Livin和Caspase―3在胃癌组织中的表达及其意义

摘要：目的 探讨Livin和Caspase-3在胃癌组织细胞中的表达及临床意义。方法 用免疫组化法检测75例胃癌组织和36例癌旁正常组织细胞中Livin、Caspase-3蛋白的表达情况。结果 ①Livin蛋白在胃癌组织中的表达率（76.7）高于癌旁正常组织（14.3）；Caspase-3蛋白在胃癌组织中的表达率（17.3）低于癌旁正常组织（74.3），均具有统计学意义（P

关键词：胃癌；细胞凋亡；Livin；Caspase-3；免疫组织化学

Abstract：Objective To evaluate expression of Livin and Caspase-3 in human gastric carcinoma. Methods Immunohistochemical staining was applied to detect the expression of Livin and Caspase-3 in 75 cases of gastric carcinoma tissues and 36 cases of adjacent normal gastric mucosa. Results ①Livin protein positive expression rates（78.7） in the gastric carcinoma tissues were higher than the adjacent normal gastricmucosa （14.3）（P

Key words：Gastic carcinoma；Apoptosis； Livin； Caspase-3； Immunohistoehemlstry

胃癌是我国最常见的消化道恶性肿瘤之一，其死亡率位居恶性肿瘤第1位。胃癌的形成与机体内凋亡调控机制紊乱有关。Livin是凋亡抑制蛋白IAP家族成员， 在大多数恶性肿瘤中高表达，起到抑制细胞凋亡的作用[1]。Caspase-3是caspase家族蛋白酶级联反应的核心蛋白，是细胞凋亡的重要蛋白酶，它的表达降低、失活与许多肿瘤的发生密切相关[2] 。我们采用免疫组化Elivison二步法，检测Livin、Caspase-3蛋白胃癌组织细胞、癌旁正常组织细胞的表达情况，探讨Livin低表达和Caspase-3高表达参与了胃癌的发生、分化和淋巴结转移。

1资料与方法

1.1一般资料 2004～2006年，银川市第一人民医院，术后经病理证实为胃腺癌，资料完整的石蜡标本75例，男性50例，女性25例；年龄37～76岁；高分化 32例，低分化 43例；51例淋巴结转移， 24例未转移者，Ⅰ期7例，Ⅱ期26例，Ⅲ期38例，Ⅳ期4例。另取病理证实癌旁正常组织36例。

1.2实验试剂 Livin、Caspase-3试剂由北京中杉有限公司提供， DAB显色剂、Elivison二步法试剂盒，由福州迈新生物技术有限公司提供。

1.3实验方法 免疫组化Elivison二步法检测，操作步骤按照说明书进行。用磷酸盐缓冲液（PBS）代替一抗作阴性对照。两种蛋白主要在细胞浆着色，判断的标准参照文献[3]。

1.4统计学分析 采用 SPSS13.0版软件包，组间比较用？字2检验；各指标之间的相关性分析Spearman检验；P

2结果

2.1胃癌组织细胞、癌旁正常组织细胞中Livin、Caspase-3蛋白的表达 Livin在两种组织中的阳性表达率分别为 78.7%（59/75）、14.3%（5/35），差异有统计学意义（P

2.2Livin、 Caspase-3蛋白在胃癌组织中的表达与临床病理因素的关系 Livin、Caspase-3蛋白的表达率与淋巴结转移、组织细胞分化程度有（P

2.3Livin、Caspase-3蛋白表达的相关性 Livin与caspase- 3的表达呈显著负相关，r=-0.421，P

3讨论

Livin是IAPs家族的最新成员，与已发现的凋亡家族成员一样，其过度表达能够不同程度抑制细胞凋亡，在肿瘤的发生过程中，发挥其重要作用。Caspase-3 是Caspase家族的核心蛋白酶，在细胞凋亡过程中起着关键性的作用，也是近年来研究的与肿瘤发生发展密切相关的、较为深入的凋亡相关基因。

Livin的抗凋亡活性主要依赖其半胱氨酸组氨酸的杆状病毒IAP重复区（BIR）结构域，BIR结构域是结合并抑制 Caspase-3的关键部位，抑制其活性，促进细胞凋亡过程。已有大量的研究，Livin在多种肿瘤组织细胞中高表达。Hariu等[4]采用RT-PCR方法，检测原发性肺癌组织、肺癌细胞株中Livin 的表达异常，而正常肺组织中Livin 未表达。侯毅鞠等[5]研究发现，胃癌组织中，Livin 蛋白高表达于正常黏膜组织，与肿瘤组织的分化程度、细胞的浸润深度、淋巴结转移的表达差异间有统计学意义（P

Caspase-3是半胱氨酸蛋白酶Caspase级联反应中关键的效应酶，是细胞凋亡的效应分子，在整个凋亡途径中起者重要的作用[6]。寇有为等[7]用免疫组化法检测胃癌组织细胞中低表达Caspase-3，且Caspase-3 阳性表达率与肿瘤的淋巴转移、病理分化程度以及临床分期有显著性差异（P

本研究分析发现Livin和Caspase-3表达有负相关性，从实验结果看，胃癌组织中Livin在细胞凋亡中起到负性调节的作用，Caspase-3起到正性调节的作用，二者均参与了细胞凋亡过程，其作用相反，提示：在胃癌的恶性转化过程中，Livin和Caspase-3的异常变化起了重要作用。

参考文献：

[1]Kasof G M， Comes B C. Livin， a novel inhibitor of apoptosis protein family member[J]. J Biol Chem，2001，102（1）：3238-3246.

[2]Meggiato T， Calabrese F， De Cesare CM， et al. C-JUN and CPP32 （caspase-3） in human pancreatic cancer： relation to cell proliferation and death [J].Pancreas，2003，26：65.

[3]许良中，杨文涛.免疫组织化学反应结果的判定标准[J].中国癌症杂志，1996，6（4）：229-231.

[4]Hariu H，Hirohashi Y， Torigoe T， et al. Aberrant expression and potency as a cancer inununotherapy target of inhlbitor of apoptosis protein family，Livi/ML-IAP in lung cancer[J]. Clin Cancer Res，2005，11：1000-1009.

[5]侯毅鞠，李艳，袁忠海，等.凋亡抑制蛋白Livin 在胃癌及癌旁组织中的表达[J].世界华人消化杂志，2010，18（12）：1196-1200.

[6]Meggiato T， Calabrese F， De Cesare CM，et al. C-jun and cpp32（caspase-3） in human pancreatic cancer： relation to cell proliferation and death[J]. Pancreas，2003，26（1）：65-70.

[7]寇有为，王强.XIAP 、caspase- 3 在胃癌中表达及其相关性[J].中国现代医学杂志，2011，21（28）：3490-3494.