时间：2022-10-01 07:07:21
摘 要：本文讨论各种操作条件对红外光谱法测定花生油中反式脂肪酸的影响，得到了较有价值的结论。比较而言，本文使用的方法无需甲酯化等多余的处理，可直接对样品进行测定，具有方便、快速、高重复性、便于推广、无污染等优点。
关键词：反式脂肪酸；花生油；红外光谱法
中图分类号：R134+.4 文献标识码：A
1概述
随着人们生活水平的日益提高，食品安全也越来越受到世人的关注。目前，丹麦、美国、加拿大已经开始颁布法律，强制性要求食品生产厂商必须在食品包装上的所有营养标签上注明反式脂肪酸的含量。[1]因此，针对反式脂肪酸的测定也越来越受到关注，建立一个高效、准确的测定反式脂肪酸的方法是势在必行的。
2 检测方法
2.1 试剂与仪器
2.1.1 正己烷，分析纯b） 反式脂肪酸标准品：反油酸甘油酯（≥99.9%）c） 顺式脂肪酸标准品：天然油酸甘油酯（≥99.9%）d） 标准溶液：精确称取按其纯度折算为100%质量的反式脂肪酸标准品1.6000g，用正己烷溶解并稀释成浓度为5.0%（W/W）的标准溶液，临用时配制e） 红外光谱仪，400cm-1～1000cm-1。f） 液体吸收池，配有0.1mm膜。
2.2 操作步骤
2.2.1 标准曲线的制备与测定，分别吸取标准溶液0mL、0.25mL、0.50 mL、2.50mL、5.00mL、12.50mL、25.00mL，至25mL容量瓶中，用正已烷稀释至刻度，配制成浓度为0%、0.05%、0.10%、0.50%、1.00%、2.50%、5.00%的标准曲线系列。以空气为空白，用红外光谱仪以0.1mm膜厚度液体池，于900cm-1～1000cm-1间扫描其吸收谱图。将其它各浓度谱图分别与0%浓度谱图做差谱，且在966cm-1处分别计算其峰高。
2.2.2 顺式脂肪酸标准品的测定，将顺式脂肪酸标准品摇匀后直接注入液体池中，以空气为空白，用红外光谱仪以0.1mm膜厚度，于900cm-1～1000cm-1间扫描其吸收谱图。
2.3 结果计算
样品中反式脂肪酸的含量（%）按式X=计算式中：X-样品中反式脂肪酸的含量，%；Si-从标准曲线上查得的峰高；K-标准曲线的斜率。
3 方法的主要技术研究过程
3.1 对反式脂肪酸测定原理的研究
根据资料，反式脂肪酸的反式构型双键由于其 C－H 的平面外振动，使得反式脂肪酸在 966cm-1处存在最大吸收，而顺式构型的双键和饱和脂肪酸在此处却没有吸收。因此，利用这一原理可以确定油脂中是否存在反式脂肪酸，并且能对其进行定量分析。
3.2 最大特征吸收峰和扫描范围的测定
分别对顺式脂肪酸标准品和加入反式脂肪酸标准品的油样进行压片红外光谱透射扫描，确定在油中反式脂肪酸的最大特征吸收峰和扫描范围[5]，如图1。
根据扫描结果，可以确定油样中反式脂肪酸的最大特征吸收峰为966cm-1，扫描的最佳范围为900cm-1～1000cm-1。
3.3 标准品溶剂的选择
根据红外谱图库资料显示，在900cm-1～1000cm-1处正己烷杂质最少，且对测定干扰最小并与标样有良好的相容性，所以本法选用正己烷作标准品溶剂，如图2。
3.4 对试验方法中标准曲线的配制、测定及线性关系进行研究
配置不同浓度的标准溶液进行测定，画出不同浓度范围内的标准曲线，如图3。并以吸光值为纵坐标，反式脂肪酸标准品含量为横坐标对其进行线性回归分析，计算其相关系数，图4。
3.5 对方法进行重现性、精密度和准确度的测试
3.5.1 2.0%反式脂肪酸标准使用液的配制，精确移取5.0%反式脂肪酸标准溶液4mL于10mL容量瓶中并用正己烷定容，配制成浓度为2.0%的标准使用液。
3.5.2 方法重现性和精密度的测试，分别配制6个2.0%反式脂肪酸标准使用液，按上述条件测定其浓度，计算标准偏差和相对标准偏差。所得结果表明本方法重现性好，精密度较高。
3.5.3 计算方法的准确度，根据测定结果，已知6个样液配制浓度为2.0%，计算测定值与真实值的绝对误差和相对误差。所得结果表明本方法的准确度良好。
3.6 样品含量、样品重现性的测定
3.6.1 样品含量的测试，选择有代表性的三种样品，用以上确定的外标法重复测定其反式脂肪酸含量数次，求平均值，如表1。
3.6.2 对样品进行回收率测试，对样品加入不同质量的标准物质，按以上方法进行处理并测定其含量，计算回收率，结果表明样品均能达到98～100%的回收率。
4 方法检出限的测定
将反式脂肪酸5.0%标准溶液以正己烷稀释500倍和1000倍，配制成0.01%和0.005%的标准溶液，以下操作同样品测定，测得结果表明，当浓度含量为0.01%时，基线已经偏高，噪音干扰对测定已经有很大影响；0.005%时已经不能确认966cm-1处是否是特征峰。所以，选择测试中较好的0.01%浓度为本方法的最低检出限。
结论
本文通过对各种操作条件对红外光谱法测定花生油中反式脂肪酸的影响，得到了较有价值的结论。比较而言，本文使用的方法无需甲酯化等多余的处理，可直接对样品进行测定，具有方便、快速、高重复性、便于推广、无污染等优点。
参考文献
[1]Seibin arasaki , Teruko arasaki . Vegetable from the Sea [M].Tokyo，2003，Japan Publications1：p33-p51.
[2]Determination of Total Isolated trans Unsaturated Fatty Acids in Fats and Oils[ M ] . AOAC Official Method，2000.10，AOCS official method：p14~p99.
[3]喻植雄，胡杏珍，毛水和.食用花生油卫生规范[M].北京农业出版社，2009，1：p1～p6.