十一酸睾酮外用微乳的处方研究和制备

【摘要】 目的 对十一酸睾酮微乳的处方和相图进行研究。方法 选用肉豆蔻酸异丙酯(IPM)为油相，通过滴定法绘制伪三元相图，筛选并优化处方。结果 确定了最终空白微乳处方为IPM∶ Cremophor EL∶Labrasol∶水=5∶13∶7∶75

(O/W型)，十一酸睾酮最大载药量8.2 mg/ml。结论 所选择的微乳处方均可以满足十一酸睾酮用药的要求，为开发十一酸睾酮新的给药剂型拓展了思路。

【关键词】 微乳；十一酸睾酮；伪三元相图

十一酸睾酮(Testosterone Undecanoate，TU)属雄激素类药，为睾酮衍生物。目前，市场上使用的十一酸睾酮均以油溶液形式注射或口服给药:十一酸睾酮油溶液注射液，十一酸睾酮口服胶丸。这两种给药剂型存在使用不便、患者顺应性差、口服生物利用度低、副反应大、制剂保存不便等缺点［1］。前期研究发现，十一酸睾酮脂溶性大，外用时皮肤无法顺利吸收进入真皮层，因此将十一酸睾酮采用微乳的方式进行处理，提高其透皮吸收效率。

1 仪器与试药

waters 600-2487型高效液相色谱仪(美国)，布鲁克海文ZetaPALS型激光粒度分析仪(美国)，ZHWY-1102 c型恒温培养震荡箱(上海智城分析仪器制造有限公司)，Sigma 3-30K型高速离心机(德国)，IKA磁力搅拌器(德国)。

十一酸睾酮(TU，武汉远城制药股份有限公司)，肉豆蔻酸异丙酯(IPM，上海亚洲化学品有限公司)，Cremophor EL(聚氧乙烯醚35蓖麻油，德国BASF公司)，Cremophor RH40(聚氧乙烯40氢化蓖麻油，德国BASF公司)，Solutol HS15(聚乙二醇硬脂酸酯15，德国BASF公司)，Labrasol(PEG-8 辛酸/癸酸甘油酯，法国佳法赛公司)，乙氧基二乙二醇(Transcutol CG，法国佳法赛公司)，聚甘油-6双油酸酯(Plurol Oleique，法国佳法赛公司)，Tween 80、乙醇、甘油和PEG 400均为分析纯。

2 方法和结果

2.1 水相滴定法制备伪三元相图

水相滴定法制备四元体系的伪三元相图的具体方法［2］为：在25℃条件下，将乳化剂与助乳化剂按一定Km比值混合，用磁力搅拌器充分混合均匀得混合乳化剂，再与油相分别按9∶1、8∶2、7∶3、6∶4、5∶5、4∶6、3∶7、2∶8和1∶9的质量比称取置于透明西林瓶中混匀，电磁搅拌下用水相来滴定上述混合液，记下混合液由澄清变混浊、由混浊变澄清和形成黏度较大区域的临界点。在滴定过程中，逐滴滴加水相，当滴加1滴后，混合液状态5 min内都保持不变，即视为达到平衡。

在本试验中，根据试验目的的实际要求，处方初步筛选时仅考察了由澄清变混浊、由混浊变澄清的过程，对处方进一步优化时对微乳相、液晶相、凝胶相进行了区分。

2.2 微乳处方的筛选

由于十一酸睾酮在肉豆蔻酸异丙酯(IPM)中溶解度较大，且IPM对皮肤有极好的渗透、滋润和软化作用，所以使用IPM作为油相。进一步，通过水相滴定法确定微乳的其他组分。

2.2.1 乳化剂的筛选

固定Km值为1∶1，以水为水相，IPM为油相，PEG400为辅助乳化剂，选用Tween 80、EL35(Cremophor EL)、HS15(Solutol HS15)和RH40(Cremophor RH40)比较乳化能力。EL35、HS15、RH40都有较好的乳化能力，但由于HS15和RH40室温下为半凝固粘稠的物质，取用称量不易，采用EL35作为乳化剂。

