血清HBeAg P/C值检测的临床应用价值

作者：孟运运 许家璋 杨志国 鞠九龙 【关键词】 乙肝病毒

【摘要】 目的 探讨血清HBeAg P/C值与HBV载量的关系及其临床应用价值。方法 对755例HBeAg阳性患者的血清HBeAg P/C值和HBV DNA定量检测进行比较。结果 HBeAg P/C值各组HBV DNA>5×10 2 拷贝/ml检出率差异无显著性（P>0.05），HBeAg P/C值与HBV DNA>10 7拷贝/ml，HBV DNA10 5-7 拷贝/ml以及HBV DNA<10 5 的检出率之间均不呈正相关关系（等级相关系数r分别为0.105，0.147和0.60，P值均>0.05）.结论 以ELISA一步法检测血清HBeAg，其P/C值与HBV载量之间不呈平行正相关关系;HBeAg P/C值可能不能客观反映血清中HBeAg实际水平，因而也不能准确反映HBV的复制水平;以HBeAg P/C值作为临床判断HBV复制程度的参考指标意义不大。

长期以来，乙肝病毒（HBV）血清免疫标志物检测是临床诊断和分析HBV感染状况以及疗效判定的重要参考指标之一。血清乙肝病毒e抗原（HBeAg）水平对于临床判断HBV复制程度以及疾病进程具有重要作用。目前大多数实验室普遍采用ELISA一步法检测HBeAg，部分实验室以P/C值半定量方式报道检测结果。近年来，随着荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）技术的临床应用，可以直接准确地测定血清中HBV载量，这对于进一步研究HBV在体内的复制以及动态监测血清HBV水平着十分重要的作用。为探讨血清HBeAg P/C值与HBV载量的关系以及临床应用价值，笔者对755例血清HBeAg阳性患者的血清HBeAg P/C值和HBV DNA定量检测结果进行了比较分析，其结果报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 755例均系2002年5月～2003年12月在 本研究所就诊或住院的患者。均同时检测HBV血清标志物5项和HBV DNA，HBeAg均为阳性。

1.2 HBeAg测定方法 血清HBeAg测定采用ELISA一步法，试剂为洛阳华美生物工程公司产品。结果以Cln Bio128C酶标仪（奥地利）测定，按试剂盒说明书计算P/C值（P为样品吸光度值，C为Cut off值）。P/C值>1.05为阳性。.3 HBV DNA测定方法 HBV DNA测定采用荧光定量PCR法，仪器为德国Roche公司的Light Cycler PCR分析仪，HBV DNA荧光定量检测试剂盒为深圳匹基生物工程公司产品，试剂检测的灵敏度为5×10 2 拷贝/ml。

1.4 统计学方法 本组755例HBeAg阳性患者根据其P/C值的大小按组距5由低至高共分为6组。统计分析采用SPSS软件。

2 结果

2.1 755例患者的HBeAg和HBV DNA检测结果 见表1。

表1 HBeAg P/C值与HBV载量的关系 例（略）

755例HBeAg阳性患者的HBeAg P/C值范围在1.12～28.87间。1～6组的HBeAg P/C值分别为3.05、8.18、12.46、17.92、20.91、26.88，基本呈正向等级递增趋势。755例患者中HBV DNA>5×10 2 拷贝/ml者709例（93.91%）。HBeAg1～6的HBV DNA>5×10 2 拷贝/ml检出率比较差异无显著（P>0.05）。HBeAg2、3组的HBV DNA>10 7 拷贝/ml检出率明显高于1、5、6组（P<0.05），HBeAg2、3组的HBVDNA<10 5 拷贝/ml检出率的明显低于1、5、6组（P<0.05），HBeAg6组的HBV DNA10 5-7 拷贝/ml检出率差异无显著性（P>0.05）。HBeAg P/C值与HBV DNA>10 7 拷贝/ml、HBV DNA10 5-7 拷贝/ml以及HBV DNA<10 5 拷贝/ml检出率的等级相关系数分别为0.105、0.147和0.60，P值均>0.05。本组755例HBeAg阳性者中，有46例（6.09%）HBV DNA<5×10 2 拷贝/ml，其HBeAg P/C值范围在1.59～27.70之间，其中P/C值≤10者35例（76.09%），P/C值10～20者9例（19.57%），P/C值>20者2例（4.35%）。

