气相色谱法测定鸡蛋花药材中反式苦橙油醇的含量

[摘要] 目的:建立鸡蛋花药材中反式苦橙油醇的含量测定方法。方法:采用气相色谱内标法,以十四醇为内标,测定鸡蛋花药材中反式苦橙油醇的含量。结果:反式苦橙油醇在0.036 3～0.725 0 mg/ml范围呈良好的线性关系(r=0.999 9),平均加样回收率为100.4%,RSD=0.63%。结论:气相色谱法测定反式苦橙油醇的含量,准确度高且重复性好,可作为鸡蛋花药材的质量控制方法之一。

[关键词] 鸡蛋花;挥发油;反式苦橙油醇;气相色谱法;含量测定

[中图分类号] R927.2[文献标识码] B[文章编号] 1673-7210(2010)05(a)-057-02

Content determination of d-nerolidol in Mexican Frangipani by GC

LIANG Jing, ZHANG Guangcai, FU Fangfei

(Guangzhou Xiangxue Pharmaceutical Co., Ltd., Guangzhou 510530, China)

[Abstract] Objective: To establish a method for the determination of d-nerolidol in Mexican Frangipani by GC. Methods: Tetradecyl alchohol served as the internal standard, GC method was used to determine the content of d-nerolidol in Mexican Frangipani. Results: The linear ranges of d-nerolidol was at 0.036 3-0.7250 mg/ml(r=0.999 9), the average recovery was 100.4% with a RSD of 0.63%. Conclusion: The method is accurate, reproducible, and can be used to control the quality of Mexican Frangipani.

[Key words] Mexican Frangipani; Volatile oil; D-nerolidol; GC; Content determination

鸡蛋花是夹竹桃科鸡蛋花的干燥花朵,又名缅桅子、蛋黄花、印度素馨、大季花、鹿角树等,是夹竹桃科鸡蛋花属多年生落叶小乔木或灌木,聚伞花序顶生。原产南美洲墨西哥,亚洲热带及亚热带地区的庭院、花圃有广泛栽培,我国主要在广东、福建、广西、云南等地有栽培。夏秋季节开花,花朵淡雅清香,花朵大至5 cm,夏秋季节采收,在花盛时趁天晴将花朵摘下晒干或略蒸再晒干备用。1984年广东省卫生厅编制《广东省中药炮制规范》对其采收和炮炙等方法做出了规范,使之有了质量检查依据。2004年8月广东省药监局对国家药品标准未收载而在广东常用的中药材品种进行了整理汇编,制订了广东省地方习用中药标准,鸡蛋花被收录在《广东中药材标准》中。文献记载鸡蛋花的化学成分是鸡蛋花酸、苷类及挥发油。本文应用GC法对鸡蛋花挥发油的成分研究结果进行报道,为医药工作者对该药材进一步研发提供依据。

1 仪器与试药

Agilent 6890 N气相色谱仪;高纯氮(纯度:99.999%以上);苦橙油醇(百灵威化学技术有限公司,批号:121970250,含量:98.0%);乙酸乙酯、十四醇为分析纯;鸡蛋花药材产自云南。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱:HP-5(30 m×320 μm,0.25 μm)色谱柱;检测器:氢火焰检测器(FID);柱温采用程序升温:初始温度为100℃,保持3 min,以9℃/min速度升温到172℃,保持6 min,以9℃/min速度升温到202℃,保持3 min,共23.3 min;载气:氮气;流速:2 ml/min;进样口温度:200℃;检测器温度:240℃;分流比:10∶1;进样量:1 μl;以十四醇为内标。

2.2 内标溶液的制备

称取十四醇50.0 mg,加乙酸乙酯使全部溶解,定容至50 ml,摇匀,作为内标溶液。

2.3 对照品溶液的制备

称取苦橙油醇对照品5 mg,置10 ml量瓶中,加入内标溶液5 ml,加乙酸乙酯到刻度,摇匀作为对照品溶液。

2.4 供试品溶液制备

将鸡蛋花药材称取25 g,加水400 ml,按照《中国药典》2005年版附录Ⅹ D挥发油测定法操作,自测定器上端加水使充满刻度部分,并溢流入烧瓶为止,加乙酸乙酯2 ml,加热煮沸3 h,放冷,将测定器中的乙酸乙酯移至10 ml量瓶中,加入十四醇内标溶2 ml,加乙酸乙酯至刻度,摇匀,即得。

2.5 系统适用性试验

分别吸取对照品溶液和供试品溶液1 μl,注入气相色谱仪,记录23.3 min色谱图。色谱图见图1。

2.6 线性关系考察

称取0.202 5 g反式苦橙油醇对照品,置100 ml量瓶中,加乙酸乙酯稀释并定容至刻度,摇匀备用。取反式苦橙油醇线性标准溶液0.3、1.0、2.0、3.0、4.0、6.0 ml,分别置6个10 ml量瓶中,各加内标溶液2 ml,加乙酸乙酯定容至刻度,摇匀备用。取反式苦橙油醇系线性标准溶液进样,以反式苦橙油醇浓度(X)与反式苦橙油醇和十四醇内标峰面积的比值(Y)进行线性回归。回归方程:Y=0.481 17X+0.008 70(r=0.999 9),反式苦橙油醇在0.036 3～0.725 0 mg/ml范围内呈良好的线性关系。

2.7 精密度试验

按上述方法,取1 ml注入气相色谱仪,连续进样对照品溶液6次,记录反式苦橙油醇峰与十四醇峰的分离度和理论塔板数并计算反式苦橙油醇和十四醇峰面积之比的RSD。反式苦橙油醇峰与十四醇峰的分离度不小于2.0;理论塔板数均不小于5 000;峰面积比的RSD为0.91%(n=6),结果显示精密度良好。

2.8 加样回收率试验

取同批号鸡蛋花药材9份,每份25 g,分别加入水400 ml,按“2.4”项下操作,进样,测得回收率,结果见表1。

2.9样品含量测定

分别精密称取同批次的6个样品,按上述方法提取,检测其含量,测得鸡蛋花药材中反式苦橙油醇的含量见表2。

3 讨论

本实验对鸡蛋花挥发油中主要化学成分的测定表明,鸡蛋花挥发油中主要成分是反式苦橙油醇。鸡蛋花主产于我国福建、广东、广西和云南等地,本实验曾对上述地区产鸡蛋花干品进行测试,该不同产地的鸡蛋花中挥发油的成分基本一致,本法可以作为鸡蛋花挥发油中反式苦橙油醇的含量检测。

从6批云南省所产鸡蛋花药材干花的挥发油图谱分析表明,所测药材挥发油的质量较为一致、稳定,此结果可作为鸡蛋花药材的质量控制指标之一,对于区分鸡蛋花的混淆品具有一定的意义。

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(收稿日期:2010-01-15)