防己茯苓汤抗炎镇痛作用的实验研究

摘要：目的：研究防己茯苓汤的抗炎镇痛作用。方法：采用热板法、醋酸扭体法镇痛实验模型，二甲苯致小鼠耳肿胀、大鼠毛细血管通透性、大鼠棉球内芽肿、大鼠蛋清性关节炎、大鼠炎性组织中PGE2含量等炎症模型，研究防己茯苓汤的抗炎镇痛作用。结果：动物实验表明防己茯苓汤对二甲苯、蛋清所致急性炎症有明显抑制作用。能降低大鼠的毛细血管通透性，抑制棉球肉芽肿增生，提高小鼠痛阈值，减少醋酸所致小鼠扭体次数，并能显著降低炎症组织中PGE2的含量。结论：将防己茯苓汤用于抗炎镇痛作用的研究，发现其确有明显的抗炎镇痛作用，并能显著降低炎症组织中PGE2的含量。

关键词：防己茯苓汤；抗炎；镇痛

中图分类号：R285.5

文献标识码：A 　文章编号：1673-7717(2007)12-2489-03

防己茯苓汤是《金匮要略》中治疗水肿的有名经方，由防己9g、黄芪9g、桂枝9g、茯苓188、甘草6g组成，具有益气、健脾、利水的功效。临床用于治疗水肿、慢性充血性心力衰竭、房颤、痛风性关节炎等。但目前该方抗炎镇痛的报道较少。本文根据该方特点对该方的抗炎镇痛作用进行实验研究，以探讨防已茯苓汤治疗风湿性疾病的药理学基础。

1.材料与方法

1.1实验动物

SD纯种大鼠，雌雄兼用，体重170～250g；昆明种小鼠，雌雄兼用，体重(20±2)g，均由天津中医药大学实验动物中心提供。

1.2仪器与试剂

FA2004A型电子天平(上海精天电子仪器有限公司)，HH-601超级恒温水浴(金坛市金城国胜实验仪器厂)，XMT-921A远红外恒温干燥箱(天津市华北实验仪器有限公司)，712分光光度计，754-紫外分光光度计。

1.3药品与试剂

防已、茯苓、桂枝、黄芪、甘草(由天津中医药大学中药标本馆提供)，1％伊文斯蓝，100％二甲苯，0.6％醋酸溶液，吗啡，安痛定。生理盐水，乙醚，新鲜鸡蛋清，组胺，1％角叉菜胶，甲醇，0.5mol/L KOH-甲醇溶液。

1.4镇痛实验

1.4.1热板法实验　取雌性小鼠，随机分5组，每组10只，分别腹腔注射生理盐水(10mL/kg)、吗啡(0.01g/kg)、防己茯苓汤(2、4、6g/Kg)，测量给药后15、30min小鼠的痛阈值。

1.4.2醋酸扭体法实验　取小鼠50只，雌雄各半。分别灌胃生理盐水(10mL/kg)、安痛定(10mg/kg)、防己茯苓汤(2、4、6g/kg)。给药后1h于腹腔注射0.6％冰醋酸0.1mL/1Dg，记录注射15min内每只小鼠的扭体反应次数。组体指标参照文献。

1.5抗炎实验

1.5.1二甲苯致小鼠耳肿胀实验　取小鼠50只，雌雄不拘，随机分5组，每组10只，分别灌胃给药生理盐水(10mL/kg)、可的松(O.1g/kg)、防己茯苓汤(2、4、6g/kg)给药1h后，用二甲苯(0.06mL/只)涂于小鼠右耳致炎，30min后处死小鼠，剪下双耳，用直径为8mm圆型打孔器取下双耳对称处的耳片称重。以两耳片重量差作为肿胀度，计算各组抑制率。

1.5.2大鼠棉球内芽肿实验　取SD大鼠50只，雌雄各半，随机分5组，每组10只。参照文献方法造模，乙醚麻醉后，于两侧腹部皮下各植入30mg重的灭菌棉球1个。术后次日开始灌胃给药，给药剂量同1.5.1，每天给药1次，8天后处死动物，剥离棉球肉芽组织，烘干称重，减去原棉球的重量，净得肉芽重量。

