黄芪多糖对仔鸡机体免疫力的影响

中图分类号：R446.6文献标识码：A 文章编号：41-1413（2012）03-0000-01

摘 要：为了探讨黄芪多糖对仔鸡免疫力的影响，本实验选择160羽1日龄的的ROSS308肉仔鸡，测定黄芪多糖对仔鸡生长性能和免疫器官的影响以及对T淋巴细胞增殖的影响。实验结果表明黄芪多糖对体重的增加不太明显；对免疫器官的增重前期有轻微降低，后期有明显增重，以0.2%的APS最显著；通过E玫瑰花环实验显示对T细胞亚群的数量有明显增加影响，尤其0.2%组最明显。

关键词：黄芪多糖；仔鸡；免疫力

黄芪中含有多糖、皂苷、黄酮、生物碱、多种氨基酸和微量元素等有效成分。黄芪多糖在黄芪中含量最高, 是黄芪发挥免疫增强作用的主要成分。黄芪多糖具有促进动物生长发育, 使机体产生内源性干扰素, 增强机体免疫力、抗衰老、抗氧化、抗辐射和抗应激等多方面的作用。

一、实验材料

（一）.实验用品：黄芪多糖、肝素抗凝剂、淋巴细胞分离液、实验动物。（二）.实验器材：SG-1000型光学显微镜、DD-5M型低速离心机、HWS-24型恒温水浴箱、BCD-252CKBY型冰箱。(三).1％的红细胞悬液的制备。

二、实验动物的分组和处理

选择160羽1日龄的体格一致的罗斯308肉仔鸡，公母各半；分为4个组，每组40羽，公母各半。四组基础饲料和饲喂环境相同；第一组为对照组，第二组为低剂量组，加 0.1 %黄芪多糖；第三组为中剂量组，加0.2%黄芪多糖；第四组为高剂量，加0.3%黄芪多糖。各组观察饲养48小时后空腹称取各组的总重量，计算平均重量，然后添加不同剂量的黄芪多糖饲喂，开始试验。

三、动物的饲养

试验期间各组其基础饲料组成及营养水平相同；试验期间每天观察鸡的采食情况和精神状态，计算其耗料量、记录死亡鸡只数，并记录。

实验鸡从1 日龄起分别采取自由采食、饮水、光照等常规饲养管理方法。7日龄进行新城疫弱毒苗首次免疫，4日龄进行法氏囊疫苗饮水免疫，21日龄新城疫弱毒疫苗加强免疫，试验期为4周。第1周鸡舍温度为32℃～35 ℃，第2周为30℃～32 ℃，以后每周下降2℃；至第四周自然条件下饲养，24h光照。

四、测定指标与方法

（一）.生产性能。试验前将所有雏鸡以重复为单位称重，并计算初始平均体重。在试验第21天和第42 天，鸡群禁食12h 后进行空腹称重，计算0～21日龄和22～42日龄的平均日增（ADG）以及饲料转化率（FCR）。

（二）.免疫器官指数。于试验第21天和第42天每组随机抽取10只体重相近健康的公母雏鸡，颈静脉放血致死，迅速摘取胸腺、脾脏和法氏囊，进行称重并计算免疫器官指数。计算公式如下：免疫器官指数=免疫器官重/试验阶段体重。

（三）.黄芪多糖对鸡T 淋巴细胞增殖的检测（E玫瑰花环试验）[4]对第1、2、3、4 组在42日龄每组随机抽取6 只,无菌采其心脏血,肝素抗凝。

操作过程:A.分离淋巴细胞 。取肝素抗凝血1 ml ,加入37℃预温的生理盐水1ml，混匀后加在1ml淋巴细胞分离液上，2500r/ min 离心10分钟，弃上清液，用37℃预温的生理盐水洗2次，第一次以2500r/ min 离心15分钟，第二次离心10分钟，弃上清，将沉淀细胞用Hanks 液调整细胞浓度为2 ×106 个/ml的淋巴细胞悬液 。B.淋巴细胞与绵羊红细胞的作用。取小试管加入0.1 ml 淋巴细胞悬液及1 %绵羊红细胞悬液0.1 ml ,然后混匀,置37 ℃水浴箱中5 分钟。800 r/ min 低速离心5 分钟,置4 ℃冰箱中2 小时。C.制片观察。轻轻旋转试管使团块混匀,加2滴018 %戊二醛液,摇匀,室温静置10 分钟,使E 花环固定。取悬液一滴放于载玻片上,然后将稀释的瑞氏染液也滴加在玻片上染色3 分钟。弃去染液,待干后油镜观察,计数200 个淋巴细胞中形成花环的细胞数,算出百分率。

