妇科千金片对大鼠盆腔炎子宫超微结构的研究

【摘 要】目的：探讨妇科千金片治疗盆腔炎的作用机制。方法：选用Wistar大鼠，行子宫内接种混合菌液造急性盆腔炎模型。将大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组、妇科千金片低、中、高剂量组、妇炎康组、罗红霉素组，药物治疗后，取子宫组织，采用超微电镜观察组织病理变化。结果：正常组、假手术组的子宫内膜细胞超微结构正常；模型组的子宫内膜上皮细胞脱落、坏死、变性、纤维增生；妇科千金片低、中剂量组的子宫内膜上皮细胞水肿、脱落、坏死，纤维增生。妇科千金片高剂量组子宫内膜间质细胞线粒体水肿、空泡化外，均正常。妇炎康组子宫内膜上皮脱落、胶原纤维增生、间质细胞胞浆水肿、细胞萎缩、粘膜下层细胞线粒体广泛空泡化；罗红霉素组子宫内膜细胞超微结构基本正常。结论：妇科千金片对盆腔炎模型大鼠均有一定的治疗作用。

【关键词】妇科千金片；急性盆腔炎；超微结构

【中图分类号】R285 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484（2013）01-0049-02

妇科千金片对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌和白色念珠菌均有抑菌作用，对环磷酰胺所致免疫低下的小鼠，具有增加小鼠血清溶血抗体、提高小鼠细胞吞噬百分率和吞噬指数的作用[1]。为了进一步探讨其药理作用，　我们运用超微电镜观察组织病理变化。将妇科千金片对大鼠盆腔炎模型子宫内膜细胞超微结构的影响进行了实验研究，　现将结果报告如下。

1.1　实验动物 雌性Wistar大鼠120只，体重180～220g，鼠龄8周，由上海西普尔―必凯实验动物有限公司提供（SPF级，合格证号2008-0016），每笼圈5只。

1.2造模及分组 将实验大鼠分别称重，腹部常规消毒，　10%乌拉坦按0.075ml/kg体重，大鼠腹腔注射，待大鼠麻醉后，用1ml注射器针头抽取0.2ml含3×109个/ml的混合菌液（此混合菌液由金黄色葡萄球菌、大肠杆菌，解脲脲原体），左手持鼠尾提起大鼠，用10ml注射器的针头于阴道底部的子宫颈分叉处小心进入一侧宫腔内，针头宫腔内来回抽拉2次，然后朝卵巢方向推注菌液0.1ml，同样操作步骤将0.lml菌液注入另一侧子宫，注射完毕后，明胶海绵放置于阴道底部的子宫颈，以防菌液漏出。假手术组，手术操作同上，但针头进入子宫后不来回抽动，注射等量0.9%生理盐水，空白组不予任何处理。

大鼠造模造模术后第4天随机分为正常组、假手术组各10只，模型组、妇科千金片低、中、高剂量组、妇炎康组、罗红霉素组各9只。按大鼠与人等效剂量换算方法计算出各大鼠给药剂量，各药均配成10ml/kg给药溶液，每天定时经口灌胃给药治疗，每日1次，连续21天。

1.3　收集标本

给药结束后的第2天，以10%乌拉坦0.075ml/kg　腹腔注射麻醉。取大鼠子宫组织称重，用2.5%戊二醛固定，4℃冰箱保存，供电镜观察子宫内膜组织的超微结构。

1.4　检测方法

大鼠子宫内膜超微结构的电镜标本制作程序：子宫组织用2.5%戊二醛固定24小时，2%锇酸2小时，50%、70%、90%、100%丙酮梯度脱水，每级10分钟，纯环氧树脂包埋剂（Epon812、MNA、DMP-30、DDSA）包埋成块，60℃修块定位，超薄切片（厚度为500A°），电子染色，透射电镜观察子宫内膜组织的超微结构，拍照。

2　结果与分析

电镜观察结果：正常组子宫内膜上皮柱状排列、皮下固有层正常，微绒毛正常（图1）；假手术组子宫内膜上皮细胞、皮下固有层正常（图2）；模型组子宫内膜上皮细胞脱落、坏死、变性、纤维增生（图3）；妇科千金片低剂量组子宫内膜上皮细胞水肿、脱落、坏死，纤维增生（图4）；中剂量组子宫内膜上皮有少量微绒毛、间质细胞水肿（图5）；高剂量组子宫内膜间质细胞线粒体水肿，空泡化外，均正常（图6）；妇炎康组子宫内膜上皮脱落、胶原纤维增生、间质细胞胞浆水肿、细胞萎缩、粘膜下层细胞线粒体广泛空泡化（图7）；罗红霉素组子宫粘膜下层、腺体及间质细胞正常（图8）。

3　讨论

正常大鼠子宫内膜上皮的超微结构：上皮细胞呈柱状，形态规则、一致，细胞排列整齐，细胞基底面位于基底膜上，细胞顶部围成腺腔；分泌细胞顶部呈圆顶状，游离面的微绒毛短少且直、直径大小一致，顶部胞质中可见较多大小不一的电子致密颗粒；纤毛细胞游离面的纤毛短而少，结构典型，纤毛的基底小于顶部胞质内；胞质内线粒体为卵形或长形；粗面内质网分散，其池短而窄；细胞核规则，呈卵圆形，位于细胞中部，轮廓平滑；核仁明显，呈网线状；核质着色淡、均匀。基底膜完整、清晰，较平直[2]　。有研究盆腔炎模型大鼠子宫内膜上皮细胞的超微结构：微绒毛明显大量脱失，黏膜上皮明显变薄，柱状上皮矮平，线粒体及粗面内质网减少，糖原颗粒明显减少，胞核双层膜结构局部融合，黏膜下炎细胞浸润[3]。

本研究模型组大鼠的子宫的内膜上皮细胞脱落、坏死、变性、纤维增生，显示模型成功。妇科千金片高剂量组及罗红霉素组的子宫内膜上皮细胞均较模型组有所好转，显示妇科千金片对大鼠急性急性盆腔炎有一定的治疗作用。至于妇炎康对大鼠急性盆腔炎子宫内膜上皮细胞的作用不明显，尚有待扩大样本，进一步研究。

参考文献：

[1]　张祖荡，潘善庆．妇科千金片的药效学研究．湖南中医杂志[J]．1998，14（2）：57。

[2]　张延龄.细胞凋亡与外科.国外医学外科学分册[J].1998，25（l）：2-4。

[3]　王历，李秀明.　桃核承气汤治疗热郁血瘀型盆腔炎大鼠的实验研究[J].2007，35（5）：30-31。