辟了一条新思路，开发前景广阔。

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松鼠的资料篇5

Expression of epidermal growth factor receptor and its ligands in chronic asthma mice and the influence of dexamethasone

【Abstract】 AIM: To investigate the effect of epidermal growth factor receptor (EGFR) system on the asthmatic airway remodeling.METHODS: The chronic asthma mice model was established by ovalbumin (OVA) immunization. Mice were injected intraperitoneally with dexamethasone of 2 mg/kg 1 h before the sensitization and sacrificed by cervical dislocation 24 h after the last challenge. Conventional pathological slides were also observed to study the pulmonary inflammation and the thickness of airway wall and airway smooth muscles. The concentration of TGFα in bronchoalveolar lavage fluid (BALF) was detected by ELISA. RTPCR was conducted to detect the mRNA expression of EGFR in the lungs. Pulmonary EGFR protein was observed by immunohistochemical staining and Western blot analysis. RESULTS: In chronic asthma mice， inflammatory cell infiltration around bronchi and vessels could been seen on slides. The airway wall and the airway smooth muscles thickened and TGFα in BALF increased. The expression of EGFR mRNA and protein in the lungs increased (P

【Keywords】 asthma; airway remodeling; receptor， epidermal growth factor; transforming growth factor alpha; dexamethasone

【摘要】 目的： 探讨表皮生长因子受体（EGFR）在慢性哮喘气道重建中的作用. 方法： 建立小鼠慢性哮喘模型，致敏前1 h气道内滴入地塞米松2 mg/kg，最后一次激发24 h后处死动物，常规病理切片观察小鼠肺内炎症情况、气管壁厚度及气道平滑肌厚度，ELISA法测定肺泡灌洗液中TGFα的浓度，RTPCR观察小鼠肺部EGFR mRNA的表达，免疫组化及Western Blot观察EGFR蛋白的表达. 结果： 慢性哮喘组小鼠气道支气管及血管周围大量炎症细胞聚集、气管壁及气道平滑肌增厚、肺泡灌洗液中TGFα浓度增高，肺组织EGFR mRNA及EGFR蛋白的表达增高(P

【关键词】 哮喘；气道重建；受体，表皮生长因子；转化生长因子α；地塞米松

0引言

气道重建是哮喘的特征性病理改变，成为顽固性哮喘的病理基础，直接影响治疗效果，是目前哮喘研究的热点问题之一. 我们建立了小鼠慢性哮喘模型，观察了慢性哮喘小鼠气道重建情况、表皮生长因子受体（epidermal gronth factor receptor， EGFR）和其配体表达的变化及地塞米松对其的影响，旨在探究EGFR系统在慢性哮喘气道重建中的作用.

1材料和方法

1．1材料

6周龄雌性BALB/C小鼠40只，体质量20~25 g，由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供；UV1000紫外分光光度计（英国Cambridge公司）；DYA型电泳仪（上海生化所申华生化技术开发公司）；PCR扩增仪（GeneAmpPCRsystem 9600 PERKIN ELIMER）； FLUORSTM Multimager多功能图像分析仪（BioRAD）；Leica Q500 MC图像分析系统（德国）；卵白蛋白干粉（GradeⅤ）（美国Sigma公司）；氢氧化铝（上海生物制品有限公司）；地塞米松磷酸钠注射液（天津市氨基酸公司人民制药厂）；小鼠TGFα ELISA试剂盒（上海生物晶美公司）；Trizol（Gibcol BRL公司）；One Step RNA PCR Kit （TaKaRa公司）；EGFR mAb（Cell Signaling Technology）；磷酸化EGFR mAb（Cell Signaling Technology）.

