实验研究不同厂家注射用加替沙星的产品质量

[摘要] 目的：研究不同厂家注射用加替沙星的产品质量，为医院提供用药参考。方法：采用HPLC法测定几家注射用加替沙星的含量和有关物质；观察其在40℃ RH 75% 6个月和室温（10~35℃）留样12个月的产品稳定性；根据《中国药典》评价产品质量。结果：采用HPLC法在293 nm波长处测定其含量和有关物质，在5.0~80.0 μg/ml范围内浓度与其峰面积呈良好的线性关系（r=0.999 6）；在各项专属性试验中，加替沙星与其他杂质峰基线均分离良好，有关物质检测限为5 ng（S/N=3）；4家产品均稳定，有效期在2年以上。结论：4家注射用加替沙星产品质量均符合《中国药典》（二部）2000年版和2005年版的要求。

[关键词] 高效液相色谱法；不同厂家；注射用加替沙星；产品质量

[中图分类号]R917 [文献标识码]A [文章编号]1673-7210（2008）07（b）-033-03

Experimental studies about quality of products of Gatifloxacin for Injection produced by different pharmaceutical manufactures

HUANG Dong-liang1,WANG Bo1,HUANG Fu-xing2

（1.Shenzhen Accord Pharmaceutical Co.LTD., Shenzhen 518029,China; 2. The Futian People′s Hospital of Shenzhen City,Shenzhen 518033,China）

[Abstract] Objective:To study the qualities of Gatifloxacin for Injection produced by different phamaceutical manufacturers in order to provide references to hospitals for application. Methods: HPLC was used to determine the content of gatifloxacin and related substances in the Gatifloxacin for Injection; to investigate the stabitity of Gatifloxacin for Injection from different manufactures at 40℃ RH75% 6 months and at 10~35℃ 12 months; to evaluate the quality of products about injection by the Chinese Pharmacopeia. Results: The content of gatifloxacin and related substances were determined by HPLC at 293 nm. The detectable concentration of gatifloxacin showed a good linear correlation in the range of 5.0~80.0 μg/ml, r=0.999 6. All the chief peaks of gatifloxacin and those of their related substances could be well isolated in all the specificity test and the detective limit was 5 ng (S/N=3). Products from these 4 manufacturers presented a stable state with a validity time all over 2 years. Conclusion: Quality of products manufactured by 4 manufacturing factories all accord with requirements of the Chines Pharmacopeia (the second part) of 2000 and 2005 edition.

[Key words] HPLC; Different manufactures; Gatifloxacin for Injection; Quality of products

加替沙星（Gatifloxacin，Gat）[1]是日本杏林制药株式会社首创的氟喹诺酮类抗生素，其抗菌谱较广，作用较强，已广泛用于细菌性感染的治疗[2,3]，被称为第四代氟喹诺酮类新药[4,5]，目前我国已研制生产上市。其中，注射用加替沙星是供静脉注射用药的制剂，对其质量要求较高，笔者对4家企业生产的注射用加替沙星进行了含量及其分解产物即有关物质的检测，现报道如下：

1 仪器与试剂

1.1 仪器

HP1100高效液相色谱仪（美国Agilent公司）；Shimadzu class-10VP DAD（日本岛津公司）；TG332电光分析天平（上海天平仪器厂）；KF-240型恒温恒湿箱（德国WTC Binder公司）。

1.2 试药

注射用加替沙星（A为山东罗欣药业股份有限公司，批号060303，规格0.2 g/支；B为浙江尖峰药业有限公司，批号060402，规格0.1 g/支；C为南京圣和药业有限公司，批号060206，规格0.2 g/支；D为日本杏林制药株式会社，批号HLS060211，规格0.2 g/支）；加替沙星对照品（中国药品生物制品检定所，批号140407-200602）。磷酸和水等为分析纯，乙腈为色谱纯。

2 方法与结果

2.1色谱条件

色谱柱：C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相：0.1%磷酸-乙腈（87∶13）；流速：1.0 ml/min，柱温：30℃；检测波长：293 nm。

2.2 线性关系考察

精密称取加替沙星对照品适量，用流动相溶解并配成2.5 mg/ml的对照品贮备液，用流动相分别配制5.0，10.0，20.0，40.0，80.0 μg/ml的标准溶液，分别取10 μl上柱测定，记录峰面积，以峰面积对浓度进行回归分析处理，得回归方程：Y=6.631×104X+5.987×103（r=0.999 6），表明加替沙星浓度在5.0~80.0 μg/ml范围内与峰面积呈良好的线性关系。

2.3 专属性（破坏性）试验

取注射用加替沙星装量差异试验细粉约25 mg，分别加入0.1 mol/L NaOH溶液30 ml，放置30 min；加入0.1 mol/L HCl溶液30 ml，放置30 min；样品水溶后紫外照射（5 000 lx）120 min，样品水溶后加热（80℃）120 min。然后使样品恢复中性，用流动相稀成浓度为1 mg/ml的供试液，按“2.1”项下色谱条件进样10 μl进行专属性考察，结果酸、碱、紫外光和加热均会破坏，导致高分子杂质增加，见图1。可见本法对加替沙星主峰与相关降解产物（有关物质）各杂质峰均分离较好、专属性较强。

