尿液白细胞检查干化学法与镜检分析探讨

[摘要] 保证尿液白细胞结果的准确性,正确掌握尿白细胞镜检与干化学的关系,降低临床漏检率,但由于两者的方法及原理不同,两者的结果比较没有固定的换算公式,笔者通过显微镜检查结果与干化学分析结果比较,纠正干化学分析的假阴性和假阳性结果。

[关键词] 尿液分析仪;干化学;镜检;白细胞;影响因素

[中图分类号] R446.12[文献标识码] B[文章编号] 1673-7210(2010)04(c)-195-02

干化学筛选简单易行、检验成本低、便于推广,可评估健康、疾病状态,尤其对判断泌尿系统疾病有不可替代的价值。干化学分析法的检测结果受到很多因素的影响,检测红细胞及白细胞存在假阳性和假阴性现象,必须结合尿液沉渣的显微镜检查结果进行综合判断。现将笔者在工作中的几点体会总结如下:

1 干化学法检查尿液白细胞的原理

粒细胞胞质内含有酯酶,这种酶能水解一种3-羟基吡咯酯类底物,释放出酚,从而与重氮试剂反应生成紫红色化合物,其颜色深浅与细胞的多少成正比。此法只能测定粒细胞,不与淋巴细胞和单核细胞反应。

2 尿液白细胞显微镜检查

标准化操作:取尿液10 ml离心,采用水平式离心机,1 500 r/min,离心5 min。弃除上层尿液,保留0.2 ml尿沉渣,轻轻混匀,取1滴置载玻片上,用18 mm×18 mm或22 mm×22 mm盖玻片覆盖后镜检。先用低倍镜(10×10)观察全片,高倍镜(10×40)仔细观察10个高倍视野(HP),报告方式:××个细胞/HP。尿液白细胞显微镜分析报告方式中视野平均值与定性结果的对应关系:0～4个为(-),10～20个为(+),21～50个为(++),>50个为(+++),满布视野为(++++)[1]。

3 干化学法检测尿液白细胞的影响因素

3.1 温度

尿液干化学检测在环境温度较低的情况下,尿液白细胞检测会出现假阴性或假阳性现象[2]。因为干化学法的原理是用试条上的试剂与尿液中相关成分发生化学反应,而化学反应又必须在一定温度条件下才能进行。因此,化验室室温必须保持在20～25℃,如果是冷藏尿标本,取出后应恢复至室温再进行检测。

3.2 维生素C

根据Tillman's Reagent原理,维生素C将染料由蓝色还原成红色,可出现假阴性结果。

3.3 药物

尿中四环素浓度高可出现假阴性结果[3]。呋喃妥因、庆大霉素、头孢氨苄和高浓度清蛋白(>5 g/L)可干扰白细胞检验。尿液中污染甲醛或高浓度胆红素可产生假阳性结果[4]。

3.4 淋巴细胞

当尿液中以淋巴细胞为主时会产生干化学法的假阴性结果[5]。

3.5 标本放置时间

尿液需新鲜,标本放置2.5 h后测定原先阴性的结果变为阳性。

3.6 纸片暴露时间

干燥的纸片在空气中放置3 h无影响,但纸片用蒸馏水湿润后3～5 min出现假阳性结果,浸入纸片时间应严格按照说明书上的规定。

3.7 其他因素

高比重尿、高糖尿(>30 g/L)和草酸浓度增高造成白细胞测定结果偏低,大量尿蛋白(清蛋白>5 g/L)及检测白细胞的试纸酯酶反应减低或抑制,可使白细胞呈假阴性结果。

4 尿液干化学分析与显微镜检查的关系

检验结果的准确性与规范的尿沉渣镜检是分不开的,在工作中,每一份标本都应采用这种方法检查。干化学与镜检的关系判定可按照以下标准:如果一个标本经过两种方法检查,干化学结果与镜检结果都在正常或异常范围,说明过筛是正确的;干化学法异常而镜检结果正常视为假阳性;干化学结果正常而镜检结果异常视为假阴性。但实际工作中很难达到这一要求,我科根据中华医学会检验分会1995年制订的尿液干化学标准规定:尿液干化学检查结果白细胞、红细胞、亚硝酸盐及尿蛋白四项指标同时阴性(肾病除外),可视为尿内有形成分大致在正常范围内,可免除镜检[6],但要注意:①泌尿外科疾病除外;②结石、肿瘤除外;③干化学试带的质量、原理及操作有关事项与过筛的准确性有关。通常是在试带、仪器确定、检验人员相对固定的条件下,达到以上标准可视为尿沉渣成分在正常范围内,可免除进一步显微镜检查。通过日常工作总结,笔者分析了造成两者结果不一致的原因,分析仪法(+)而镜检法(-):①由于尿液在膀胱贮存时间过长或其他原因导致白细胞破坏,中性粒细胞酯酶释放到尿液中;②尿液中污染甲醛或高浓度胆红素或使用某些药物(如呋喃妥因);③尿液被女性分泌物污染,含有大量扁平上皮细胞、小圆上皮细胞、鳞状上皮细胞污染。分析仪法(-)而镜检法(+):①肾移植患者发生排异反应时,尿中以淋巴细胞为主,另外尿液中以单核细胞为主时也会出现此结果;②温度偏低;③高比重尿、高糖尿;④尿液中含有某些大剂量药物;⑤大量尿蛋白(清蛋白>5 g/L)和胆红素;⑥尿液含大量脓细胞时。由于过筛的目的是检出正常、镜检病理性标本。因此,过筛的原则是不能出现假阴性结果,否则就会漏诊。由于干化学分析易受多种药物、其他外源性物质或人为因素的干扰,且不可避免地有一定的假阴性率。因此,不应只看干化学分析而忽视镜检。

[参考文献]

[1]王宏.尿液干化学分析与显微镜检查对比分析[J].广东医学,2002,23(S1):158.

[2]陈津,王德春,朱忠勇.低温对干化学法测定尿白细胞的影响[J].临床检验杂志,2006,24(1):33.

[3]叶应妩,王毓三.全国临床检验操作规程[M].3版.南京:东南大学出版社,2006:294.

[4]丛玉隆,马骏龙.尿液干化学分析与显微镜检查[J].中华医学检验杂志,1997,20(3):135-137.

[5]杜忠斌,李林青.药物对尿液分析仪检测白细胞的影响[J].现代检验医学杂志,2003,18(3):5.

[6]丛玉隆,马骏龙,李云莲,等.尿沉渣测定四种方法的参考值的范围调查[J].中华医学检验杂志,1997,20(4):229-231.

(收稿日期:2010-01-08)