1．2方法

1．2．1动物模型及分组健康BALB/C小鼠40只，随机等分为4组，每组10只，A组为正常对照组，B组为慢性哮喘组，C组为地塞米松处理组，D组为生理盐水处理组. 置于相对清洁恒温环境. 予以标准饲料，自由取水. 参照文献［1］制备动物模型，将OVA 20 μg加2.6 mg氢氧化铝溶于pH为7.4的PBS 0.2 mL中，于第0， 7， 14日给B组、C组、D组小鼠腹腔注射，A组小鼠腹腔注射0.2 mL PBS；于第20~29， 47， 61， 73~75日鼻腔内滴入OVA抗原液50 μL（含OVA 100 μg），A组小鼠鼻腔内滴入PBS 50 μL；C组小鼠每次滴入OVA前1 h腹腔注射地塞米松0.2 mL（50 μg），D组小鼠每次滴入OVA前1 h腹腔注射PBS 0.2 mL. 小鼠出现烦躁不安、呼吸急促、腹肌痉挛为阳性反应. 最后一次激发24 h后颈椎脱臼处死动物.

1．2．2BALF中TGFα的检测按照ELISA检测试剂盒操作流程检测各组小鼠BALF中TGFα含量.

1．2．3肺组织EGFR mRNA的测定根据One Step RNA PCR Kit试剂盒说明书，用半定量RTPCR法测定各组小鼠肺组织EGFR mRNA. EGFR引物序列(扩增片段长499 bp)： 上游引物5′AGAAGATGGCATCCGCAAGT3′；下游引物5′ATTGGG TGTCCCGAAGAGTT3′. GAPDH引物序列(扩增片段长306 bp)： 上游引物5′ cctgcatccactggtgctgc3′；下游引物5′ CTTGACAAAGTTGTCATTGA3′.

1．2．4Western blot印迹测定测定肺组织EGFR蛋白及磷酸化EGFR蛋白表达.

1．2．5肺组织病理变化处死动物后，取肺组织置于60 g/L固定24 h，常规制备病理切片，HE染色后观察肺组织病理变化. 结果为细胞核呈蓝黑色，胞质呈淡红色. 参照文献［2］关于气道各层的定义，采用德国Leica Q500 MC图像分析系统，测定不含软骨的完整气管横断面，分别以WAt/ Pbm， WAi/ Pbm， WAm/ Pbm表示气管总管壁厚度、内壁厚度及气道平滑肌厚度.

1．2.6小鼠肺组织EGFR免疫组织化学染色采用LSAB法. 处死小鼠后，取每只小鼠肺门支气管组织行免疫组织化学染色，随机计数50个支气管平滑肌细胞（每组共计数500个），结果判定：-为无棕色颗粒沉淀或棕色颗粒少量、稀疏；＋为细胞膜区域出现淡黄色颗粒沉淀；为细胞膜区域出现黄色颗粒沉淀；为细胞膜区域出现棕色颗粒沉淀.

统计学处理： 计量资料以x±s表示，采用SPSS10.0统计软件，表1资料组间比较采用Kruskal Wallis检验，组间比较采用方差分析，免疫组化结果排成列联表，进行χ2检验.

2结果

2．1慢性哮喘小鼠肺组织病理变化及地塞米松的干预哮喘小鼠可见上皮细胞破坏，支气管、血管周围大量炎细胞浸润，以嗜酸粒细胞、淋巴细胞为主，地塞米松处理组炎症减轻，生理盐水处理组无变化. 图像分析显示，哮喘组小鼠气道壁、内壁、气道平滑肌层均增厚；地塞米松处理组小鼠气道壁总厚度、内壁、气道平滑肌层厚度明显薄于慢性哮喘组小鼠（P

2．2慢性哮喘小鼠肺组织EGFR mRNA， EGFR蛋白、磷酸化EGFR蛋白的表达及地塞米松对其的影响慢性哮喘小鼠肺组织EGFR mRNA， EGFR蛋白、磷酸化EGFR蛋白的表达量较正常对照组明显增加（P

2.3各组小鼠肺组织免疫组化正常对照组小鼠气道黏膜上皮细胞、气道平滑肌细胞及血管平滑肌细胞可见较弱的磷酸化EGFR表达. 慢性哮喘组磷酸化EGFR阳性细胞数明显增加，主要表达于气道黏膜上皮细胞、气道平滑肌细胞及血管平滑肌细胞. 地塞米松处理组阳性表达的细胞数明显低于慢性哮喘组（P

2．4慢性哮喘小鼠BALF中TGFα含量变化及地塞米松的干预慢性哮喘小鼠BALF中TGFα含量（0.764±0.065） ng/L明显高于正常对照组（0.259±0.032） ng/L （P

3讨论

支气管哮喘是全球范围内严重威胁公众健康的慢性疾病. 通过大量病理学的研究证明，慢性气道炎症和气道重建是哮喘的两个主要病理学特征［3］ ，其中气道重建倍受学者关注. 气道重建包括支气管上皮脱落、杯状细胞肥大、基底膜增厚及黏膜下组织和平滑肌增生、肥大，与临床症状、肺功能、气道高反应性密切相关［4］，因此研究哮喘气道重建及其防治措施具有重要意义.