五、数据统计分析试验数据

（一）结果与分析

1.黄芪多糖对不同阶段肉仔鸡生产性能的影响

试验后期的数据显示结果则恰好相反，各试验组的母鸡平均日增重不明显，而公鸡的平均日增重则有所升高，仍是0.3%APS组效果最好，与对照组相比增重8.94%，且效果相对较为明显。

2.黄芪多糖对不同阶段肉仔鸡免疫器官指数的影响

试验前期各组胸腺指数较对照组均有所降低，胸腺指数和法氏囊指数都以0.2%APS组较对照组差异较明显，其他组间差异不明显，0.2%APS和0.3%APS组的脾脏指数较对照组降低20.79%和30.69%，差异显著（P0.05)。

3.黄芪多糖对肉仔鸡T 淋巴细胞增殖的影响

T细胞亚群的数量是机体免疫力的体现的重要指标。玫瑰花环试验是体外检测人和动物细胞免疫功能的一种方法。E-玫瑰花环试验是T淋巴细胞计数的一种重要方法。由于人和动物的T淋巴细胞表面有红细胞受体，因此红细胞可以粘附到T淋巴细胞的周围而形成玫瑰花样的细胞团。在红细胞中，以绵羊红细胞最为常用。B淋巴细胞则没有红细胞受体，所以不能形成E-玫瑰花环，以资鉴别。

（二）讨论

1.黄芪多糖对不同阶段肉仔鸡生产性能的影响

试验结果表明试验前期，黄芪多糖对公鸡平均日增重均有降低趋势，但其对饲料转化率无显著影响；而母鸡各处理组平均日增重均较对照组提高，降低母鸡单位增重饲料消耗量。试验后期，0.3%APS组母鸡平均日增重较对照组显著降低， 提示高剂量黄芪多糖对肉鸡的生产性能可能会产生负面影响。在实际生产中一定要选择合适的添加剂量。

2.黄芪多糖对不同阶段肉仔鸡免疫器官指数的影响

试验结果表明，黄芪多糖对不同生长阶段肉仔鸡免疫器官指数的影响差异显著。在试验前期各试验组公母鸡免疫器官指数与对照组相比无影响或降低，但到试验后期又有增加趋势，0.2%的APS组效果尤为明显。其原因可能是黄芪多糖促免疫器官发育效应在试验前期尚未累积显现出来，到试验后期则产生了明显效果。

3.黄芪多糖对仔鸡T 淋巴细胞增殖的影响。

表明APS 能显著刺激伴刀豆素球蛋白(ConA)或细菌脂多糖(LPS)诱导的猪脾淋巴细胞增殖，且增殖作用与多糖浓度有关。用鸡新城疫- 传染性支气管炎二联(NDV- IBV)弱毒苗首次免疫的同时，给予低剂量的APS，每天1 次，连续3 d。28 日龄用NDV- IBV灭活油乳苗再次免疫。结果表明,APS 均能显著提高新城疫HI 抗体效价，促进外周血T淋巴细胞增殖，提高CD4+、CD8+T淋巴细胞含量和CD4+/CD8+ 值。黄芪注射液对外周血淋巴细胞CD4+/CD8+ 比值有明显调节作用，而且可以提高T淋巴细胞亚群CD3+ 水平，并恢复至正常水平。

六、小结

通过本实验更进一步的了解到了黄芪多糖对仔鸡免疫力的影响，结果显示，黄芪多糖对生长性能有一定的影响，前期以对母鸡较明显，后期对公鸡有一定增重效果。对免疫器官的影响前期都有所降低，后期有增重效果，以0.2%组队脾脏和法氏囊的增重效果最明显。对T淋巴细胞增殖的影响显著，以0.2%增重最明显。综上所述，黄芪多糖有增加机体免疫力，促进生长的作用，在生产实践中应用意义比较大。

参考文献：

[1]崔治中《兽医免疫学》 中国农业出版社 2004出版。

[2]杨 凤 《兽医营养学》（第二版）中国农业出版社 2004出版。

[3]陈杖榴《兽医药理学》中国农业出版社 2002出版。