2.4 精密度试验

准确吸取上述2.5 mg/ml对照品贮备液，用流动相稀成浓度为10 μg/ml的溶液，按“2.1”项下色谱条件重复进样10 μl测定5次，并以主峰面积计算，结果RSD= 0.76%（n=5）。

2.5 重现性试验

准确称取A厂注射用加替沙星样品5份，用流动相溶解并稀成浓度为10 μg/ml的溶液，按“2.1”项下色谱条件各进样10 μl测定，并以主峰面积计算，结果RSD=0.93%（n=5）。

2.6 稳定性试验

准确称取A厂注射用加替沙星样品，用流动相溶解并稀成浓度为10 μg/ml溶液，进行方法稳定性试验，按“2.1”项下色谱条件进样10 μl测定，日内每2小时测定一次，共测5次，结果日内RSD=0.9%（n=5）；隔日每2小时测定一次，共5次，连测3 d，结果日间RSD=2.6%（n=3）。表明配制溶液应当天测定为好。

2.7 最低检测限

按“2.1”项下色谱条件，取“2.2”项下的对照品贮备液，继续稀释后取适量进行测定，加替沙星在浓度为1.0 μg/ml时进样5 μl，S/N=3时，其最低检测限为5 ng。

2.8 含量与有关物质的测定[3]

取样品（对照品）适量，精密称定，加流动相制成2.5 mg/ml的溶液作为供试品（对照品）贮备液，精密吸取适量，用流动相稀释成10 μg/ml的测试液。取对照品溶液10 μl注入液相色谱仪，调节灵敏度，使主成分峰高为满量程的20%~25%；再取供试品溶液和对照品溶液各10 μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的3倍，供试品溶液色谱图中如显杂质峰，各杂质峰面积总和不得大于主峰面积的1.0%；供试品溶液主峰面积比对照品溶液主峰面积，可计算出供试样品主药的含量。测定结果见表1和表2。

2.9 各厂家的注射用加替沙星稳定性试验

将各厂家生产的注射用加替沙星分别于A：40℃ RH 75%加速试验6个月；B：在室温（10~35℃）避光阴凉处留样考察12个月。每月抽样检测其含量和有关物质等，结果见表3。

3 讨论

笔者建立色谱条件，依照《中国药典》高效液相色谱法操作，对注射用加替沙星的含量和有关物质（分解产物）进行测定，在5.0~80.0 μg/ml范围内浓度与峰面积的线性关系良好，r=0.999 6，方法精密度与稳定性均好，有关物质检测专属性强，各种破坏试验产生的各杂质峰与主峰基线均分离良好，其最低检测限为5 ng（S/N=3）。

从表3数据看出，三家厂商的注射用加替沙星在40℃ RH75% 6个月加速试验中，加替沙星含量A厂降低（99.02%~93.85%）5.17%；B厂降低（99.04%~93.72%）5.32%；C厂降低（99.03%~93.76%）5.27%；D厂降低（99.17%~94.66%）4.51%。即均在5%左右，按《中国药典》“药物稳定性试验指导原则”[6]，产品有效期在3年左右，由于其有关物质含量的增加已接近1.0%（0.93%、0.97%、0.94%、0.89%），只能判断其有效期在2年以上。

再从室温（10~35℃）避光阴凉处留样观察12个月看，A厂产品加替沙星含量降低4.0%；B厂降低3.43%；C厂降低3.70%；D厂降低2.57%，如此推算，2年后A厂产品含量降低8.0%左右；B厂降低6.86%左右；C厂降低7.40%；D厂降低5.14%左右，看来只有D厂产品到3年后加替沙星含量降低在8.0%左右，未超过10%，其产品才有可能达到有效期3年。

总之，A、B、C、D四厂注射用加替沙星质量稳定，有效期为2年以上，符合《中国药典》（二部）2000年版和2005年版的要求。

[参考文献]

[1]Gatifloxacin(Tequin)[Package insert].Princeton(NJ):Bristol-Myers squibb[Z].2003.

[2]Blondeau JM,Borsos S,Hesje CK. Antimicrobial efficacy of gatifloxacin and moxifloxacin with and without benzalkonium chloride compared with ciprofloxacin and levofloxacin against methicillin-resistant staphylococcus aureus[J].J Chemother, 2007,19(2):146-151.

[3] Nicholson SC,Wilson WR,Naughton BJ,et al.Efficacy and safety of gatifloxacin in elderly outpatients with community-acquired pneumonia [J]. Diagn Microbial Infect Dis, 2002.44:117-125.

[4]朱曼，王睿.第四代氟喹诺酮类抗菌药――加替沙星[J].中国临床药理学与治疗学,2001,6（4）：377-381.

[5]Dalhoff A, Schmity FJ. In vitro antibacterial activity and pharmacodynamics of new quinolones [J].Eur J Clin Microbial Infect Dis,2003,22:203-221.

[6]国家药典委员会.中国药典[S].二部.北京:化学工业出版社，2005.附录32,附录197 .

（收稿日期：2008-05-22）

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