HPLC测定中药萝芙木中育亨宾的含量

摘要: 采用HPLC法测定中药萝芙木中育亨宾的含量.色谱条件：C18（5 μm,14.6 mm×150 mm）色谱柱，以甲醇:水（0.004 mol/L二乙胺）=（65∶35）为流动相，检测波长278 nm.结果表明：育亨宾在0.512～2.56 μg质量范围内与峰面积呈良好的线性关系（r=0.999 8），平均回收率为95.52%，相对标准方差RSD= 1.18%（n=10）.本法简便、快速，准确可靠，可用于中药萝芙木的质量控制.

关键词: HPLC；育亨宾；萝芙木

中图分类号:R2841 文献标识码:A 文章编号:1672-8513(2010)02-0137-03

Determination of Yohimbinein in Rauvolfia with HPLC

[KH*2]LONG Yunhui 1,TIAN Xuejun 2,Huang Zhaolong 1

(1.College of Science，Honghe University，Mengzi 661100，China；2.College of Life Science and Technology，Honghe University，Mengzi 661100，China)

Abstract: The research adopts a new method for analyzing the ingredients of Yohimbine in Rauvolfia by using High Performance Liquid Chromatography(HPLC) in which the chromatographic system consisted of C18 column and the mobile phase of Methanol water(0.004 mol/L 1,2-ethylenediamine)(65∶35).The detection wavelength was set at 278 nm. The results showed that there was a good linear of reserpine over the range of 0.512-2.56 μg (r=0.999 8).The average recovery was 95.52% and RSD was 1.18%(n=10). It is concluded that this method can be used for quality control in Luofumu because it is simple, accurate and reliable.

Key words: HPLC；Yohimbine；Rauvolfia

萝芙木属植物为夹竹桃科多年生常绿灌木，在云南主要分布在西双版纳、思茅、红河等地.萝芙木属植物中含利血平、育享宾、萝莱酮、罗芙木甲素、山马蹄碱等［1-2］.育亨宾为吲哚类生物碱［3］，广泛应用于治疗因紧张、压力以及疲劳引起的紊乱.罗芙木的质量与育亨宾的含量高低有着密切联系，但育亨宾的测定方法报道较少［3-5］.现代高效液相色谱(HPLC)技术与其它分析技术相比，具有高效、准确、灵敏度高、重复性好、操作方便、使用范围广等优点，近年来常用于活性成分复杂、含量低的植物药研究［5-10］.本研究采用HPLC法测定中药材萝芙木中育亨宾的含量，为中药材罗芙木的质量控制提供简便、快速、准确可靠的方法.红河州绿春县对罗芙木、云南罗芙木2种野生罗芙木属的植物进行驯化，并建立种植基地，本研究也为确定驯化的萝芙木是否具备开发利用价值，提供理论依据.

1 实验操作

1.1 仪器与药品

回流装置，旋转蒸发仪，Agilent 1100高效液相色谱仪，育亨宾标准品（Sigma公司），甲醇（色谱纯），二乙胺（分析纯）.

1.2 色谱条件

色谱拄：Eclipse XDB－C18（5 μm，4.6 mm×150 mm），流动相：甲醇∶水（0.004 mol/L二乙胺）=（65∶35），流速：1.0 mL/min，检测波长：278 nm，柱温：32 ℃.

1.3 方法与结果

1.3.1 对照品试液

精密称取0.006 40 g育亨宾标准品，用甲醇定容于25 mL容量品中，摇匀，备用.

1.3.2 样品溶液制备

原植物采自绿春县，定植于红河学院大棚内，2年生.取鲜活根茎，用刀切碎，分别制备为供试茎、根样液.取碎样5～6 g，加5 mL 10%氨水拌湿，置30 min；加45 mL氯仿于56 ℃回流1 h，重复1次，合并2次滤液，蒸干，加5 mL 10%醋酸溶解残渣，滤过，滤液加10%氨水调pH至9；加10 mL氯仿于56 ℃回流1 h，蒸发浓缩后，用甲醇定容至50 mL，备用.

1.3.3 标准曲线的绘制

取对照品试液按照上述色谱条件分别进样2，4，6，8，10 μL，以峰面积(Y) 为纵坐标, 标准品含量 (X) 为横坐标进行线性回归,得回归方程为: Y=22.57+119.71X，r =0.999 8,线性范围0.512~2.56 μg.

1.3.4 重现性

取对照品溶液重复进样10次，每次进样10 μL，测得育亨宾峰面积的相对标准偏差（RSD）为0.58%，重现性良好.

1.3.5 回收率实验

精确移取供试液各2 mL，分别加入准确质量的对照品，按上述方法测定育亨宾含量，得平均回收率为95.52%.

1.3.6 样品测定

取按1.3.2制备的云南萝芙木茎、根和萝芙木茎、根样品溶液，各进样10 μL，分别得到色谱图，如图1~5.

通过测定，样品中育亨宾的含量分别为：云南萝芙木茎（0.317 1 mg/g），云南萝芙木根（0.412 3 mg/g），萝芙木茎（0.581 7 mg/g），萝芙木根（0.601 6 mg/g）.

2 结语

1）本法简便、快速，分离效果好，样品峰无拖尾，方法准确可靠，可用于中药萝芙木的质量控制.

2）供试样品根中育亨宾的含量均高于其茎中的含量，且萝芙木中育亨宾含量高于云南萝芙木的.红河州绿春县驯化的罗芙木、云南罗芙木具有较高的开发利用价值.

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收稿日期:2009-11-04.

作者简介:龙云惠（1974-）,女,讲师.主要研究方向：分析化学.