积雪草总苷巴布膏剂透皮吸收试验

[摘要] 目的： 研究积雪草总苷巴布膏剂中积雪草总苷的体外经皮吸收情况。方法： 用改良Frans透皮吸收池进行体外透皮试验，用UV法测定积雪草总苷含量。结果：积雪草总苷巴布膏剂中积雪草总苷的透皮速率为0.3175 mg/（cm2・h）。结论：巴布膏剂中的积雪草总苷有很好的渗透性。

[关键词] 积雪草总苷；巴布膏剂；体外经皮吸收；UV法

[中图分类号]R94[文献标识码]A [文章编号]1673-7210（2007）05（c）-019-02

积雪草为伞型科植物积雪草[Centella asiatica (L.) Urb.]的干燥全草，从积雪草中提取的积雪草总苷主要含有积雪草苷、羟基积雪草苷和积雪草酸等有效成分，具有促进伤口愈合、刺激肉芽生长及抗溃疡等药理作用。巴布膏剂是《中国药典》（2000年版）增加的新剂型，是将中药提取物制成巴布膏剂，临床用于消炎、止痛和抗风湿等，效果良好。作者把积雪草总苷制成巴布膏剂，根据卫生部药品标准积雪草苷的含量测定方法――滴定法[1]，对其中积雪草总苷的经皮渗透性进行了考察。

1 材料与方法

1.1 仪器与材料

日本岛津UV-2401型紫外分光光度计；改良Frans透皮吸收池；恒温磁力搅拌器（杭州仪表电器厂）；积雪草总苷原料购自广州环叶制药有限公司（含量98.5%）；葡萄糖，鼠李糖对照品由中国药品生物制品检定所提供；巴布膏剂（自制）；生理盐水，山东华鲁制药有限公司，批号D05081304；动物：清洁级SD大鼠，山东绿叶制药有限公司提供，许可证号：SYXK(鲁)20030020。

1.2 方法

1.2.1离体皮肤的制备取健康大鼠，处死后腹部去毛，取表皮和真皮层，去尽皮下脂肪及黏液组织，用生理盐水冲洗干净，冷藏备用。

1.2.2体外透皮实验将大鼠皮固定在扩散池的给药室和接受池之间，将巴布膏剂样品贴于离体皮肤的角质层表面，使之与皮肤密切接触。真皮一侧与接受液接触，排净气泡。接受液为生理盐水，水浴温度为（37±1）℃，磁力搅拌速度为300 r/min，分别于第1、2、4、6、8、10、12 h吸取9 ml接受液，同时补加相同体积的生理盐水。

1.2.3 接受液中积雪草总苷的含量测定

1.2.3.1 对照品溶液制备：精密称取干燥至恒重的葡萄糖20.65 mg和鼠李糖9.5 mg，共置于100 ml容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。

1.2.3.2 标准曲线的绘制：精密量取对照品溶液1.0，2.0，3.0，4.0， 5.0 ml分别置于50 ml具塞试管中，各加水至5 ml，精密加入铜试液5 ml，摇匀，置沸水浴中加热15 min，取出，冷却，加入硫酸（0.5 mol/L）5 ml，置冰浴中充分振摇，使氧化亚铜沉淀完全溶解，分别用硫代硫酸钠溶液（0.005 mol/L）滴定至终点，加淀粉指示液1～2滴，继续滴定至蓝色消失，另取水5 ml按同法操作，作为标准空白，以两者滴定ml数之差作为纵坐标，糖的mg数作为横坐标，绘制标准曲线。

1.2.3.3测定法：取接受液9.0 ml，加浓硫酸1 ml，置双层石棉板上直火加热回流，煮沸1 h，冷却，用20%氢氧化钠溶液中和后，移置25 ml容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取滤液5 ml置于50 ml具塞试管中，按1.2.3.2项下自“精密加入铜试液5 ml”起同法操作。另取接收液9.0 ml，置25 ml量瓶中，按本法自“加水稀释至刻度”起同法操作。取两者滴定ml数的差数，自标准曲线上读取相当于糖的mg数，除以0.5468，得总苷mg数，计算，即得。

1.2.3.4 稳定性试验：取积雪草总苷0.01 g，精密称定，分成6份，各加入空白巴布膏经皮渗透液9.0 ml，加浓硫酸1 ml，照1.2.3.3项下自“置双层石棉板上”起同法操作。在第0、1、2、3、4、5 h分别对5份样品进行滴定，所滴定ml数的RSD值为2.02％，表明供试品溶液在5 h内具有良好的稳定性，可以满足试验分析的要求。

1.2.3.5样品溶液的含量测定：取各时间点接收液，照1.2.3.3项下方法操作。

2 结果

按下式计算累积渗透量Q和累积透过百分率[2，3]

Qn =

Qn为累积渗透量，Cn，Ci为第n和i次取样点药物浓度(mg/ml），V为扩散池体积(20 ml )，Vi为接受液体积，A为渗透面积( 2.5cm2 )。

累积透过百分率P=×100%

将Q对t作线性回归，计算得直线方程为Q=0.3175t-0.0508，斜率0.3175 mg/(cm2・h)即为渗透速率。

实验结果见表1、2。

3 讨论

体外透皮实验结果，Q=0.3175t-0.0508符合零级释放过程。12 h平均累积渗透百分率为67.27%，表明自制的积雪草总苷巴布膏剂中的积雪草总苷具有较好的透皮性。

在体外透皮实验时，贴于皮肤表面巴布膏中的气泡，会影响积雪草总苷的渗透结果，所以应尽可能避免上述情况。

巴布膏剂是以水溶性高分子材料为主要基质制备的一种外用制剂，透气性好，无毒性，同时具有良好的粘贴性能和保湿性能，使用无皮肤刺激性和过敏性，用药更安全，另外积雪草总苷水溶性好，非常适宜制备亲水性的巴布膏剂。

[参考文献]

[1]中华人民共和国卫生部.卫生部药品标准中药成方制剂(13册)[S].1997:167.

[3]李娟，李运蔓，龚涛，等.萘普生凝胶剂的研制及透皮吸收研究[J]. 中国医药工业杂志，1997，128（8）：357.

[4]杨文晨.吡罗昔康及其贴剂的体外经皮渗透性的研究[J]. 沈阳药科大学学报，1995，12（4）：235.

（收稿日期：2007-03-08）

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