大肠菌群检验不同步骤的结果比较

【中图分类号】R115【文献标识码】A【文章编号】1005-2720(2010)08 - 25 - 02

【摘要】目的 比较大肠菌群检验初发酵、鉴别平板分离、复发酵三步骤中,一步、二步分别与三步结果的符合率,以便能通过二步法尽快报出结果,做到省时省力。方法 生活饮用水及卤菜均采用国标检验方法。结果 一步与三步符合率为饮用水61%,卤菜81%,二步结果与三步符合率饮用水93%,卤菜为95%,经统计学处理,二步结果与三步结果差异无显著性(P>0.05)。结论 笔者认为大批量采集样本时初发酵产酸产气,平板分离菌落典型,革兰染色阴性,便不经复发酵,直接报出结果,可节省时间和人力物力,使公共卫生现场监督人员很快得到科学依据。

【关键词】大肠菌群检验;不同步骤;结果比较

大肠菌群检验是卫生细菌检验中最常用的指标之一。目前该方法确定为三步法:初发酵、鉴别平板分离、复发酵,共需时3d。此方法使用以来,发现初发酵产酸产气,平板分离菌落典型,革兰染色阴性时,与复发酵结果差别不大。所以有人为了能更快的报出结果,省掉了复发酵,也有人认为初发酵产酸产气即可报告结果。为了既快又准确的适应卫生监督工作的需要,笔者对实验室2006年与2007年2年来所做样品的原始记录随机抽取生活饮用水50份,卤菜500份,把每份的大肠菌群三步阳性结果与一步、二步的阳性结果做一比较。

1 材料与方法

1.1 材料生活饮水为自来水、深井水。卤菜为卤鸡、卤鸭、卤牛肉、卤猪蹄。

1.2 方法生活饮用水按《生活饮用水检验规范》[1]操作。卤菜按《食品卫生微生物检验》操作。

2 结 果

2.1 生活饮用水检验结果比较饮用水共抽取检验原始记录50份,750个管数,初发酵阳性302管,平板分离阳性197管,复发酵阳性184管,其检出率分别为40%、26%、25%。一步、二步与三步阳性符合率分别为61%、93%,经统计学处理,一步法与三步法差异有显著性(X2=42.38,P0.05)见表1。

表1生活饮用水各步骤检验结果比较

操作

结果 初发酵 平板分离 复发酵

阳性管数 302 197 184

阴性管数 448 553 566

阳性检出率 40% 26% 25%

2.2 卤菜检验结果比较卤菜共抽取检验原始记录500份,4500个管,初发酵阳性1608管,平板分离阳性1383管,复发酵阳性1310管,阳性率分别为36%、31%、29%。一步、二步与三步符合率分别为81%、95%,经统计学处理,一步法与三步法差异有显著(X2=45.03,P0.05),见表2。

表2卤菜检验各步骤的结果比较

操作

结果 初发酵 平板分离 复发酵

阳性管数 1608 1383 1310

阴性管数 2892 31173190

阳性检出率 36% 31% 29%

3 讨 论

大肠菌群的定义[2]:“一群能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰阴性无芽胞杆菌。”目前我国以上述定义为判定大肠菌群的标准。根据以上定义,经二步法的全过程,就能检出大肠菌群,而三步只是一个重复。从实验结果的统计学处理也支持这个观点,所以我认为生活饮用水和卤菜的大肠菌群的检验步骤可由二步法代替三步法。这样可省时省力,提前判定结果,以便更快地指导饮用水、食品的卫生监督工作。一步法与三步法差异显著,系乳糖发酵与染色形态不一致引起,不宜采用。二步与三步符合率在93%～95%,也就是二步法有5%～7%的假阳性,根据检验过程分析,造成此问题的原因是:在饮用水和卤菜大肠菌群的检验中,经常存在鉴别平板上菌落不够典型,可染色又是革兰染色阴性,经复发酵不产气给以排除。所以在工作中初发酵产酸产气,鉴别平板菌落典型,染色革兰阴性杆菌即可判断结果,但如果平板菌落不典型,染色革兰阴性杆菌,又不可排除的再做复发酵证实试验,这样就可弥补二步法的不足,杜绝假阳性出现。这样可使大多数样品能尽快报出结果,提高工作效率及准确率。

【参考文献】

[1] 中华人民共和国卫生部.生活饮用水检验规范.2001:122-125.

[2] 中华人民共和国国家标准.食品卫生微生物学检验. 2003:13-18.