自制弱阳性质控品对无偿献血者进行ABO血型鉴定室内质控的可行性探讨

[摘要] 目的 探讨自制弱阳性质控品对无偿献血者进行ABO血型鉴定室内质控的可行性以及使用后提高亚型检出率的效果。 方法 ①选择本站日常工作中采集

[关键词] 质控品；弱阳性；ABO血型；亚型

[中图分类号] R331.1+41 [文献标识码] B [文章编号] 1674-4721（2014）07（c）-0120-04

ABO血型系统是人类免疫性最强的红细胞血型系统，在临床安全输血中具有十分重要的作用。在日常血型检测工作中，ABO亚型由于主要表现为抗原减弱或同时存在弱的ABO不规则抗体，极易因漏检而导致ABO血型鉴定错误并发生严重的输血不良反应，给安全输血带来极大隐患[1-9]。为有效检出无偿献血者中存在的ABO亚型，进一步保障临床输血安全，本站利用献血者的血液标本制备弱阳性质控品，并成功应用于无偿献血者ABO血型鉴定的室内质控，使ABO亚型检出率明显提高。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 检测对象 选取本站2006年1月～2009年12月79 704名无偿献血者（对照组）及2010年1月～2013年12月78 415名无偿献血者（实验组）的血液标本。

1.1.2 主要试剂 单克隆抗-A、抗-B（北京金豪生物技术有限责任公司）。ABO试剂红细胞；人源抗-A、抗-B；抗-A1、抗-H、抗-AB；A2红细胞（上海血液生物医药有限责任公司）。硫酸庆大霉素（开封制药集团有限公司）。叠氮钠（北实纵横北京有限公司）。

1.1.3 主要仪器 Xantus全自动血型仪，由Xantus双机械臂全自动加样仪（瑞士Xantus公司）和Poseidon数字血型仪（深圳市爱康电子有限公司）整合而成；120孔V型梯度反应板（日本Olympus公司）；96孔平底微板（丹麦Nunc公司）；Metis-200全自动血型仪及配套96孔UV反应板（深圳市爱康电子有限公司）；KA-2200血球洗涤离心机（日本KUBOTA公司）；SBHW2-1型电热恒温水浴箱（北京医疗设备厂有限公司）；Liswell实验室管理软件（烟台海深威公司）。

1.2 方法

1.2.1 弱阳性室内质控品的制备 ①选择本站日常工作中采集

1.2.2 弱阳性质控品的使用规则 ①每批质控品制备完毕后，检验科必须用全自动血型仪对其凝集强度定标并进行重复性评价，当结果符合预期要求时可正常使用，否则需要重新制备并定标。②质控品应在规定的有效期内使用。③质控品必须与每批献血者标本同步检测和记录。④每次使用前，将质控品置室温平衡15～30 min，用完后立即放回2～6℃冰箱保存，每天置于室温时间应≤1 h。⑤每次使用前必须检查质控品，发现溶血、颜色变化、细菌污染等，即放弃使用并更换新的质控品。⑥批量检测无偿献血者的血液标本时，如果质控品反应结果呈弱阳性为在控，如果反应结果呈阴性则为失控，必须查明原因，及时纠正并做好记录。

1.2.3 无偿献血者的ABO血型鉴定 ①检验科使用全自动血型仪检测献血者的ABO血型，用单克隆抗-A、抗-B做正定型，用Ac、Bc、Oc做反定型，试验前常规进行试剂质控，整个实验过程严格执行标准操作规程。②对每批献血者标本进行ABO正定型时，同步检测红细胞A抗原和B抗原弱阳性质控品；反定型时同步检测血浆A抗体和B抗体弱阳性质控品，以随时监控检测过程中出现的异常情况。当质控品结果为阴性时，提示存在影响弱抗原或弱抗体检出的因素，应积极分析并采取针对性改进措施，比如检查试剂的效期、试剂稀释的浓度、试剂与标本的比例、试剂槽内试剂存放的时间、孵育温度和时间、离心转速和时间、振荡频率和时间以及仪器的稳定性等。③采取电脑自动化判读和人工肉眼目测相结合的方法，对血型鉴定结果进行判定。一旦发现可疑结果，必须用试管法复核，复核时凡正定型凝集强度4+，或呈混合视野凝集；反定型凝集强度2+，或呈凝集不平行的O型；或者为正、反定型不符，均送血型室进一步鉴定。④血型室按文献[11-12]的方法进行亚型检测和分类，必要时送上级单位协助鉴定。

