血清IL-17与子痫前期关系的研究

[摘要] 目的 通过检测子痫前期孕妇血清中白细胞介素-17(IL-17)水平的变化，探讨IL-17与子痫前期发病的关系。方法 采用酶联免疫吸附法(ELISA)分别测定24例子痫前期孕妇(子痫前期组)和24例正常妊娠的孕妇(对照组)血清中IL-17的浓度。结果 子痫前期组孕妇血清中IL-17的表达水平均高于对照组。差异均有统计学意义(P

[关键词] 子痫前期； IL-17； Th17； 促炎性细胞因子； 妊娠

[中图分类号] R714.24+5 [文献标识码] B [文章编号] 1005-0515（2012）-01-019-01

[Abstract] Objective To detect preeclampsia by maternal serum interleukin -17 (IL-17) levels,and to explore IL-17 that pro-inflammatory cytokines and the relationship between the incidence of preeclampsia.Methods enzyme linked immunoadsorbent assay (ELISA) were measured by 24 examples of preeclampsia pregnant women (preeclampsia group) and 24 cases of normal pregnancy pregnant women (control group) serum concentrations of IL-17.Results maternal serum in preeclampsia group IL -17 expression levels were higher.The differences were statistically significant (P

[Key words] preeclampsia; IL-17; Th17; pro-inflammatory cytokines; pregnancy

子痫前期(preeclampsia，PE)是一种严重影响母儿健康的妊娠期特发并发症，其发病率在我国9.4%-10.4%，国外7%-12%。多数病例在妊娠期出现一过性的高血压，蛋白尿症状，分娩后即随之消失。以高血压，蛋白尿和水肿为主要临床表现，基本病理变化为全身小动脉痉挛，全身各系统各脏器灌流量减少，对母儿造成危害，甚至导致母儿死亡[1]。子痫前期的病因及发病机制尚未阐明。流行病学调查发现初产妇，孕妇年龄过小或大于35岁，多胎妊娠，妊娠期高血压病史及家族史，慢性高血压，慢性肾炎，抗磷脂综合征，肥胖，营养不良等均为高危因素。多数学者认为最合理的病因为异常滋养层细胞侵入子宫肌层，免疫，遗传，血管内皮细胞受损，营养缺乏，胰岛素抵抗等。与子痫前期的发生有一定的关联。近年来，子痫前期的病因的探讨有了很大的进展，形成了内皮细胞激活学说，损伤学说和免疫失衡学说。其中内皮细胞损伤机制是子痫前期发生的病理基础[1]，子痫前期是一有炎症反应参与的复杂的病理过程。细胞因子是重要的炎症介质和免疫调节因子，白细胞介素因子作为促炎性细胞因子之一，其异常表达可能是子痫前期患者特征性病理生理变化发生的重要原因[2]。本研究通过测定子痫前期患者和正常妊娠孕妇血清中IL-17的水平，探讨IL-17与子痫前期发病的关系。

1 资料与方法

1.1 研究对象分组 ①子痫前期组：选取2010年10月至2011年11月在山东省潍坊市人民医院产二科住院的重度子痫前期患者60例，其中足月妊娠22例，未足月妊娠的38例；②对照组：选取同期住院分娩的足月妊娠及保胎的正常妊娠孕妇60例。排除患者本人既往及现患慢性高血压疾病，糖尿病，心脏病，肝脏病变合并子痫前期病例。子痫前期诊断标准参考全国高等医药教材建设研究会规划教材妇产科学第7版。以上病例年龄均在22-42岁，孕周为28-41周，孕前均无高血压，心脏病，肾病，糖尿病，营养不良，脑血管疾病，血小板减少等病史以及其它内科合并症，且所有研究对象均知情同意。

1.2 方法

1.2.1 标本的处理 血清标本的处理：入院时普通血清管采集孕妇空腹时肘静脉血3mL，严格无菌操作，避免溶血引起指标的准确性。静置1小时后以2000r/min离心2min，离心半径为10cm，去除悬浮物，取澄明的血清保存于-80℃冰箱待测。

1.2.2 酶联免疫吸附法试验双抗体夹心检测血清IL-17的表达 操作严格按照夹心法酶联免疫吸附测定试剂盒说明书进行(购自上海船夫生物科技有限公司)，所有标本均设复孔。于酶标仪450nm处以空白对照组调零后测各孔的光密度值。根据标准曲线测定样品中各指标的浓度。

1.3 统计学处理 采用SPSS13.0软件分析实验数据，检测结果以x±S表示，两组之间比较采用t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果 两组外周血中IL-17表达水平的比较。与对照组比较，子痫前期组中患者外周血中IL-17的表达水平增高(P＜0.05) 见表1。且在子痫前期组中未足月患者外周血中的IL-17与足月妊娠患者相比较来说，足月妊娠子痫前期患者外周血中IL-17与正常足月妊娠孕妇相比较，其足月妊娠子痫前期患者的外周血中IL-17的表达水平较高(P＜0.05)见表2。

表1 两组外周血中IL-17表达水平的检测结果(ρ/pg・ML-1)

*P＜0.01 vs.对照组。

表2 子痫前期组中外周血中IL-17表达水平的检测结果(ρ/pg・ML-1)

*P＜0.01 vs.对照组。

3 讨论 白细胞介素-17(interleukin-17，IL-17)是T细胞诱导和促进炎症发生过程中的一种重要的可溶性细胞因子，主要由Th17细胞产生，有促进炎症发展，免疫应答，造血等多种功能[3]。IL-17家族是近年发现的由6个成员组成的促炎性细胞因子家族，分别为IL-17A，B，C，D，E，F。其中IL-17A是发现最早，表达最广泛，生物活性最强的因子。通常所说的IL-17就是指IL-17A[4]。某些疾病可导致IL-17的水平增高，如自身免疫性疾病和感染性疾病，幽门螺旋杆菌感染的胃粘膜组织等中IL-17水平表达增高。多种细胞因子对IL-17的表达有调节作用，如IL-23和IL-6的协同作用增加CD4+记忆细胞IL-17的分泌；IL-2，-27，-4及IFN-γ可以抑制Th17细胞的分化，从而导致IL-17的水平降低。

