葛根素对酒精性肝损伤大鼠血清转氨酶及肝纤维化指标的影响

摘要　目的：研究葛根素对酒精性肝损伤大鼠血清转氨酶和肝纤维化指标的影响，探讨葛根素对酒精性肝损伤的防治作用。方法：将75只SD大鼠随机分成正常组10只、模型组20只及阳性对照组、葛根素大剂量组、葛根素小剂量组各15只，观察8周后血清转氨酶水平和肝纤维化指标。结果：葛根素大、小剂量组血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平明显低于模型组(P

关键词　葛根素　酒精性肝损伤　血清转氨酶肝纤维化　大鼠

葛根素是从野葛的干燥根中提取并分离出来的一种单体，主要成分为4，7一二羟基8-b－D葡萄糖异黄酮，属异黄酮化合物。它具有解热、降血糖、改善脑循环和微循环、扩张心肌、抗心律失常等药理作用。在我国用葛根解酒毒有4000多年的历史，如《备急千金要方》中就记载：“治酒醉不醒方，葛根汁一斗二升饮之”。本次研究通过观察葛根素对酒精性肝损伤大鼠血清转氨酶和肝纤维化指标的影响，以探讨葛根素对酒精性肝损伤的防治作用。

1　材料与方法

1.1　实验动物：SD大鼠75只，雄性，体重140～180g，清洁级，由浙江省医学科学院动物中心提供。

1.2　材料：无水乙醇、玉米油由市场购得；吡唑由浙江同丰医药化工有限公司生产；阳性对照药物(复方鳖甲软肝片)由内蒙古福瑞中蒙药科技股份有限公司生产；葛根素片由广州白云山侨光制药有限公司生产；丙氨酸氨基转移酶、谷氨酸氨基转移酶试剂盒由宁波慈城生物试剂有限公司提供；层粘连蛋白、透明质酸、Ⅲ型前胶原氨基端肽放射免疫分析试剂盒由北京北方生物技术研究所提供。

1.3　方法：将75只SD大鼠采用随机表法分为5组，其中正常组10只，自由进食、饮水，每天下午给等体积的等渗盐水灌胃；模型组20只，每天上下午各给乙醇、玉米油、吡唑混合液灌胃1次(灌胃量为乙醇8g・kg-1・d-1，玉米油2ml・kg-1・d-1，吡唑27.2mg・kg-1・d-1)，自由饮水；阳性对照组15只，在模型组的基础上，每天下午再给等体积的复方鳖甲软肝片(1g・kg-1・d-1)水溶液灌胃；葛根素大、小剂量组各15只，在模型组的基础上，每天下午分别再给等体积的葛根素片(分别为1.5g・kg-1・d-1、O.75g・kg-1・d-1)水溶液灌胃。全部大鼠于8周后抽取股静脉血并处死，采血前12h禁食禁水。

1.4　观察指标：ALT、AST采用全自动生化分析仪测定。LN、HA、PⅢNP按照试剂盒步骤检测。

1.5　统计学方法：研究数据以(z±s)表示，用SPSSl3.0统计软件分析各组间是否存在差异，有统计学意义分析采用One-way ANOVA分析；进一步各实验组与对照组的比较采用最小显著差值法(LSD)。以P

2　结果

2.1　动物一般情况：实验过程中，除正常组外，其余各组大鼠被毛松散蓬乱，毛色枯黄，精神差，活动少，且反应迟钝，尿色偏黄，大便稀软不成形，体重与正常组相比增长较慢。正常组大鼠全部存活，其余各组大鼠死亡数分别为：模型组7只，阳性对照组4只，葛根素大剂量组4只，葛根素小剂量组5只。其中4只因灌胃时液体灌入气管立即死亡；8只因灌胃时液体呛咳人肺，引起肺淤血、肺水肿；6只因胃扩张穿孔；2只原因不明。