1.5.3大鼠蛋清性足肿胀实验　取SD大鼠50只，雌雄各半，随机分为5组，每组10只，给药剂量同1.5.1，灌胃给药8天，于末次给药后lh将鲜蛋清注入大鼠(0.1mL/只)右踝关节皮下，用卡尺在3h后测量踝关节周长之差为指标，计算肿胀程度。

1.5.4大鼠毛细血管通透性实验　取SD大鼠50只，随机分5组，每组10只，给药同1.5.1。给药2h后，每只鼠背部皮下注射200mg组胺，并于鼠尾静脉注射1％Evans蓝0.4mL/100g，30min后，断头处死大鼠，剥皮测着色皮斑面积，然后，用712-分光光度计测定吸收度(波长610nm)。

1.5.5大鼠炎性组织中PGE含量实验　取SD大鼠50只，分组、给药同1.5.1。于给药0.5h后，在右后足跖皮下注射1％角叉菜胶0.1mL，造成炎症，5h后处死大鼠，剪下炎性肿胀足，用生理盐水浸泡1h，取出足爪，离心浸泡液，吸取上清液0.1mL，加0.5moL/L KOH-甲醇溶液2mL，在50度下异构化20min，用甲醇稀释至20mL，用754紫外分光光度计测定密度(OD)值。

1.6数据处理

实验数据采用x±s。表示，两样本均数比较用t检验，多样本均数比较用单因素方差分析，如有统计学意义采用两两比较q检验，数据用SAS 6.0软件进行处理，P

2.结果

2.1对小鼠痛阈值的影响(热板法)

结果表明，防己茯苓汤组和吗啡组均有一定的镇痛作用；其中以防己茯苓汤3组30min和吗啡组15min及30min的镇痛作用较为明显。结果见表1。

2.2对醋酸所致小鼠扭体反应的影响

结果表明，各治疗组均能不同程度地减少小鼠的扭体次数，对醋酸所致小鼠扭体反应均有明显抑制作用，结果见表2。

2.3防己茯苓汤对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响

结果表明，各实验组均能不同程度地抑制二甲苯所致小鼠耳肿胀，其中可的松组和防己茯苓汤3组作用比较明显，结果见表3。

2.4防己茯苓汤对大鼠棉球肉芽肿组织增生的影响

结果表明，防己茯苓汤2组、3组对大鼠棉球性肉芽肿有明显的抑制作用，P

2.5防己茯苓汤对大鼠蛋清性关节炎的影响

结果表明，可的松组、防己茯苓汤2组、3组均能不同程度地抑制鸡蛋清所致大鼠关节肿胀，以防己茯苓汤3组作用最强，防己茯苓汤3组、可的松组均有显著性差异，结果防己茯苓汤对大鼠蛋清性关节炎有明显的抑制作用，P

2.6 防己茯苓汤对大鼠毛细血管通透性的影响

结果表明。可的松组、防己茯苓汤2组、3组均有不同程度降低毛细血管通透性的作用，防己茯苓汤2组、3组没有显著性差异。结果见表6。

2.7 防己茯苓汤对大鼠炎性组织中PGE2含量的影响

结果表明，可的松组、防己茯苓汤组均有不同程度减少大鼠炎性组织PGE2的含量的作用，防己茯苓汤能明显减少大鼠炎性组织PGE2的含量P

3.讨论

本实验结果表明，防己茯苓汤有明显的抗炎作用，对二甲苯、蛋清所致急性炎症有明显抑制作用，能降低大鼠的毛细血管通透性，抑制棉球肉芽肿增生；在镇痛方面采用小鼠因热刺激致痛，明显提高小鼠痛阈值，减少醋酸所致小鼠扭体次数，并能显著降低炎症组织中PGE2的含量。

防己茯苓汤用于抗炎镇痛作用的研究，发现其确有明显的抗炎镇痛作用。并能显著降低炎症组织中PGE2的含量。防己茯苓汤镇痛作用可能既有外周作用又有中枢作用，其外周作用与抑制PGE2的合成和释放有关；防己茯苓汤对热板法较为敏感，顾亦有中枢作用。其抗炎作用可能与抑制炎症反应是前列腺素(PG)等致炎物的合成或释放有关，也不排除其抗炎作用有赖于垂体一肾上腺系统。防己茯苓汤的抗炎镇痛作用可能是该方临床治疗风湿性和类风湿性关节炎的药理学基础之一。