应用时间分辨技术进行乙肝病毒标志物的测定

摘 要 目的、方法：应用时间分辨技术(TRFIA)对19例仅表面抗原(HBsAg)和核心抗体(抗-HBc)为阳性的患者进行分析。结果：19例患者中HBsAg、HBeAg、抗-HBc均为阳性者7例，HBsAg、HBeAb、抗-HBc均为阳性者8例，而HBsAg、抗-HBc为阳性者只有4例。5项乙肝病毒标志物的阳性检出数前者均高于后者。结论：应用时间分辨技术检测乙肝病毒血清标志物灵敏度高、特异性强，可代替酶联免疫吸附实验进行乙肝病毒血清标志物的定量检测。

关键词 乙肝病毒标志物 时间分辨技术 酶联免疫吸附实验

资料与方法

标本来源及收集方法：医院住院患者、门诊病人90例，健康体检人员70例，其中男89例，女71例，年龄6～78岁；门诊患者采用ELISA法HBsAg和抗-HBc阳性者19例，其中男11例，女8例，年龄在13～72岁。血清分离后置-30℃保存。

仪器及试剂：时间分辨荧光分析仪，广州丰华泰莱-I型；试剂由广州丰华公司提供。酶标仪，美国Σ-960，酶联免疫试剂由上海科华公司提供。 检测方法：分别采用酶联免疫法和时间分辨免疫荧光法测试乙肝病毒标志物。严格按照试剂说明书进行操作。

结果判断：时间分辨免疫荧光法(TRFIA)HBsAg≥0.5ng/ml，抗-HBs≥30IU/ml，HBeAg≥0.03NCU/ml，抗-HBe≥2.0NCU/ml，抗-HBc≥0.2NCU/ml为阳性；ELISA法HBsAg以S/N≥2.1，抗-HBs以S/N≥2.1，HBeAg以S/N≥2.1，抗-HBe以S/C.O≤1.0，抗-HBe以S/C.O≤1.0 为阳性。

结 果

经酶联免疫吸附法检测19例仅表面抗原(HBsAg)和核心抗体(抗-HBc)为阳性的患者，采用TRFIA进行分析，结果见表1。

对于收集的160份患者和健康人血清标本，分别采用时间分辨免疫荧光技术(TRFI)和酶联免疫吸附法(ELISA)同时检测乙肝病毒5项标志物。两方法的符合率分别为：HBsAg98.1%，抗-HBs97.5%，HBeAg96.2%，抗-HBe91.3%，抗-HBc96.2%。

讨 论

ELISA法是目前进行乙肝病毒血清标志物检测普遍采用的方法，由于试剂生产厂家所采用包被基因片段的不同，操作过程中存在时间差以及污染等因素的影响，导致测试结果有所不同。TRFI检测是近年来年发展起来的一种新的免疫测试方法，是利用镧系元素“铕”作为示踪物标记抗原或抗体，在免疫反应完成后加入特殊的增强液，将“铕” 从标记抗原或抗体上解离下来并与增强液中的组分形成新的具有强烈荧光的螯合物，用特定的仪器测定荧光强度，从而判断反应体系中被测物浓度[1]。

参考文献

1 乐爱萍.时间分辨免疫荧光技术在检验医学中的发展状况.江西医学检验，2003，21(6)：191-193.