胃癌血清骨桥蛋白测定的临床意义

【摘要】 目的 探讨血清OPN测定对胃癌诊断及预后判断的临床意义。方法 用酶联免疫吸附法测定胃癌术前患者60例、胃溃疡患者60例、健康体检者60例外周血清OPN含量；比较分析胃癌患者血清OPN水平改变。结果 胃癌组、胃溃疡组和健康对照组的血清OPN浓度分别为：(114．2±68．7)ng/ml、(67．3±29．8)ng/ml、(29．5±17．0)ng/ml，经统计学处理，胃癌组血清OPN浓度明显高于胃溃疡组及健康对照组(F=10．663，P0．05)，血清OPN水平与远处转移呈正相关(t=3．14，P

【关键词】 胃癌；骨桥蛋白；酶联免疫吸附法

胃癌是常见的恶性肿瘤之一，死亡率高，而用于胃癌筛查及早期诊断的有效手段不多，血清标志物是胃癌诊断研究的方向。骨桥蛋白(osteopontin，OPN)是一种分泌型细胞外基质蛋白，在肿瘤的发生发展、浸润、转移中起重要作用［1］。本文探讨血清骨桥蛋白是否适用于胃癌的早期筛选诊断及预后判断。

1 资料与方法

1．1 临床资料 2006年7月至2007年1月湘雅医院外科胃癌住院患者60例。其中男性47例，女性13例，年龄26～76岁，平均年龄(50．47±13．18)岁。术前未接受过手术，放疗，化疗，术后经病理诊断证实，其中胃癌Ⅰ期5例，Ⅱ期8例，Ⅲ期22例，Ⅳ期25例。胃溃疡患者60例，其中男性36例，女性24例，年龄31～60岁，平均年龄(49．88±15．65)岁，来自于同期湘雅医院接受胃镜检查及病理检查者；健康体检者60例，其中男性36例，女性24例，年龄31～60岁，平均年龄(40．00±11．27)岁，作为对照。3组年龄差异无统计学意义(P>0．1)。胃溃疡患者及健康体检者无肿瘤家族史，所有患者均排除肾结石、严重心血管疾病、骨骼系统等疾病。胃溃疡患者及健康体检者均经病理确诊。胃癌患者术前、胃溃疡患者和健康体检者于胃镜检查前清晨空腹抽取静脉血3 ml于促凝管中，自然静置1 h，用2 400 r/min 4℃离心10 min后，小心吸取血清置0．5 ml离心管按0．3 ml/支的量分装，保存于-20℃冰箱备用。

1．2 试剂和仪器 人OPN ETA试剂盒购自美国R&D systems公司，自动酶标仪Model 680由美国Bio RAD公司生产。

1．3 人骨桥蛋白浓度的测定 采用酶联免疫吸附法(ELISA法)，严格按照说明书进行操作。应用自动酶标仪，以450 nm/540 nm波长下读取吸光度值，根据标准曲线得出OPN浓度，实验中所有样品及标准品均双份检测。

1．4 统计学处理 采用 SPSS10．0 for Windows统计软件。计量资料采用方差分析、t检验。

2 结果

2．1血清OPN浓度以胃癌组最高，健康体检组最低，经统计学处理，胃癌组血清OPN浓度明显高于胃溃疡及健康体检组(F=10．663，P0．05)，见表1。

2．2 血清OPN浓度与胃癌不同临床病理特征的关系 分别比较了病理类型、有无远处转移、有无淋巴结转移、pTNM分期等不同临床特征组别的血清OPN水平是否存在差异，其中血清OPN水平与远处转移呈正相关(t=3．14，P