2.2　各组血清转氨酶检测：详见表1。模型组大鼠ALT、AST较正常组明显升高，有非常显著性差异(P

2.3　各组血清肝纤维化指标的检测：详见表2。模型组大鼠血清HA、LN、PⅢNP较正常组明显升高，有非常显著性差异(P

3　讨论

酒精性肝损伤是由于长期过度饮酒，使肝细胞反复发生脂肪变性、坏死和再生所引起的一种疾病。近年来，随着我国国民经济的发展，生活方式和饮食结构的改变，酒精性肝损伤已经成为仅次于病毒性肝炎的主要肝损伤原因。目前认为，一般每日饮酒80～150g[酒精(g)＝饮酒量(ml)×酒精含量(％)×0.8(酒精密度)]，连续5年即可造成肝损伤；大量饮酒在20年以上，40％～50％会发生肝硬化。酒属湿热有毒之邪，味甘、苦、辛，性温，有毒，入心、肝、肺、胃经。根据中医理论，酒精性脂肪肝、酒精性肝炎可按“伤酒”、“胁痛”、“酒癖”等论治，而酒精性肝硬化则属“酒癖”、“酒臌”等病范畴。目前，中医药防治酒精性肝损伤有其独特的优势，不论是辨证论治或固定方药加减治疗，均有较好疗效，并且从临床、基础等各层次进行了一系列研究。黄光明等进行的实验证明葛根素具有降低急性酒精中毒

SD大鼠血中乙醇浓度的作用，尤以60分钟以前作用明显。Lin等首先选择性地繁育喜好乙醇的大鼠模型一P系大鼠，然后以其为实验动物，给P系大鼠葛根素以100rag・kg-1・d-1的剂量灌胃，可使该种大鼠的乙醇摄入量分别减少40％，表明葛根有助于减轻乙醇对身体的毒害，对机体具有明显的保护作用。本次研究通过乙醇、玉米油、吡唑混合液灌胃法建立酒精性肝损伤大鼠模型，观察葛根素对酒精性肝损伤大鼠血清转氨酶和肝纤维化指标的影响，以探讨葛根素对酒精性肝损伤的防治作用。

当肝细胞损伤时，可引起血清中ALT、AST的水平升高。ALT、AST数值增高与肝功能进行性破坏有关，ALT、AST数值越高，提示肝纤维化及肝硬化的程度越重。本次研究表明，葛根素能有效降低酒精性肝损伤模型大鼠血清ALT、AST水平，葛根素大、小剂量组降低血清ALT明显，但组间无明显区别；葛根素大剂量组降低血清AST明显，但葛根素小剂量组降低AST不明显。在降低酒精性肝损伤模型大鼠血清ALT、AST上，葛根素大、小剂量组优于阳性对照组，但无显著性差异，可能存在用药时间不足等问题，有待于进一步实验研究。HA主要由肝内间质细胞合成，血清HA与肝纤维化程度密切相关；LN是基底膜的特有成分，在肝纤维化时，I.N沉着在Disse间隙.从而使肝窦毛细血管化，许多文献研究均认为血清LN与肝纤维化的程度密切相关；血清PⅢNP能可靠地反映肝纤维化的活动程度，同时与肝脏炎症、坏死有关，其水平随肝纤维化程度的加重而升高。本次实验中，酒精性肝损伤模型大鼠血清HA、LN、PⅢNP明显升高，血清HA、PⅢNP升高都在2倍以上，实验结果表明，葛根素能有效降低血清HA、LN、PⅢNP水平。在血清HA方面葛根素疗效较好，但葛根素大、小剂量与阳性对照组之间均无显著性差异；在血清LN方面，只有葛根素大剂量组效果明显，虽然阳性对照组与葛根素小剂量组能降低升高的血清LN水平，但差异不明显；在降低血清PⅢNP方面效果尤其显著，血清PⅢNP降低将近1倍，大、小剂量葛根素组间差异明显，葛根素大剂量组疗效明显优于小剂量组，存在量效关系。由此。我们认为，葛根素能有效降低酒精性肝损伤模型大鼠的ALT、AST，从而改善肝功能状况；通过降低肝纤维化指标血清HA、LN、PⅢNP的水平，一定程度上可抑制酒精导致的肝纤维化。葛根素具有一定的降低酒精性肝损伤血清转氨酶水平和肝纤维化各指标的作用，至于其具体的机理我们将进一步深入研究。