气道重建的发生机制尚未完全明确，许多研究［5］均表明炎症细胞、炎症因子及可溶性生长因子等在其中发挥重要作用，但引起气道重建的各种细胞因子、炎症介质、生长因子以及信号的传递通路尚未完全明确，在进一步的研究过程中. 表皮生长因子（epidermal growht factor， EGF）和EGFR在气道重建和修复中也起重要作用［6］. EGFR是第一个被发现并克隆的受体酪氨酸激酶（receptor tyrosine kinase， RTK），是细胞生长、分化和存活的重要调节因子. 近年来对EGFR的研究取得了一些重要进展，其所介导的信号传导效应具有多向性，包括增殖、迁移、细胞分化和内环境的稳定等，并与细胞的再生和恶性肿瘤的发生、发展密切相关. EGFR包括膜外区、跨膜区、膜内区3个部分. 当配体与受体的胞外区结合后，受体胞内部分的酪氨酸残基磷酸化，形成酪氨酸底物结合位点，使EGFR激活，再通过识别一系列底物酶将外界信号传导至细胞内，介导DNA合成及细胞增殖效应［7-10］.

我们通过对小鼠哮喘模型各组的研究，证实了卵蛋白的长期吸入可诱发气道重建，包括气管壁和气道平滑肌层的增厚，肺组织EGFR mRNA， EGFR蛋白和磷酸化EGFR蛋白及气道平滑肌磷酸化EGFR表达增强，BALF中EGFR配体TGFα浓度增高. 因此推测与细胞分化、增殖密切相关的EGFR系统可能与气道重建有一定关系. 哮喘时气道分泌炎症介质、细胞因子、生长因子及慢性炎症导致气道损伤，引起EGFR系统活化，参与气道修复，而过多的修复引起气道壁和气道平滑肌层增厚.

此外，本研究还发现，激发前使用地塞米松可以有效地预防气道重建. 糖皮质激素是目前首选的控制气道炎症及防止气道重建的药物. 许多研究表明应用皮质激素可有效地改善肺功能和气道阻塞. 但是，目前对皮质激素在气道重建中的作用机制了解较少. 研究发现地塞米松、氢化可的松、甲基强的松龙可抑制体外培养的气道平滑肌细胞增殖，地塞米松还可抑制凝血酶，胎牛血清，EGF， bFGF对气道平滑肌的促有丝分裂［11-14］. 本研究发现地塞米松对肺组织EGFR mRNA， EGFR蛋白表达无影响，但可降低BALF中TGFα浓度，减少肺组织及气道平滑肌磷酸化EGFR蛋白表达. 推测地塞米松预防气道重建可能存在的机制： ① 通过抑制炎症反应，有效地预防气道重建. ② 通过抑制炎症介质、细胞因子及生长因子（如TGFα）的分泌，抑制EGFR系统活化，预防气道重建.

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松鼠的资料篇6

【关键词】哮喘；布地奈德混悬液；IL-13

文章编号：1004-7484（2013）-11-6828-01

支气管哮喘的基本特点为慢性炎症和气道高反应性[1]。哮喘反复发作时存在的急慢性炎症过程可引起气道不可逆结构性改变，当气道上皮下基底膜网状结构增厚和纤维化及平滑肌层增厚、血管增生扩张等改变时，称为气道重塑（airway remodeling）[2]。这就是临床上慢性持续性哮喘气流阻塞存在不可逆性成分的重要、原因。近几年，随着免疫学和分子生物学的进展，对哮喘的发病机制的研究有细胞水平进入了分子水平，细胞因子，粘附因子等炎症介质在近些年成为了研究的热点，说明上述因子在哮喘发病机制中具有重要的作用。目前的研究认为[3]IL-13可能参与了哮喘气道重塑的过程。目前糖皮质激素是治疗哮喘的首选药物，而吸入糖皮质激素可作用于炎症的多个环节，调控靶细胞的基因转录，抑制多种炎症因子的生成及炎症细胞的活化，提高β2受体的敏感性，进而防止气道重塑。有鉴于此，本研究通过向哮喘豚鼠模型雾化吸入布地奈德混悬液，以气道上皮组织中IL-13的表达作为观察指标，探讨吸入布地奈德混悬液在哮喘治疗中的作用机制及局部与全身用药的差异。1资料与方法

