浅谈高效液相色谱在蜂王浆药物残留检测中的应用

摘 要：蜂王浆是我国很常见的一种天然保健产品，在国际上也有很高的声誉。但是随着全球化贸易的深入，蜂王浆进口国对于药物残留检测要求越来越高，我国蜂王浆的出口量受到严重的影响，不利于蜂王浆生产企业今后的发展。为了保证蜂王浆的出口量，开始使用高效液相色谱来检测蜂王浆中的药物残留。文中介绍了高效液相色谱的基本原理、特点以及在蜂王浆药物残留检测中的必要性，重点阐述这种检测方式在蜂王浆药物残留检测中的具体应用。

关键词：高效液相色谱 蜂王浆药物残留检测 应用 必要性

一、高效液相色谱的基本原理及特点

（一）高效液相色谱的基本原理

高效液相色谱一般是指高压相层析仪，经常用于生物和化学中，整个检测系统由储液器、色谱柱、检测器以及记录仪等设备组成。样品进入储液器中会被高压泵直接打入检测系统内，样品载入色谱柱内，样品在流动相与固定相内具有不同的分配系数，样品经过反复的吸附和解吸过程，被分离后的液体会色谱柱中流出，检测仪会将分离的信号发送给记录仪，最后将分离的数据以图谱的形式打印出来。

（二）特点

高效液相色谱主要有以下四个特点：一是高压，液体检测物在流经色谱柱时会受到很大的阻力，为了保证检测的正常进行，需要在原本压强基础上加大压强；二是效率高，这也是高效液相色谱最显著的特点。它可以在最短时间内达到最佳的分离效果，相比较其他的分离方式更加高效；三是灵敏度高，检测仪可以对样品进行深度的检测，细微的变化都会被检测出来；四是应用范围广，高效液相色谱凭借自身的优势，现在大部分的有机化合物都通过这种方式检测和分析。

二、高效液相色谱在蜂王浆药物残留检测中的必要性

蜂王浆中包含多种药物，其中有的药物不利于人的身体健康，例如氯霉素、磺胺类、林可胺类以及大环内酯类等常见药物会给人造成一定的副作用。因此现在进口国对于副作用药物的检测十分严格，为了促进出口贸易的健康发展，加强药物残留检测工作刻不容缓。但是氯霉素、磺胺类等药物的结构和性质在本质上都有很大的区别，现今的药物检测仪很难将药物残留检测出来，无法真正实现检测的目标。随着高效液相色谱在各种有机化合物中的广泛应用，现在也开始将这种检测方式引进到蜂王浆药物检测中，利用高效液相色谱本身独特的优势进行药物残留检测工作，给我国整个蜂王浆产品的出口贸易工作创造了良好的条件。

三、高效液相色谱在蜂王浆药物残留检测中的具体应用

（一）氯霉素残留检测

我国早年的公告中就明确指出动物性食品中严禁使用氯霉素，这种药物会给人类的身体健康造成很严重的影响，降低蜂王浆本身的保健功效。传统的气相色谱以及质谱等方式在检测中会出现环境干扰、净化不安全等问题，很难达到检测的要求。针对这种情况，相关的专家首先利用高效液相色谱串联质谱的方式对样品中的药物成分进行净化，再使用高效液相色谱喷雾电离质谱分离净化后的样品。这种检测方式大大提高了样品的回收率。例如采用高效液相色谱串联质谱测定蜂王浆中氯霉素的药物残留，提取1.5μg/kg的样品，样品回收率高达92%，利用固相萃取方式净化样品之后，再使用喷雾电离方式进行分离，回收率会达到90%～110%，在原本的基础上有了很大的提高。这种检测方式在提高检测质量的同时，还提高了样品的回收率，检测成本大幅度降低。

（二）链霉素残留检测

链霉素也是蜂王浆中很常见的一种药物，也是近几年药物残留检测中比较棘手的一个问题。检测人员利用高效液相色谱检测链霉素主要分为以下几个方式：一是利用荧光检测仪检测样品，每个样品的检测的时间比较短，但要增加样品检测的数量，满足实际检测工作的需要；二是在检测之前用磷酸提取液溶解蜂王浆样品，联合柱后衍生高效液相色谱梯度洗脱以及荧光检测两种方式分析链霉素中的药物残留，使得链霉素药物在短时间内能够得到很好地分离，回收率也在70%左右，基本满足药物残留检测的标准；三是利用烷磺酸钠酸溶液来提取蜂王浆样品，净化之后利用高效液相色谱测定链霉素残留，回收率高达84%～104%。

（三）硝基咪唑类残留检测

硝基咪唑类药物是一种抗原虫感染的药物，但是一旦人服用之后可能会存在细胞诱变以及动物致癌等等危险，这种药物现在已经被多个国家禁止使用在动物性药物中，但是我国蜂王浆产品中仍有这类药物的残留。高效液相色谱检测这种药物残留的方式分为两种：一是利用高效液相色谱串联质谱，样品在氢氧化钠溶液中溶解之后，再使用萃取液提取蜂王浆样品中硝基咪唑类残留，采用H-RSM技术降低环境干扰，提高样品的稳定性，为下阶段的样品残留检测工作打下基础；二是蜂王浆样品经盐酸稀释后，加入氯化钠等物质对样品去脂，磷酸二氢钾调节PH值后再进行反萃，洗脱之后再萃取。利用紫外波长检测蜂王浆中硝基咪唑类残留，这种检测方式的定量为0.01μg/kg，回收率在50%～60%，检测误差也小于16%，相比较之前的检测水平有了很大程度的提高，符合药物残留检测标准。

（四）磺胺类残留检测

磺胺类药物是磺胺结构药物的总称，主要用于治疗细菌感染的一种药物，但是同时也伴随着一些副作用。药物引起的过敏、中毒等导致药性菌株产生，会直接影响到人体造血系统、细胞系统的正常工作。检测人员利用固相萃取高效液相色谱荧光检测方式对磺胺醋酰、磺胺吡啶、磺胺对甲嘧啶等八种药物残留进行分析，利用乙酸乙酯提取蜂王浆样品，磷酸溶液溶解，色谱柱净化，洗脱吹干后利用盐酸和乙酸钠溶解，再利用荧光检测仪进行检测，这种方式的回收率在60%～70%，误差小于8.5%。

四、总结

随着世界蜂王浆进口国对于药物残留的要求越来越高，传统的检测方式已经不能达到药物检测的标准。为了保证蜂王浆产品出口贸易的健康发展，必须在原本检测方式的基础上进行创新。现在越来越多的专家开始研究高效液相色谱在其他物质中的检测效果，积累经验将这种检测方式引进到蜂王浆药物残留检测工作中，解决现在药物残留检测工作中的难题。高效液相色谱具有高效、成本低、检测质量高等等优点，但是在实际的检测工作中还是存在一定的问题，高效液相色谱检测仪不是特别灵敏，给检测工作带来一定的困扰。随着社会经济的发展和人们生活水平的提高，越来越关注食品的安全问题，特别是蜂王浆这类保健产品。高效液相色谱检测技术在实践活动中不断进步和完善，在今后的时间里将会越来越多的应用到蜂王浆药物残留检测工作中，也是保证我国保健产品行业健康发展的有效手段。

参考文献

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