不同铁皮枫斗饮片中六六六、滴滴涕含量测定

铁皮枫斗是石斛的一种．石斛分为铁皮、霍山、金钗、环草、黄草、马鞭等品种， 以铁皮石斛最为珍稀。被道家称为中华九大仙草之首。《本草纲目》称它有强阴益精、厚肠胃、补内绝不足、轻身延年的功效,铁皮枫斗晶是以铁皮枫斗为主要原料制成的中药产品［1］。

有机氯农药六六六(HCH)和滴滴涕因其所具有的毒性持久性、易于在生物体内聚集和长距离迁移的特性，被列入国际首批受控的12种持久性染物的有机物(POPs)之内［2］。由于其残留期长，易引起人体肝组织损伤，且有致癌性，严重威胁人体健康，因此是重要的检测对象。由于气相色谱法具有选择性高［3］，分离效果好、灵敏度高、分析速度快等特点而被广泛应用。

用气相色谱法测定茶叶［4］、土壤［5］和水［6］中的六六六和滴滴涕残留，由于8种单体间沸点比较接近需要程序升温等才能很好的分离。为此，我们建立了铁皮枫斗饮片中有机氯农药六六六、滴滴涕测定的简便有效方法，为安全可控使用该饮片提供科学依据。

1材料与方法

1.1仪器

美国安捷伦GC-6890N气相色谱仪，电子捕获检测器。色谱柱：JW公司DB1701毛细管柱，柱长30m；内径320μm;液膜厚度0.25μm.。电子天平，超速离心机，超声波清洗机。

1.2仪器条件

进样口温为50 ℃；分流比为5∶1，15.0 psi；柱温为210℃，柱流量为2.0 mL/min；检测器为250℃，载气（N2）流量为20 mL/min，尾吹为60 mL/min。

1.3试剂

所有试剂均为分析纯，实验用水为重蒸馏水。农药标准品六六六(BHC)和滴滴涕(DDT)各异构体α-BHC、β-BHC、γ-BHC、δ-BHC、PP'-DDE、PP -DDD、op'-DDT、PP'-DDT由国家标准物质中心提供，浓度均为100 mg/L。

1.4方法

采用不同批次的铁皮枫斗饮片：3个液体样品，4个片剂样品。称取2g粉碎样品或液体样品于50 mL具塞三角瓶中，加20 mL丙酮，超声提取30 min，过滤于100 mL分液漏斗中，残渣用丙酮洗涤4次，每次5 mL,洗液并入分液漏斗中，加石油醚20 mL，振荡数次，放气。加20 mL硫酸钠溶液(20 g/L)，振摇1 min，静置分层，弃去下层水溶液。用滤纸擦干分液漏斗颈内外的水，然后将石油醚液缓缓放出，经盛有约10 g无水硫酸钠的漏斗，滤入50 mL三角瓶中。再以少量石油醚分3次洗涤原分液漏斗、滤纸和漏斗，洗液并入滤液中，将石油醚浓缩，移入10 mL具塞试管中，定容至5.0 mL, 加入0.5 mL浓硫酸净化，振摇0.5 min，于3000 r/min，离心10 min，吸取上层清液5 μL进样，按回归方程计算含量。

2结果与讨论

2.1标准曲线

分别取α-BHC、γ-BHC、δ-BHC各1 mL 和 β-BHC、PP'-DDE、PP -DDD、op'-DDT、PP'-DDT各2 mL标准溶液于100 mL容量瓶中，用正己烷配成混合标准储备液，吸取储备液，用正己烷稀释成不同浓度梯度的混合标准使用液。

2.2色谱峰鉴定

各种单体的保留时间分别为(min) α-BHC 3.250、β-BHC 5.446、γ-BHC 3.874、δ-BHC 6.206、PP'-DDE 8.901、PP DDD 14.355、op'-DDT 11.640、PP'-DDT 15.838根据其保留时间定性。从图1中可以看出，标准样品的图谱六六六、DDT分离效果好，分离时间短，在20 min内，整个过程保持恒温恒压，不需要程序升温。

2.3线性试验

取标准系列（5、10、20、40 μg/L）按上述色谱条件进样,进样量5μL,每种浓度进样6次。以峰面积y 对浓度x (μg/L) 进行线性回归分析。相关系数和最小检测浓度(S/ N＝3)见表1。

2.4精密度及回收率实验

在样品3中加入一定量的标准溶液，于同样的色谱条件下进行加样回收率实验，重复测定6次，计算相对标准偏差和回收率，结果见表2。表2显示，样品的峰面积折算成浓度后，浓度的相对标准偏差（RSD）范围为0.89％～2.07％。表明仪器系统稳定性好，测定精密度高，8种样品的回收率测定结果除了pp-DDD和pp-DDT 为93.00％外，其余都在100.00%，可见本实验方法测定的准确性好。

从表3看，样品含量大部分在之40 μg/L内，而该方法在此浓度范围内有极显著的线性关系见表1。样品（4～7）中有DDT检出，虽未超过国家标准中食品的含量标准(100 μg/L)，但这也说明铁皮枫斗饮片质量检测非常必要。

本实验建立了毛细管气相色谱法测定铁皮枫斗饮片中的有机氯农药六六六、DDT的方法，采用有机溶剂提取，经液液分配及浓硫酸净化，柱层析净化除去干扰物质，用电子捕获检测器(ECD)恒温检测农药残留量的分析，根据色谱峰的保留时间定性，外标法定量。此方法简便，结果准确、可靠，重现性好，可以作为铁皮枫斗饮片六六六、DDT农药残留的测定方法，以及其他食品中六六六、DDT农药残留含量测定。

4参考文献

［1］徐建华，李莉，陈立钻.铁皮石斛与西洋参的养阴生津作用研究［J］．中草药，1995，26(2)：79.

［2］史雅娟，吕永龙，任鸿昌，等．持续性有机污染物研究的国际发展动态［J］．世界科技发展动态，2003, 25(2)：73-78.

［3］GB/5009.19-2003. 食品中六六六、滴滴涕残留量的测定方法［S］．

［4］张秀莲, 叶艺娟．河源市茶叶中六六六、滴滴涕残留量的监测分析［J］．现代预防医学，2007，34(9): 1782.

［5］周含英，黄益鸿，王盛才．微波萃取－气相色谱法测定土壤中的六六六、滴滴涕［J］．光谱实验室，2007，24(2): 236-238.

［6］钱素芬，周继红. 毛细管程序升温气相色谱法测定水中的六六六、滴滴涕［J］．理化检验化学分册，2003，39(11): 679.

(收稿日期：0007-12-18)