粪便隐血化学与免疫检测方法及优势对比

时间:2022-09-17 10:54:15

粪便隐血化学与免疫检测方法及优势对比

摘 要 目的:强调粪便隐血化学法和免疫法各自的特点优势及互补作用。方法:化学法用匹拉米洞法,免疫法用双抗体夹心法。结果:化学法对上消化道出血灵敏,但受食物药物干扰,免疫法对下消化道出血灵敏,不受食物药物干扰,但上消化道微量出血、后带现象易产生假阴性。结论:两种方法结果综合分析才能报出结果。

关键词 粪便隐血 检测方法 优势对比

化学免疫检测方法原理

化学法:利用血红蛋白中的含铁血红素有类似过氧化物酶的作用,其可催化分解过氧化氢,释放新生态氧,新生态氧因氧化能力较强,可氧化色原物而使之呈色。例匹拉米洞法,氧化匹拉米洞而产生紫蓝紫红的颜色。

免疫法:采用双抗体夹心法,如果标本中含有血红蛋白,与试纸条测试区的抗血红蛋白的抗体结合出现紫红色条带。

检测方法

化学法,将显色剂A(匹拉米洞5%)滴1滴至滤纸中的标本,再滴一滴显色剂B(双氧水3%)之后5分钟内观察显色结果。

免疫法用采样棍取少量的粪便标本涂抹于简易滤纸片中,留(10~50mg)大约1根火柴头大小放入0.5ml蒸馏水的试管中混匀。将免疫试纸条箭头所指的一端浸入标本混合液中,在5分钟内观察结果。结果判读

化学法结果显示:①滴加显色剂B之后,随即出现紫蓝色阳性反应,报告为(++++)。②滴加显示剂B之后,在10秒内出现紫蓝色阳性反应,报告为(+++)。③滴加显色剂B之后,在1分钟内出现紫红色阳性反应,报告为(++)。④滴加显色剂B之后,在1分钟后5分钟内出现紫红色阳性反应,报告为(+)。⑤滴加显色剂B之后,没有产生任何颜色反应,报告为阴性(-)。

免疫法结果显示:在5分钟内观察结果,对照线会出现紫红色,观看测试线可以得到下列结果:①阳性结果:测试线出现紫红色。②阴性结果:测试线不出现紫红色。③如果测试线和对照线均不出现紫红色,则表示试纸条已失效。④10分钟之后所判读的结果,不代表任何意义。

化学免疫综合结果分析

见表1。

化学、免疫检测方法各自的优势对比

化学法优势:上消化道出血时化学法比免疫法阳性检出率高。虽然检测的基本原理相同,但受试剂类型、粪便中血红蛋白的多少,过氧化氢的浓度,血液在肠道中滞留的时间、标本量的多少以及食物、药物等众多因素的影响,而结果差异较大。①动物性食品可使隐血试验出现假阳性;大量生食蔬菜也可使结果出现假阳性。②大量服用维生素C等还原性药物可出现假阴性;血液在肠道中停留过久,血红蛋白被细菌降解也会导致假阴性。

免疫法优势:下消化道出血时,免疫法比化学法灵敏度高,本方法不受饮食的限制药物的干扰,能准确检测无症状,少量、持续的消化道出血,特异性强。但上消化道少量出血时,血中的红细胞往往会被胃酸或胃液中的酵素分解成血基质,而以血基质状态存在于粪便中,免疫法对血红蛋白(Hb)具有特异性,对血基质则没有,可能因此产生假阴性;另当患者粪便中隐血量很大时,免疫法亦可能出现后带现象假阴性。

参考文献

1 临床医学检验与技术(中级)/全国卫生专业技术资格考试专家委员会编写.北京:人民卫生出版社,2007,1.

2 叶应妩,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规程.南京:东南大学出版社,2006.

3 刘成玉.临床检验基础实验指导.北京:人民卫生出版社,2005.

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