加减柴胡桂枝干姜汤对戊四唑诱导癫痫小鼠作用的实验研究

摘要：目的：研究加减柴胡桂枝干姜汤不同剂量对戊四唑诱导小鼠痫性发作的影响。方法：2月龄昆明种小白鼠连续灌胃给药7天后，腹腔注射戊四唑造成癫痫模型，造模后1h，观察药物对小鼠癫痫发作潜伏期、行为分级、发作次数等的影响。结果：加减柴胡桂枝干姜汤可以显著延长小鼠癫痫发作潜伏期、改善痫性发作程度、发作次数，与模型组相比，差异具有统计学意义(P

关键词：柴胡桂枝干姜汤；戊四唑；癫痫；实验研究

中图分类号：R285.5

文献标识码：A 　文章编号：1673-7717(2007)12-2567-02

癫痫是一组反复发作的神经元异常放电所致的暂时性中枢神经系统功能失常的慢性疾病，是神经系统的多发病之一。我国癫痫发病率为1‰，人群患病率达0.5％～1％，它不仅标志着脑部的疾病，更是一个心身疾病，故给病人和病人家属以及社会造成沉重的身心痛苦和精神负担。该病总的预后差，常反复发作，缠绵难愈，而目前对癫痫病的防治只能靠长期用药以控制症状，现代抗癫痫药(AEDS)能使约80％病人的癫痫发作获得控制，但由于癫痫病需长期甚至终生服药治疗。化学合成药物的毒副反应就显得尤要重视。因此寻找较佳的治疗方法和疗效确切、毒副作用小的药物，是中、西医界亟待解决的重要课题，中医药防治癫痫具有较大的潜力。

本研究通过观察加减柴胡桂枝干姜汤对戊四唑诱导癫痫小鼠癫痫发作潜伏期、行为分级、发作次数等的影响，探讨加减柴胡桂枝干姜汤的抗癫痫作用，为癫痫的防治寻找新的有效药物。

1.材料与方法

1.1实验动物

健康昆明种小鼠50只，雌雄各半，体重为(20±2)g，由福建中医学院实验动物中心提供。

1.2药物

戊四唑由美国Sigma公司生产，批号：10106150，戊四唑用前以生理盐水新鲜配制成8mg/mL浓度；苯妥英钠由山西省临汾健民制药厂生产，批号060201，用生理盐水配成5mg/mL浓度；所用中药均由福建中医学院国医堂提供，经鉴定符合《中华人民共和国药典》规定，加减柴胡桂枝干姜汤组成：柴胡15g，黄芩9g，牡蛎(先煎)9g，桂枝9g，干姜6g，菖蒲9g，钩藤(后下)12g，茯苓12g，甘草3g，水煎2次，滤液合并。

1.3实验方法

1.3.1分组　将小鼠随机分成模型组、苯妥英钠组、中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组5组，每组10只。

1.3.2给药　3、4、5组小鼠分别给予加减柴胡桂枝干姜汤煎剂(每毫升含生药浓度分别为0.4、0.6、0.9g／mL)，按0.2mL/10g体重灌胃给药，每日1次。模型组给予等量蒸馏水。苯妥英钠组按小鼠50mg/(kg・d)，每日1次灌胃给药。

1.3.3造模各组动物于第7天灌胃给药后1h，腹腔注射戊四唑80mg/kg，造成癫痫模型。

1.3.4小鼠行为观察　癫痫发作的分级标准参照Racine标准：0级：无反应；I级：节律性嘴或面部抽动；Ⅱ级：点头或甩尾；Ⅲ级：单肢抽动；IV级：多肢抽动或强直；V级：全面性强直一阵挛发作。连续观察30min，记录小鼠癫痫发作潜伏期，包括轻度发作(相当于I～Ⅲ级)潜伏期和重度发作(相当于Ⅳ～V级)潜伏期、发作行为分级及发作次数。

1.4统计学处理

采用SPSS13.0统计软件对上述观察结果进行分析处理。实验数据计量资料用均数±标准差表示，多样本均数的比较及均数的两两比较用方差分析检验，等级资料用非参数检验分析。

2.结果

2.1对戊四唑诱导小鼠癫痫发作行为的影响

结果见表1。

2.2对戊四唑诱导小鼠癫痫发作潜伏期的影响

结果见表2。

3.讨论

在癫痫模型中，戊四唑造模已被广泛应用，其致痫模型潜伏期短，产生快速，死亡率低，是复制急性全身性发作的一种常用模型。同时，戊四唑引起的发作是唯一能复制的人体自发癫痫，且伴有皮质超同步放电和分化明显的强直相和阵挛相，所以被广泛应用于癫痫发病机制的研究、抗癫痫药物的筛选以及治疗方法的探索。

本研究结果显示，模型组小鼠腹腔注射戊四唑，均能成功致痫，其痫性发作程度较重，均为Ⅳ-V级，经统计分析。模型组小鼠痫性发作程度最重，苯妥英钠组小鼠痫性发作程度最轻，中药高、中、低剂量组发作程度较轻，与模型组均具有显著差异(P

癫痫属中医“痫病”范畴，中医认为本病是由于多种原因造成脏腑失调，气机逆乱，风阳痰浊，蒙蔽清窍所致，本病与心肝脾肾功能失调关系密切。加减柴胡桂枝干姜汤是在《伤寒论》方柴胡桂枝干姜汤基础上去栝楼根加菖蒲、钩藤、茯苓，具有宣通气机、顺气化痰、清火平肝、健脾和胃、开窍醒神之功效，全方具有标本同治之特点。柴胡桂枝干姜汤是《伤寒论》中治疗少阳枢机不利，水饮内结之方剂，具有枢转少阳、宣化痰结之功效，其基本病机为气郁痰结，脾胃失健，而气郁痰结正是痫病发病之主要病理。 　通过本课题研究表明，加减柴胡桂枝干姜汤在延长小鼠癫痫发作潜伏期、改善痫性发作程度、发作次数等方面，具有一定的作用，与西药组相比，无显著性差异(P>0.05)，提示了加减柴胡桂枝干姜汤是较为理想的抗癫痫药物。但其抗癫痫作用的机制，还有待于今后进一步深入研究。