3 讨论

OPN是一种具有多种功能的分泌型细胞外基质蛋白，在人类许多肿瘤中可被检测到，与肿瘤进展、复发甚至预后显著相关［2］。近年来有研究报道，外周血中OPN水平可用于预测肿瘤复发或预后。Le等［3］研究显示头颈肿瘤患者血浆OPN升高与临床预后相关，较高的血清OPN水平往往导致较高的近期内复发风险和较差的预后，并且是无瘤生存与生存期预测的独立指标，提出了把测量血清OPN作为一种无创性判断肿瘤患者预后的方法的可能性。Van Heek 等［4］对乳腺癌患者研究，发现已播散癌症病人血清中OPN浓度升高，其生存期较短，转移灶数目较多，并以Affymefrix人类基因组U133标记基因分析235例基因片段，认为血清OPN测定优于基因片段分析，血清OPN测定可作为恶性疾病筛查指标之一。

孙现军［5］等报道外周血浆OPN浓度与胃癌分期、最大直径、淋巴结转移程度及有无远处转移关系密切，胃癌分期越晚、直径越大、淋巴结转移程度越高，患者外周血OPN浓度越高。以OPN浓度222．6 ng/ml为临界值，将66例胃癌患者分为OPN>222．6 ng/ml组(20例)和

OPN广泛存在于消化道，胃黏膜表面的上皮细胞外基质层及黏液细胞中的粘蛋白颗粒和酶原颗粒可分泌OPN［7］，故胃溃疡患者与健康体检者的血清OPN水平可检测到，而其血清OPN水平低于胃癌患者，说明胃癌细胞OPN分泌过多，两者产生的活性不一样，有认为机体产生的OPN具有抗肿瘤的作用，而肿瘤细胞自身分泌的OPN具有促进肿瘤生长和发展的生物学活性。

张忠等比较了胃癌与不典型增生、肠上皮化生、慢性浅表性胃炎组和正常对照组血清OPN的浓度，发现在胃癌发生发展过程中，血清OPN水平在癌前期各阶段降低，癌形成阶段呈进行性升高趋势；其对胃癌的诊断及鉴别诊断具有较高的临床应用价值。本文比较胃癌患者与胃溃疡患者、健康体检者的血清OPN水平，获得类似结果，胃癌的血清OPN水平显著高于胃溃疡及健康对照者，提示其可作为胃癌筛选诊断及与胃溃疡相鉴别的辅助诊断指标。高水平的血清OPN浓度，意味着胃癌的可能性大，因此血清OPN水平的检测，有利于高危人群的甄别，对于确诊的病人，动态观察血清OPN水平的变化，可作为预后或疗效观察的指标，但需大量样本进一步验证。由于血清OPN测定方法经济、简便、易接受，本研究结果提示其可作为胃癌筛查诊断的参考指标之一，也可作为胃癌的预后判断指标之一。

参考文献

1 Rittling SR，Chambers AF.Role of osteopontin in tumour progression.Br J Cancer，2004，90:1877-1881.

2 Gotch M，Sakamoto M，Kanetaka K，et al.Overexpression of osteopontin in hepatocellular carcinoma.Pathol Int,2002，52:19-24.

3 Le QT，Sutphin PD，Taychaudhuri S，et al.Identification of osteopontin as a prognostic plasmamarker for head and neck squamous cell carcinomas.Clin Cancer Res，2003，9:59-67.

4 Van Heek NT，Maitra A，Koopmann J，et al.Gene expression profiling identifies markers of ampullary adenocarcinoma.Cancer Biol Ther，2004，3:651-656.

5 孙现军，张毅，侯文红，等.胃癌患者外周血骨桥蛋白的检测及临床意义.山东医药，2004，44(24)：44-45.

6 Malyankar UM，Scatena M，Suchland KL，et al.Osteoprotegerin is an alpha v beta 3-induced，NF-kappa B-dependent survival factor for endothelial cells.J Biol Chem，2000，275:20959-20962.

7 Qu Hong，Brown LF，Dvorak HF，et al.Ultrastructural immunogold localization in human gastric mucosa.J Histochem Cytochem，1997，45(1):21.

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