健康雄性豚鼠40只（由南华大学动物实验部提供，清洁级），12周龄左右，体重（400±50）g。豚鼠40只按随机数字分成对照组（A组）、哮喘组（B组）、吸入布地奈德组（C组）和地塞米松组（D组），每组10只。复制哮喘模型哮喘组首日和第15日两次致敏，10%卵清白蛋白1ml，腹腔注射，第二次致敏后一周开始超声雾化吸入3%的卵清白蛋白激发哮喘，依症状雾化吸入30s至3min，直到出现哮喘症状：呼吸增快，点头呼吸，躁动，隔日诱喘一次，共18次。地塞米松治疗组和吸入布地奈德治疗组致敏方法及诱喘方法同哮喘组，第21日起每次诱喘前30min雾化吸入布地奈德1mg和腹腔内注射地塞米松1.5mg/kg。对照组以生理盐水替代卵清白蛋白同步实验。动物处理：哮喘豚鼠于末次雾化吸入24h后，以1000u/ml肝素钠腹腔注射抗凝，水合氯醛（0.8g/kg）腹腔注射麻醉，无菌开胸穿刺心脏取血处死豚鼠，收集标本。通过气管插管导管（由中心静脉导管改成）灌注10%中性甲醛使肺叶充分膨胀，取一叶支气管肺组织做图像分析，其余肺组织置于10%中性甲醛中固定24h以上，常规石蜡包埋，切片行HE染色、免疫组化。IL-13抗体染色采用链霉亲和素-生物素-酶（SABC）免疫组化染色法。胞膜或胞浆内有棕黄色颗粒且着色明显高于背景者为阳性。免疫组化结果在400倍视野下，每张玻片随机取10个视野，用BLTS2080病理图象采集系统和Image Pro Plus 5.02专业图像分析软件，分别测定阳性颗粒的平均光密度值，进行分析处理。所有统计分析使用SPSS13.0软件进行分析，计量资料用资料用均数±标准差表示，组间均数差异的比较采用t检验，计数资料采用χ2检验，以p

哮喘组切片可见气道黏膜、黏膜下层、肺泡区有大量呈棕黄色的阳性细胞，对照组切片可见气道黏膜、黏膜下层、肺泡区有少量呈棕黄色的阳性细胞，平均光密度值分析比较，哮喘组IL-13的平均光密度值均明显高于对照组，示哮喘组IL-13阳性表达明显强于对照组，而布地奈德治疗组及地塞米松治疗组IL-13的表达相对于哮喘组均有不同程度的减轻，差异均有统计学意义，而布地奈德治疗组及地塞米松治疗组组内比较差异无统计学意义，见表1。

3讨论

支气管哮喘是由多种细胞特别是肥大细胞、嗜酸性粒细胞和T淋巴细胞参与的气道慢性炎症。其发生是由遗传因素和环境因素共同作用的结果，免疫反应的异常在发病机制中起重要作用。目前大量的研究表明至少有10余种细胞、20余种细胞因子和50多种生物活性物质参与了哮喘的发生[4]。

IL-13是一个重要的介导变态反应的Th2型细胞因子，它的过度增加可诱发变态反应，如出现气道高反应性、嗜酸性粒细胞炎症、Ig-E增高等，还与多种粘附分子及趋化因子表达增多、支气管杯状细胞分泌黏液增多和气道纤维化有关。在趋化因子的作用下，血管内的炎症细胞与血管壁的粘附分子结合并跨越血管壁、定向移行从而向气道聚集。IL-13还可抑制Eos的凋亡，延长其存活时间[5]从而使气道炎症的持续时间延长。IL-13能够刺激人肺纤维细胞产生纤维素，并呈时间质量浓度依赖关系，参与呼吸道重塑过程。

