红细胞补体Ⅰ型受体在乳腺癌患者中的表达

【摘 要】乳腺癌疾病在发生、发展过程中可受到多种因素的影响，机体的非特异性免疫功能在其发生、发展中起到举足轻重的作用，红细胞膜上广泛表达的CR1分子不仅在调节细胞免疫中具有重要作用，而且与肿瘤细胞的转移有重要关系。

【关键词】乳腺癌；补体受体；粘附活性；阳性细胞百分比

【中图分类号】R73 【文献标识码】A 【文章编号】1004―7484（2013）09―0729―01

1 材料与方法

1.1 临床资料

乳腺癌组病人 72 例（均经病理证实）为我院普通外科住院病人，平均年龄 52岁，均为女性；乳腺良性疾病组为 40 例乳腺小叶增生症患者，平均年龄 49 岁，均为女性；正常对照组为 50 名健康查体女性，平均年龄 51 岁。

1.2 实验方法：

1.2.1 红细胞 CR1阳性细胞百分比测定

（1）取清晨空腹外周静脉血 1ml；（2）取流式专用试管 2 支，一支加 CD35-FITC 单克隆抗体，另一管加阴性对照 IgG1FITC/IgG2a 各10ul，充分混匀 3 秒钟，置 4℃冰箱中反应 15min，加 1%多聚甲醛0.5ml，24h 内上机检测；（3）FACS Vantage 流式细胞仪，激发光波为 488nm，启动 Cell Quest 软件，用2 micron Beads 调荧光检测变异系数（CV）

1.2.2 红细胞免疫粘附活性测定

取 1×108/ml 红细胞悬液 50ul 置入编号试管，加入自身新鲜血浆 50ul和 1×108/ml 的肿瘤细胞 100ul，充分混匀，置 37℃，30min。然后加生理盐水 100ul轻轻旋转达混匀，染色后，640 倍镜下阅片。结合 5 个以上红细胞的肿瘤细胞为一朵花环，计数肿瘤细胞花环率。

2 结果

2.1 正常对照组与乳腺良性疾病组患者间红细胞CR1阳性细胞百分比和免疫粘附活性的测定值基本一致，无明显差异。

2.2 乳腺癌组红细胞CR1阳性细胞百分比及免疫粘附活性均显著低于正常对照组，差异非常显著。乳腺癌组红细胞CR1阳性细胞百分比及免疫粘附活性均显著低于乳腺良性疾病组，差异非常显著。并且其红细胞CR1阳性细胞百分比的低表达与免疫粘附活性下降程度基本一致。

2.3 经过对 19 例晚期乳腺癌患者及 27 例早期乳腺癌患者细胞CR1阳性细胞百分比及免疫粘附活性测定值分析比较，发现晚期乳腺癌患者的测定值均明显低于早期乳腺癌患者，其差异非常显著。

2.4 正常人红细胞CR1阳性细胞百分比测定值分布特点：50 例健康人其表达分布存在一定差异。若按测定值大于 1.00%为高表达（HH），测定值介于 1.00%与 0.50%之间为中表达（HL），测定值小于 0.50%为低表达（LL）分类，其它各组亦是如此，乳腺癌组红细胞CR1高表达人群所占比例显著低于正常对照组及乳腺良性疾病组所占人群比例，而中低表达人群所占比例则明显高于正常对照组及乳腺良性疾病组人群所占比例，差异比较显著。

3 讨论

乳腺癌疾病在发生、发展过程中可受到多种因素的影响，机体的非特异性免疫功能在其发生、发展及预后中起到举足轻重的作用。有相关文献报道，红细胞除呼吸功能以外，有非特异性免疫功能，其胞内含有丰富的自然杀伤细胞增强因子（NKEF），在肿瘤细胞的免疫监视和杀伤中具有重要作用，红细胞在体内广泛与其它免疫细胞相互作用，形成非常复杂的免疫调节网络，是机体自身免疫平衡和稳定的重要基础。红细胞广泛表达的CR1分子不仅在调节细胞免疫中具有重要作用，而且与肿瘤细胞的转移有重要关系。近年来逐渐发现红细胞具有识别、粘附、浓缩抗原及清除免疫复合物，参与机体免疫调控功能，这些功能均是通过与红细胞表面的补体 I 型受体（CR1）来完成的。红细胞CR1具有广泛的生物学功能，在内源性补体调节蛋白（RCA）家族成员中活性最强、作用最广泛。红细胞CR1主要功能有四方面：一是CR1通过与 C3b（C3 的活化形式）或 C4b（C4 的活化形式）结合抑制经典或旁路途径 C3 转化酶的形成；二是可作为调理素受体增强吞噬细胞摄取包被了 C3b 或 C4b 的颗粒或微生物；三是可与带有 C3b 的免疫复合物结合并将免疫合物送到肝脾网状内皮系统吞噬销毁，防止免疫复合物在组织中沉积；四是对机体具有免疫调节作用。虽然CR1在红细胞膜上的数量仅相当于白细胞膜上CR1分子的 1/50―1/100，但其成簇分布且单位容积血液中红细胞数目大于白细胞三个数量级，其与循环免疫复合物、

抗原物质及其它机体细胞接触的机会是白细胞的 500―1000 倍，故血液中的绝大部分免疫复合物与红细胞结合。免疫粘附功能是红细胞的重要免疫功能，红细胞通过细胞膜上的 C3b 受体粘附有相应补体的可致病的循环免疫复合物和癌反应物质，此外还粘附经旁路激活粘附的 C3b 补体的抗原（如肿瘤细胞、细菌等），再经肝脾网状内皮系统销毁。红细胞CR1还可作为 C3b 灭活因子的辅助因子，将C3b 裂解为 C3dg 及 C3c 而抑制补体的激活限制免疫复合物在组织中沉积。补体发挥生物学效能的另一途径是通过将 C3b 固定到肿瘤细胞表面、免疫复合物及外源性颗粒上，使得被有效的识别，转运，被效应细胞吞噬，这些效应细胞会有 C3b 特异性受体或其降解产物。因此红细胞膜上的CR1分子表达状况与机体的病情变化有密切关系。红细胞表面的CR1分子与免疫粘附活性的变化不仅与自身免疫性疾病有关，而且在肿瘤疾病的发生与发展过程中也有不可忽视的作用。有相关文献报道，红细胞 CR1在肺癌、肝癌、直肠癌、卵巢癌等恶性肿瘤疾病中低表达，其表达随疾病的进展而明显降低，红细胞上大量表达的CR1分子可通过补体粘附抗原物质，呈递给单核吞噬细胞，通过二次抗原呈递作用间接调控细胞因子的产生，并可调控自然杀伤细胞的抗肿瘤作用，红细胞CR1分子表达的降低，可使自然杀伤细胞抗肿瘤作用受到抑制，细胞的免疫功能相应下降，不能有效的发挥杀伤肿瘤细胞的作用。恶性肿瘤患者往往有免疫功能状态紊乱和低下而免疫功能状态在一定程度上可预示肿瘤的发展和预后。本研究发现红细胞 CR1的表达及免疫粘附活性变化在乳腺癌的发生、发展过程中起重要作用。

参考文献：

[1] 王海滨，张景萍，王辉，等。红细胞CR1分子的定量测定及其临床意义。 中华微生物学和免疫学杂志。2000；20：381-384。

[2] 郭峰，张乐之，许育，等。肺癌患者红细胞免疫分子CR1和 IL-8受体的变化。上海免疫学杂志，2001；21（2）：121。