3 讨论

HBeAg是由HBV基因编码产生的可溶性分泌蛋白。血清HBeAg含量反映了病毒的表达水平，也间接反映了病毒的复制水平 ［1］ 。本组资料显示，755例HBeAg阳性患者的HBV DNA>5×10 2 拷贝/ml检出率为93.91%，与一般文献报道的结果相似 ［2，3］ 。表明血清HBeAg确是反映HBV复制的良好指标。本组资料还显示HBeAg1～6组的HBV DNA>5×10 2 拷贝/ml检出率分别为89.16%、95.54%、94.12%、96.0%、95.35%和96.88%，6组检出率之间差异无显著性（P>0.05），表明血清HBeAg阳性时，无论P/C值的大小，HBV多呈复制状态。

由表1可见，HBeAg P/C值与HBV载量之间的关系较为复杂，二者之间并无确切的相关关系。HBeAg6组中的HBV DNA>10 7 拷贝/ml检出率以2、3组最高，分别为61.39%和63.10%，明显高于1、5、6组（P<0.05），4、5、6组的DNA>10 7 拷贝/ml检出率并不随P/C值的增加而升高，反呈明显的下降趋势，分别为52.80%、39.53%和40.63%。HBeAg6组中的HBV DNA<10 5 拷贝/ml检出率以2、3组最低，分别为6.44%和2.14%，明显低于1、5、6组（P<0.05），4、5、6组的HBV DNA<10 5 拷贝/ml检出率则明显升高，分别为8.80%、18.60%、18.75%。HBeAg1～6组的HBV DNA10 5-7 拷贝/ml检出率比较差异无显著性（P>0.05）。以上结果提示血清HBV载量并不随HBeAg P/C值的增大而呈相应的改变。统计结果显示，HBeAg P/C值与HBV>10 7 拷贝/ml、HBV DNA10 5-7 拷贝/ml和HBV DNA<10 5 拷贝/ml检出率的等级相关系数r分别为0.105、0.147和0.60，P值均>0.05，说明HBeAg P/C值与HBV载量之间不存在正相关关系，HBeAg P/C值的大小并不能准确反映HBV载量的高低，这可能与HBV在体内的表达以及HBeAg检测方法的准确性有关。HBV在体内复制的同时也表达包装蛋白。由于HBV的表达和机体免疫反应的强弱受多种因素的影响，免疫学指标与临床现象及病毒载量有可能不完全吻合 ［4，5］ 。此外由于ELISA一步法方法学上存在的特定的 局限性，P/C值和抗原浓度仅在一定范围内呈线性关系 ［6］ ，因此以P/C值可能不能客观反映血清中HBeAg实际水平，因而也不能准确反映HBV的复制水平，对于临床判断HBV复制程度似无应用价值。

本组755例HBeAg阳性患者中有46例HBV DNA<5×10 2 拷贝/ml，其P/C值分布范围较大，在1.59～27.70之间，其中P/C值≤10者35例（76.09%），推测可能与HBV DNA整合于宿主肝细胞基因组或由于基因变异而未能检出有关 ［7］ 。调查还发现46名患者中有29例为服用拉米夫啶抗病毒治疗者，是否与药物的抑制作用有关，尚待进一步证实。以上实验结果表明，以ELISA一步法检测血清HBeAg，其P/C值与HBV载量之间不呈平行正相关关系;HBeAg P/C值可能不能客观反映血清中HBeAg实际水平，因而也不能准确反映HBV的复制水平;以HBeAg P/C值作为临床判断HBV复制程度的参考指标意义不大。为进一步探讨血清HBeAg水平与HBV载量的关系，应在检测方法上有所改进（如全定量检测HBeAg含量）。血清HBeAg表达水平的动态变化与病程进展以及抗病毒疗效的关系也值得进一步的研究。

参考文献

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