布地奈德是一种非卤化糖皮质激素，有较高的糖皮质激素受体结合力，具有很强的抗炎作用，可减轻炎症渗出，减轻水肿和毛细血管扩张，抑制炎症细胞向炎症部位移动，阻止过敏递质的释放并降低各种过敏递质的活性，同时可抑制组织中细胞生长因子和趋化因子的合成和释放，并可通过对血液循环中T淋巴细胞和嗜酸性粒细胞的再分配作用，促使其由血液进入机体其他部位，使其在血循环中的数量减少；并可促使中性粒细胞、巨噬细胞向炎症部位的聚集减少。

本研究结果显示，哮喘豚鼠应用糖皮质激素（包括布地奈德混悬液及地塞米松），肺部炎症反应明显减轻，镜下显示与哮喘组及对照组有明显的区别。哮喘组豚鼠气道内的IL-13水平明显高于正常对照组，二者之间存在统计学差异（P

综上所述，哮喘的气道重塑过程中，IL-13具有重要的调控作用，其在很大程度上促使或诱发气道重塑的发生。吸入用布地奈德混悬液可能通过抑制IL-13在哮喘豚鼠肺组织中的表达，从而达到抑制气道重塑的作用，减轻哮喘症状，避免或延缓肺功能的进一步损害。同时，吸入用布地奈德混悬液作为局部作用的激素，与全身用糖皮质激素的作用比较差异无统计学意义，二者均能降低气道内IL-13的水平。参考文献

[1]钟南山.支气管哮喘-基础与临床.人民卫生出版社，2006：438.

[2]刘鑫，戴爱国.柴朴汤对哮喘豚鼠嗜酸粒细胞凋亡及气道重塑的影响.四川中医，2005，23（6）：11-12.

[3]Wen FQ，Kohyama T，Skold CM，et al.Glucocorticoids molecular TGF-beta production by human fetal lung fibroblast[J].Inflammation，2003，27（1）：9-19.

[4]徐玮，董伟.支气管哮喘与免疫.标记免疫与临床，2004，11：113-115.

松鼠的资料篇7

一磨：

师：松果那么香，那么可口，松鼠吃着吃着，忽然遇到了一个问题。请小朋友划出小松鼠想的句子读一读。

生读第2、3自然段。（课件出示）

师：没有了松果，它们会吃什么？到哪里去住呢？

学生很有个性地回答。

生甲：它们可以吃花生。

学生稍作停顿，还补充说，我喂过的，松鼠爱吃花生。

师：森林里有花生吗？

生甲：可以种的。

师：谁种呢？

生甲：农民伯伯呀。

师：那农民伯伯吃什么？

生甲无言。

接着我又问：没有了松果，它们会吃什么？

学生再创造性地回答。

生乙：它们可以，吃苹果。

我有点不高兴，说：苹果，松鼠爱吃吗？

生乙嘟起小嘴嘀咕：爱吃。

我再问：没有了松果，它们会吃什么？

生再创奇迹：吃鸟蛋。

课堂内学生哄堂大笑。

我尴尬地笑着说：小松鼠可不爱吃。

法国著名的儿童心理学家卢梭说过，儿童有他特有的看法，想法和感情。如果用我们的看法，想法和感情去代替他们的，那简直是愚蠢的。学生作为一个个性鲜明的个体，他们的阅读个性是客观存在的。当我提问“没有了松果，它们会吃什么？”时，此时学生学习情绪高涨，思维活跃，真可谓：一石击起千层浪。低年级学生对新奇的事物有很大的好奇心，也很喜欢小动物，预设中我没有想到，孩子们会说，松鼠可以吃花生，可以吃苹果，可以吃鸟蛋……可那毕竟是一年级的学生啊，学生的回答并未错误，。然而我也未进行及时积极的引导，只是一味地重复提问，希望孩子的回答能回到我的预设中来。可惜三次提问后，我并未如愿以偿。

