HPLC法筛查中重型β地贫的结果分析

摘 要 目的：总结用高效液相色谱分析法（HPLC）筛查中重型β地中海贫血（简称地贫）的经验，为临床诊断和治疗提供参考。方法：分析45例HPLC法胎儿血红蛋白F（HbF）明显偏高，结果提示为中间型或重型β地贫患者的地贫筛查和基因诊断结果。结果：45例地贫筛查结果提示为中间型或重型β地贫的患者，有42例基因诊断为中间型或重型β地贫，共有12种基因型；另有3例基因诊断结果为轻型β地贫，其中2例基因型为β41-42/N，另外1例为β17/N。此外，45例患者地贫筛查结果显示，有3种基因型共5例患者的血细胞分析结果出现MCV和MCH高于截断值的情况。结论：HPLC法是筛查中间型和重型β地贫理想的方法，地贫筛查除了使用红细胞参数外，最好也能进行血红蛋白分析。

关键词 HPLC 地贫筛查 β地中海贫血 基因诊断

β地贫是一种由于β珠蛋白链合成减少（β+）或完全缺乏（β0）所致的遗传性溶血性疾病，临床上根据贫血的严重程度，将β地贫分为轻型、中间型和重型。中重型β地贫中有纯情合子和双重杂合子，由于类型组合的不同，临床表现轻重不一，实验结果各异[1]。为此，本研究分析了51例HPLC法HbF显著增高患者的地贫筛查和基因诊断结果，为临床诊断和治疗提供参考，现报告如下。

资料与方法

以2012年12月-2013年10月在广西柳州市妇保健院进行地贫筛查和基因检查的45例患者为研究对象，年龄2个月～32岁。

方法：①以血细胞分析仪检测平均红细胞体积（MCV）和平均红细胞血红蛋白含量（MCH），深圳迈瑞公司生产的BC-5300型血细胞分析仪及配套试剂、质控物及校准物；血细胞分析抽取患者静脉血2ml，以EDTA抗凝。严格按仪器试剂说明书进行检测。截断值：MCV

结 果

45例地贫筛查结果提示为中间型或重型β地贫患者，有42例基因诊断为中间型或重型β地贫，共有12种基因型，另有3例基因诊断结果为轻型β地贫，共有2种基因型，见表1。

讨 论

本研究显示，45例HPLC法筛查提示中重型β地贫的患者，经基因诊断有42例为中重型β地贫，地贫筛查与基因诊断的符合率93.3%（42/45），特别其中有3例基因型β41-42/βE的患者，地贫筛查均提示β地贫复合HbE，说明HPLC法是筛查中重型β地贫比较理想的方法。另外3例虽然与基因诊断不一致，但也相差不远，为轻型β地贫，此外，由于基因诊断采用RDB法，选用的是17个高频率β基因位点，而地贫是异质性很强的遗传病，目前全世界已累计报道该病的基因突变位点超过100种，中国人已发现34种，不排出由于基因突变位点的异质性而产生的假“阴性”[2]。

有3种基因型出现MCV和MCH高于截断值的情况，经查β41-42/β41-42基因型组有1例患者的MCV86.1fl，有1例患者的MCH27.4pg，2例患者的年龄均1岁；β41-42/β17基因型组有1例患者的MCV82.9fl，年龄7个月，有1例患者的MCH27.0pg，年龄5个月；β41-42/N基因型组有1例患者的MCV90.2fl、MCH28.4pg，年龄5个月。如果单独按MCV或MCH进行地贫筛查，均会漏诊2例中重型β地贫和1例轻型β地贫，漏诊率均为6.7%（3/45），如果用MCV和MCH进行地贫筛查，会漏诊1例轻型β地贫，漏诊率均为2.2%（1/45），其原因一方面是由于MCV和MCH在不同年龄组的截断值不同[3]，而本研究用的是成人组的截断值，也不排出MCV或MCH假性增高[4～7]。

从本研究β地贫患者的年龄来看，多数是婴幼儿，说明本地区每年仍有不少中重型β地贫患者出生，原因一是在基层及贫困地区，地贫防治筛查力度远未达到理想的目标，基层医务人员对该病的认知程度尚未普及，在尚无全民医疗保障的大环境下，民众不原花钱做检查[8]。二是大部分基层单位地贫筛查主要采用“二步法”，即测定红细胞脆性，采用“红细胞休克一管定量法”，阳性者再进行血红蛋白分析[9]。前者有近8%～9%的患者呈假阴性反应，也就可能有近8%～9%的地贫患者被该项检查漏诊。第一步也有选用MCV和MCH或红细胞脆性结合红细胞指数筛查的，由于MCV和MCH可能出现假性增高，因此这两种筛查方式也可能会出现漏诊[10]。

综上所述，本研究认为，HPLC法是筛查中重型β地贫比较理想的方法。使用MCV和MCH、红细胞脆性或红细胞脆性结合红细胞指数进行地贫筛查，均有可能会漏诊β地贫，因此，临床上地贫筛查时除了使用红细胞参数外，最好也能进行血红蛋白分析。基层医院如果限于条件不能进行血红蛋白分析检测，至少产检人群的标本要送至有条件的医院进行血红蛋白分析；产检以外的人群可以在基层医院用红细胞脆性或红细胞脆性结合红细胞指数进行地贫筛查，但筛查的结果如为阴性的话，要告知患者此方法可能存在少数漏诊，如果孕育下一代时一定要到有条件的医院进行再进行地贫筛查，以避免中重度β地贫患儿的出生。

参考文献

1 黄玉莹，郭柳薇.中重型β地中海贫血的血液学分析[J].中国实用医药，2009，4（26）：99-101.

2 方建培，许吕宏.规范儿童重型β地中海贫血的诊治[J].中华儿科杂志，2010，48（3）：166-168.

3 王以婷，张静，王燕英，等.血液学筛查指标在不同年龄组地中海贫血的诊断价值评价[J].中国妇幼保健，2011，26（3）：4939-4940.

4 张伟红，巫小莉，陈英姿.高血糖引起假性MCV和RDW增高的相关探讨[J].现代医院，2007，7（8）：67-69.

5 程翔，乐家新，郝晓柯.血浆渗透压升高对不同类型血细胞分析仪MCV测定结果的影响[J].中国误诊学杂志，2010，10（8）：1776-1778.

6 宗寿洋.平均红细胞血红蛋白含量（MCH）假性增高39例的原因分析与纠正[J].现代检验医学杂志，2013，28（5）：117-118.

7 麦凤鸣，颜双鲤.地中海贫血筛查指标的分析评价[J].中华全科医学，2013，11（3）：387-389.

8 李长钢.地中海贫血临床诊治中存在的问题[J].临床儿科杂志，2009，27（8）：716-717.

9 韦政源，陈小飞，梁贵国.象州县5596例免费婚前保健对象地贫筛查结果分析[J].求医问药，2012，10（9）：395-396.

10 陈洁，易伟莲，吴显劲，等.湛江地区720例地中海贫血筛查结果分析[J].中国热带医学，2013，13（9）：1157-1158.