IL-17的主要生物学作用：一是促进炎性反应，可以刺激成纤维细胞，角质细胞，上皮及内皮细胞释放IL-6和-8、前列腺素E2(PGF2)、基质金属蛋白酶1(MMP-1)和粒细胞集落刺激因子(G-CSF)等因子。IL-17还可以诱导人成纤维细胞表达细胞间黏附分子1(ICAM-1)，促进T细胞增殖。IL-17能够与多种细胞因子产生协同作用，从而放大炎症反应[5]。二是促进血管生成。Il-17是CD4＋T细胞衍生的调节血管生成的主要介质，上调多种促血管生成因子的表达，从而促进新生血管的生成。IL-17促进小鼠角膜新生血管的形成。Nagasaki等[6]的体内实验表明，IL-17对血管内皮细胞的生长没有直接作用，但可以显着的促进血管内皮细胞迁移和血管内皮细胞条索的形成(core formation)。在小鼠的实验中，大约50ng/mL的IL-17可以促进微血管样血管样结构的生长。三是促进滋养细胞的侵袭性：在胎盘的形成过程中需要大量的细胞因子的辅助，如IL-3，-4，-6，TNF-β，IFN-β，TGF-β在胎盘的形成与功能中起着重要的作用，其中IL-1，-6和GM-CSF影响着胎盘激素的分泌，包括孕酮，绒毛膜促性腺激素(HCG)和HPL等。还有 IL-17也可调控IL-1，-6和GM-CSF等的表达，间接作用于胎盘激素的产生水平进而影响滋养层细胞的入侵。但IL-17在正常妊娠滋养细胞入侵中的作用还有待一步的验证。

本研究采用ELISA法检测了两组外周血中IL-17的分泌水平，结果显示子痫前期组中IL-17的表达水平高于对照组，提示IL-17可能参与了子痫前期的炎症的病理基础。高水平的IL-17与促炎症反应有一定的关系，它一方面可能与多种因子协同作用以放大小血管的炎症反应；另一方面IL-17与中性粒细胞的迁移、炎症反应及血管生成有密切的关系，它不但通过释放活性物质破坏内皮细胞，还可以产生大量氧自由基，构成了子痫前期血管痉挛，血压升高，水肿，蛋白尿等临床表现的病理基础。

从本研究血清中IL-17检测结果看，与对照组比较，子痫前期组血清中IL-17的表达水平较高，差异有统计学意义(P＜0.05)；而在子痫前期组中，22例足月子痫前期与38例未足月子痫前期患者比较而言，差异亦有统计学意义(P

研究表明，妊娠是全身各系统参与的复杂过程，其中免疫系统在妊娠过程中起着重要的作用。妊娠依赖于胎儿母体免疫系统之间复杂的相互作用所形成的免疫细胞和细胞因子网络。Pongcharoen[7]等研究表明，人的胎盘组织中有IL-17mRNA及蛋白表达，研究中也发现IL-17也存在于羊水中。Chow[8]等通过妊娠14-16周妇女的羊水中和母体血清的前瞻性研究首次证明，IL-17存在于妊娠妇女的羊水中，并测定其在羊水和血清中的浓度，分别为4.17ng/L和6.28ng/L在研究中还表明，IL-6和-8在妊娠妇女羊水中的浓度明显高于其血清中的浓度。IL-17可以促进IL-6和-8的分泌，扩大炎性反应。由于子痫前期是一有炎症反应参与的复杂的病理过程，而且IL-17是强大的促炎性细胞因子，有强大的募集中性粒细胞的能力，不但通过释放活性物质损害细胞，还可以产生大量氧自由基，构成了子痫前期全身血管痉挛、血压升高、水肿、蛋白尿等临床表现的发病基础。因此，IL-17的异常表达可能是子痫前期患者特征性病理生理变化发生的重要原因之一。本实验结果表明，子痫前期组IL-17明显高于对照组，推测子痫前期组中Th17细胞所占的比例可能高于正常对照组，子痫前期患者外周血和胎盘组织中表达IL-17增多，可能是Th17细胞增多的结果。IL-17与其受体结合后可通过刺激单核/巨噬细胞产生IL-1β和TNF-α，同时释放IL-6、IL-10、IL-12等细胞因子，损伤内皮细胞，使血管通透性增加；IL-17可影响滋养细胞的移行及侵蚀，增加其凋亡率，所以病理观察到胎盘组织凋亡增加，胎盘着床较浅和螺旋小动脉管腔狭窄的那个典型的形态学变化。所以检测IL-17等细胞因子的含量对子痫前期的诊断和治疗有着积极的意义，有利于指导临床上对高危孕妇尽早采取必要的预防措施。

总之，在子痫前期的病理过程中，IL-17和Th17细胞可能扮演着重要的角色，特别是在随着研究的深入，阻断IL-17等细胞信号因子的产生可能是治疗子痫前期的一种有效方法，并为以后的抗体研究和治疗上提供了重要的线索。

参考文献

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[7] Pongcharoen S,Somran J,Smitippayawan S et al.Interleukin-17 expression in the human placenta[J].Placenta,2007,28(1):59-63.

[8] Chow SS,Craig ME,Jones CA etal.Differences in amniotic fluid and maternal serum cytokine levels in early midtrimester women without evidence of infection[J].Cytokine,2008,140(1):78-84.