2.2.2 助表面活性剂的筛选

选取乙醇、甘油、PEG 400、聚甘油-6双油酸酯、乙氧基二乙二醇、Labrasol及部分乳化剂的混合物作为辅助乳化剂，EL35为乳化剂，以Km=l∶1的比例混合，IPM为油相，水相滴定法绘制伪三元相图(见图1)。

结果表明:形成微乳区域最大的是Labrasol和PEG 400。从稳定性上考虑，最终选择Labrasol作为处方的助乳化剂。

2.2.3 Km值的筛选

以IPM为油相，EL35为乳化剂，Labrasol为助乳化剂，Km值越大，微乳区域越大，同时凝胶区域也随EL35的含量增加而变大；制备得到的微乳稳定性也随Km值的增加而增大。所以宜选择较大的Km值以便获得较大的微乳区域和较好的稳定性。

2.3 微乳处方的优化和分析

以IPM为油相，EL35为乳化剂时，Labrasol为助乳化剂，透明微乳化区域随Km的增大而变大，Km分别为6∶1、4∶1、2∶1时，微乳区(a1+a2)、透明凝胶区(b)、浑浊凝胶区(c)如图所示。

分别从图2的a1和a2区选择几个空白处方进行进一步考察，测定各空白处方的粒径、粘度、和最大载药量。由于部分样品具有非牛顿流体特征，触变特性，使用旋转粘度计测定粘度时，统一在25℃，21号转子，转速为0.5r/min的条件下测定。按以上各空白处方制备后，加入过量的十一酸睾酮，30℃空气浴恒温震荡平衡48 h后，3000r/min离心10 min取上清液，稀释后参考中国药典采用HPLC法测定十一酸睾酮含量，计算最大载药量。

测定结果见下表：

其中1~3号为双连续型微乳；4~6号为W/O型微乳；7~9号为O/W型微乳，载药量与油相用量成正比。选择7号处方为O/W型的最佳处方，即IPM∶EL35∶Labrasol∶水=5∶13∶7∶75，其平均粒径为34.3 nm，最大载药量为8.2 mg/ml,能满足临床要求。

2.4 十一酸睾酮微乳的制备

将1.5 g十一酸睾酮于5 g IPM内充分溶解搅拌，可适当加热助溶，放置冷却至室温后，加入13 g EL35和7 g labrasol进行混匀，持续搅拌下，缓慢加入75 ml 蒸馏水，得到带有淡蓝色乳光透明液体，即十一酸睾酮微乳。水相加入过程中，如体系发生凝固，需加大搅拌力度，减缓水相加入速度。

3 讨论

微乳作为新的药物载体，具有热力学稳定性，吸收迅速完全，能增强疗效，降低毒副作用，其口服、注射、鼻腔给药、透皮给药均有很大潜力［3］。本文使用非离子型表面活性剂Cremophor EL作为乳化剂，与其他离子型乳化剂相比具有生物相容性好、毒性低、溶血作用小的优点，能与大多数药物配伍；油相使用性质稳定、毒性小、无刺激的IPM，其同时具有很好的渗透、软化、滋润作用，可促进药物吸收；助表面活性剂使用了PEG-8 辛酸癸酸甘油酯代替具有较大刺激性的醇类。十一酸睾酮为脂溶性药物，外用透皮吸收时选用O/W型微乳有利于达到缓释和促透目的。7号处方粒径小，载药量最大，能够满足临床要求。从伪三元相图上看，该微乳体系有足够大的W/O微乳区和O/W微乳区，适合制备质量稳定的微乳。

参 考 文 献

［1］ Gu Y， Liang X， Wu W， et al. Multicenter contraceptive efficacy trial of injectable testosterone undecanoate in Chinese men. J Clin Endocrinol Metab，2009，94(6)：1910-1915.

［2］ 潘国梁，贾晓斌，魏惠华，等.药用微乳伪三元相图的几种制备方法比较研究.中国药房，2006，17 (1)：21-23.

［3］ Kawakami K， Yoshikawa T， Moroto Y， et al. Microemulsion formulation for enhanced absorption of poorly soluble drugs. I. Prescription design.J Control Release，2002，81(1-2)：65-74.

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