二磨：

师：没有了松果，它们会吃什么？到哪里去住呢？

生甲：它们可以吃桃子。

生乙：它们可以吃苹果。

生丙：它们可以吃核桃。

……

师：你们的想像真丰富，小松鼠爱吃吗？他们会怎么办呢？

生：松鼠不吃苹果、桃子等水果，再说那是果农种出来的不让他们吃。

生丙：松鼠可以住在石头缝里，吃草，吃山核桃。

生丁：松鼠住在石头缝里会不舒服的，它不吃草，山核是人工栽培，不让他吃的。

生：它们可以到别的松林里去住，吃其它树林里的松果。

生：别的松林里的松果也会被松鼠吃完的。

第二次我提问“没有了松果，它们会吃什么？”时，我尊重孩子的个性，尊重孩子的情感体验。孩子们说，松鼠可以吃桃子，可以吃苹果，可以吃核桃，我没有否认学生的想法，相反，他们的回答，我都给予了肯定和激励。但遗憾的是没有引导孩子到正确的价值上来。课文重点并非引导孩子讨论松鼠爱吃什么？重要的是让孩子懂得在向大自然索取的同时，一定不要忘记回报大自然。只有这样，我们才能永远拥有一个美好的家园。

三磨：

师：没有了松果，它们会吃什么？到哪里去住呢？

生甲：它们可以吃花生。

师引读：没有了花生。生接读：小松鼠、小小松鼠、小小小松鼠……它们吃什么呢？

生乙：它们可以吃苹果。

师引读：没有了苹果。生接读：小松鼠、小小松鼠、小小小松鼠……它们吃什么呢？

生丙：它们可以吃核桃。

师引读：没有了核桃。生接读：小松鼠、小小松鼠、小小小松鼠……它们吃什么呢？

师：是呀，松果会吃完，花生会吃完，苹果也会吃完 ，你们说，它们该怎么办呢？

从而过渡种松果，种花生，种苹果，种核桃……

第三次我提问“没有了松果，它们会吃什么？”时，我并没有否认学生的看法。简单的引读既避免了师生间无聊罗嗦对答，又巧妙引导学生在一次次的朗读，一次次的自问中懂得在向大自然索取松果的同时，一定不要忘记回报大自然种松果。朗读中孩子们自己责问自己，次次责问自然流露出了对于维护生态环境的重要性，从而明白要从小事做起，保护身边的环境。

松鼠的资料篇8

大学生网上尝甜头发现另类宠物市场

2002年，正上学的于晓松开始在网上卖些自己淘汰的以及低价收购的二手货。每月下来，伙食费基本不用家里寄。有一次，于晓松去市场买东西时，发现很多人围在一堆儿不知在看什么。他凑上去一看，哇，竟然有人在卖仓鼠！于晓松从小就喜欢动物，看到蜥蜴很想买一只回去玩。可卖主开价太高，手头吃紧的于晓松只得放弃了。

回到寝室后，他便上网查找有没有仓鼠卖。结果令他大吃一惊：一模一样的仓鼠，北京一家爬虫店的价格低一半！于晓松兴奋地想，要是从北京进货拿回大连卖，能有一半的利润呀！为了了解仓鼠在大连市场上的价格，他第二天跑遍大连各个市场，竟然都比北京的仓鼠价格最少贵1倍，而且卖仓鼠的地方并不多。他终于肯定了自己的想法。

于晓松马上进了几只仓鼠回来，刚拿到宿舍，几个同学都围上来玩。有几个家境好的同学都掏钱买，说：“在校园里不准养猫狗，拿这个当宠物养着玩也不错嘛。”

同学的话让于晓松灵机一动，是可以把仓鼠当作宠物卖呀，国内卖这类宠物还真是少！因为精力不多，他最初只是有人要他就进货。出乎他意料，他的另类宠物竟然在学校这群年轻人里掀起了一股潮流，越来越多的同学闻讯过来订购，甚至学校外有一些年轻人也找他购买！这让他越发觉得另类宠物大有市场。

