乙肝标志物检测标本存放时间的对比分析

doi:10.3969/j.issn.1007-614x.2010.15.157

资料与方法

一般资料:所有标本来自本院门诊及住院患者清晨空腹血,采用密闭真空管采血,3000转/分离心分离血清,选用无脂血,无溶血标本,年龄10～55岁,男252例,女230例。根据患者初次检测S/CO值的高低分为4组。A组为弱阳性组,HBsAg,抗HBs、HBeAg的S/CO值为1～3。抗HBe、抗HBc的S/CO值0.35～1,共125例。B组为强阳性组,HBsAg、抗HBs,HBeAg S/CO值均>3,抗HBe、抗HBc的S/CO值

实验方法:检测仪器为酶标分析仪。HBsAg、抗HBs、HBeAg、抗HBe、抗HBc检测试剂盒。ELISA法,操作步骤按试剂盒说明书进行。A组血清标本分别在采血当天,室温存放至第5天、第9天各检测一次。B组血清分别在采血当天、第7天、第14各检测1次。C组血清标本分别在采血当天,4～8℃冰箱保存至第7天,第14天各检测1次。D组血清标本在-20℃冰箱冰冻保存3个月后,各检测1次。检测结果用S/CO值表示,S为样品的A值,CO为切点值,HBsAg、抗HBs、HBeAg以S/CO≥1为阳性,抗HBe、抗HBc以S/CO

结 果

A组血清标本室温保存结果:5天时,抗HBs S/CO值开始下降有2例弱阳性标本变为阴性(S/C0值

B组血清标本室温保存结果:保存1周时各项标志物阳性数无变化;第2周时有1例抗HBs变为阴性,其他阳性例数无变化,但HBsAg、抗HBs、HBeAg S/CO值开始下降,抗HBe抗HBc S/CO值开始上升。

C组血清标本2～6℃保存结果:冰箱贮存7天时,抗HBs、S/CO值开始下降,有2例弱阳性标本已变为阴性,HBsAg、HBeAg、S/CO值贮存14天开始下降,抗HBe、抗HBc值贮存14天开始上升,其HBV标志物阳性变化,见表2。

D组血清标本在-20℃冰冻保存3个月后,各项目S/CO值变化很小,阳性例数无变化。

讨 论

从结果来看,通常在不知道血清HBV各标志物含量高低的情况下,室温放置只能保存3天。5天时弱阳性的抗HBs已经转阴。2～6℃冰箱保存的标本只能放置5天,7天时其弱阳性标本S/CO值会下降,尤其是抗HBs出现假阴性结果引起漏检。所以根据工作实际,在当日对HBV标志物不能检测者,应将标本在2～6℃的冰箱内保存,最长不得超过5天,即应于5天之内完成检测。另外,由于标本在冰箱保存时间过长易导致血清IgG聚合,使ELISA间接法在显色时本底加深。故对于一些需要长时间保存的标本或有可疑结果,需要在以后较长时间内重新复检的标本,都应于-20℃冰冻保存,以尽可能做到与新鲜检测标本结果一致。

参考文献

1 叶应妩,王毓三.全国临床检验操作规程.第3版.南京:东南大学出版社,2006:10.

2 孙荣武,王鸿利.临床实验室诊断学.上海:上海科学技术出版社,2001:4.