1.3 统计学处理

采用Modern 2000TMV5.0计算机管理软件统计弱阳性质控品使用前后的献血者人数（不计重复献血者），根据血型室试验记录统计并计算两组ABO亚型检出率（不计重复检测者），计数资料采用χ2检验，检验水准α=0.05。

2 结果

2.1 弱阳性质控品呈阴性反应结果的原因分析及解决方法

弱阳性质控品在无偿献血者ABO血型鉴定工作的使用过程中，共发现14次呈阴性反应结果，其原因分析及解决方法见表1。

2.2 两组ABO亚型检出率的比较

弱阳性质控品使用后（实验组）的ABO亚型检出率明显高于使用前（对照组），差异有统计学意义（P

3 讨论

ABO亚型是由于基因突变而导致的红细胞抗原减弱[13]，在无偿献血者中存在一定比例，向东等[14]报道上海地区献血者的亚型检出率为1.50/万（66/440 617）。虽然献血者的亚型比率不高，但如果漏检，则严重影响临床输血的安全性和有效性。比如将AX、BX献血者的血型误定为O型而输给O型患者；或将AXB、ABX献血者的血型误定为B型或A型，分别误输给B型或A型患者，均可引发严重的速发性溶血性输血反应，甚至威胁患者生命。所以，为了正确鉴定献血者中存在的ABO亚型，保证我站发出的每一袋血液血型的正确无误[15-16]，我们根据工作实际，客观分析了亚型反应的一般特点及可能导致亚型漏检的各种原因，认为目前可购买的商品化质控品，多为试剂厂家配套设计的强阳性质控标本，不能有效控制弱抗原或弱抗体的漏检，有必要使用弱阳性质控品，以随时监测可能影响弱抗原或弱抗体检出的因素。为此，本研究以本站丰富的血液标本资源为基础，结合成熟的低温保存技术，用同源血液可制备2年用量的弱阳性室内质控品，不但方便了日常工作，也减小了质控品的批间差异，使质控结果更加稳定，几年来应用情况良好，和商品化质控品比较，该质控品更能保证ABO亚型的有效检出，能进一步提高无偿献血者ABO血型鉴定的准确性。

由表1可见，弱阳性质控品有14次呈阴性反应结果，其中正定型出现12次，反定型出现2次。经进一步研究分析，正定型有2次为抗血清稀释比例错误，均由工作人员粗心大意造成，经重新稀释试剂后，弱阳性质控品检测结果为阳性；4次为试剂槽中的抗血清试剂未及时更换，导致效价降低而影响了凝集效果，经彻底清洗试剂槽并更换试剂后，弱阳性质控品检测结果为阳性；4次为抗血清与标本的比例不合适，主要因抗血清更换了新批号，其效价和原试剂相比发生了不同变化所致，经重新选择试剂与标本的最佳比例后，弱阳性质控品检测结果为阳性；1次为振荡频率偏大，经仪器厂家工程师校准后，弱阳性质控品检测结果为阳性；1次为红细胞弱阳性质控品本身使用时间过长，经更换后结果呈阳性。反定型出现2次阴性结果的原因，均为试剂红细胞接近失效期所致，更换新批号后弱阳性质控品检测结果为阳性。

由表2可见，自采用弱阳性质控品对ABO血型鉴定进行室内质控以来，本站无偿献血者的ABO亚型检出率，由2006年1月～2009年12月的0.25/万（2/79 704），提高为2010年1月～2013年12月的1.66/万（13/78 415），略高于文献[14]报道的数据。其中不包括重复献血时被确定为亚型的4名无偿献血者，该4名献血者，在2009年以前献血时均被定为正常血型，2010年以后再次献血时均被确认为亚型。1例以往献血时被定为O型，后确认为BX；1例以往献血时被定为B型，后确认为AXB；2例以往献血时被定为B型，后确认为罕见的B（A）表型。由此再次证明该质控方法的科学性、实用性和有效性，具有一定的推广应用价值。

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[16] GB18469-2012.全血及成分血质量要求[S].

（收稿日期：2014-05-28 本文编辑：郭静娟）