2004年7月，于晓松从东北财经大学毕业。他选择了跟其他同学不一样的道路：创业。

从仓鼠开始卖另类宠物

于晓松进了大批仓鼠回来，开了一家另类宠物店。以前是按需购进，不需要养多久。可现在一大批仓鼠买回来，他不会养，没过多久就损失了1000多元。受了打击的于晓松没有退缩，他上网查资料、翻阅管理和饲养仓鼠的书，再加上积极向进货商咨询，他终于积累了一些经验。他的仓鼠再没受损失。进货地点也从北京扩大到广州、上海等地，进货价格更低了。

仓鼠本身就是一种很可爱的小动物，既方便养也方便携带，加上店面位置不错，另类宠物店吸引了很多好奇者进来观看、购买。他又到年轻人集中的地方宣传，很快，可爱的小仓鼠受到了很多年轻人的喜欢。于晓松的生意越来越好，最多的一天卖出40只。

于晓松经营了半年，赚了近5万元！正当他喜滋滋地开始盘算如何扩大经营时，他的另类宠物事业遭遇了滑铁卢。经营的下半年，因为他卖的仓鼠繁殖很快，很多人拿着自家的仓鼠出来卖，再加上北京等地往大连开始大规模砸货，仓鼠价格降得非常快，对于晓松的生意影响很大。没过多久，竟到了举步维艰的地步。

于晓松开始为自己的另类宠物店谋出路了：只经营仓鼠太单调，要多找些品种才有可能起死回生！一天，于晓松在电视中看到，外国有很多人把蜥蜴、变色龙、捕鸟蛛、乌龟等爬虫动物当宠物。这让于晓松再度兴奋，现在的年轻人不就追求新鲜、个性、刺激吗？

摸规律善宣传另类宠物让他发了财

有了想法，还得找货源。于晓松对这类爬虫宠物根本不了解，一时不知道去哪儿找供货商。他在大连找了几天，终于在一家市场门口发现了一批美洲鬣（liè）蜥。但这远远不够，他又网上查找，四处咨询，终于在广州找到了黄地湾批发市场，里面批发的宠物都是国家认可的保护动物。

很快他便购进了一批另类宠物，有松鼠、美洲绿鬣蜥、巴西树蛙、巴西白膝头、非洲爪蟾、印尼黄头龟、澳洲变色龙，甚至还有越南的捕鸟蛛。于晓松进货前研究过，他只进些无毒的动物。对蜥蜴等易生细菌的爬行动物，他便买来消毒设备仔细进行消毒。然后，用小盒子、整理箱、玻璃缸、木箱子等装好，如若具有攻击性的动物就放在完全封闭好的器皿里运回来。

运回来后，为了满足顾客的视觉享受，他选择些高档精美的盒子作容器，店里顿时变得琳琅满目起来。在大连仅此一家的另类宠物店吸引了很多好奇的人，有时挤满了一屋子人，外面经常可以听到店里传来的惊叫声。很多年轻人几乎是一眼就喜欢上了他的另类宠物。迎合了年轻人追求另类、刺激、新鲜的心理，又具有不像猫狗需要交费等麻烦，所以店里的生意很不错。

在经营中，为了消除人们对动物咬人、有毒的顾虑，于晓松去除了所有另类宠物的毒性和危害性，还散发无毒宣传单，对顾客一遍一遍地解释。有一次，为了让一位年轻顾客相信变色龙是食草动物，他把一只变色龙放在自己肩膀上。那个年轻人看着瞪大了眼睛直呼：“哇，简直酷毙了！”当即买了一只挂在肩膀上大摇大摆地走了。得知没有危险，购买另类宠物的人就更多了。比较贵的宠物大部分都是白领购买的，像800多元的苏卡达陆龟。学生大部分是异地求学，养只宠物可以排解寂寞，这么小的东西放在宿舍里也方便。而一些年纪很小的孩子因为新鲜好玩也喜欢买，但有的父母不接受。于是于晓松便推荐安全系数高的宠物，像乌龟、松鼠、仓鼠。以让孩子接近大自然、培养爱心等理由说服家长。

此外，为了让顾客买得清楚明白，于晓松对每种宠物都做了详细了解。他给每只宠物附上一份说明，介绍如何饲养、生病如何处理等知识。于晓松的店里还经营另类宠物的食物以及相关用品，像器皿、垫材、沙等。顾客来这里买另类宠物几乎什么都能配齐，缺什么能补什么。