化学发光检测法对人类胰岛素的检测方法建立与临床研究

胰岛素是一种肽类激素，从胰岛B细胞中分泌。胰岛素的分泌不足，可引起糖尿病。而在当今人们生活水平的不断提高，医疗水平的发展和人们对健康概念的转变，糖尿病的发病率迅速增长。愈发成为当今我国公共卫生事业的严重问题，成为困扰众多老年人的一种慢性严重疾病。

胰岛B细胞的功能测评通常通过测量血清当中的胰岛素实现的，在目前临床当中，最为常用的测定方法有化学发光免疫分析（CLIA）、酶联免疫分析（ELISA）和放射免疫分析（RIA）等。本文采用化学发光检测法（CLIA）对50名糖尿病患者进行胰岛素的检测，以观察法学发光检测法对胰岛素检测的有效程度。现在在结果报道如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择在2010年2月到2010年8月到我院治疗的住院糖尿病患者50例，均经过专科资深医生确诊的糖尿病患者。其中男性28例，女性22例，年龄从36到71岁，平均为53.3岁。患者的空腹血糖在10－16.5mmol/L之间。另外取50名健康的体检者作为对照组，对照组被试均无糖尿病史和严重肝肾疾病。对照组中男性25例，女性25例，年龄37－72岁，平均年龄52.5岁。

1.2 检测方法 糖尿病组和对照组所有被试都未进行过胰岛素治疗。在检测前一天晚餐之后禁止进食，检验日当天停止一切药物，在清晨取空腹静脉血。抽血后进食二两馒头一个或75g葡萄糖，在餐后1小时、2小时、3小时后各抽血一次，之后糖尿病组采取化学发光检测法测定胰岛素。化学发光检测法的试剂盒由北京科美东雅公司提供，并使用其公司的化学发光分析仪进行测定。对照组采用放射免疫分析法进行胰岛素检测，试剂盒为北京北方生物技术研究所提供，并用伤害原子核研究所日环仪器厂的全自动计数仪进行测定。

1.3 统计方式 采用SPSS13.0软件进行数据统计分析，计量资料通过x±s表示。统计方式主要为t检验。

2 结果

胰岛素的分泌详情参见表1。在馒头测试当中，糖尿病患者的空腹胰岛素值高于对照组，其差异具有统计学意义（P＜0.05）。馒头进食后，对照组的胰岛素值在1小时处达到分泌最高值；糖尿病组的胰岛素值在2小时处达到分泌最高值，但峰值不如对照组高，且糖尿病组在进食3小时后仍无法回复到正常水平。两种测定方法的胰岛素检测结果的比较详见表2。

3 讨论

胰岛是人体内的负责调节物质储存与动员的器官，可分泌胰岛素，胰岛素的不足可引发糖尿病（diabetes）。原发性糖尿病可分为1型糖尿病和2型糖尿病，其中1型糖尿病是相对少见的胰岛素依赖型，诊断比较简单；2型糖尿病是临床上多见的非胰岛素依赖型。2型糖尿病的“三多一少”症状不如1型明显。

糖尿病虽然无即时生命危险，但长期患病可引起一系列严重的并发症。如心血管病变、肾脏病变、神经病变、视网膜上病变和足溃疡（糖尿病足）。此外，牛群还发现由于糖尿病的慢性终身性和不可根治性，使得很多患者都背负了沉重的思想负担，继而导致情绪障碍等心理问题。因此，对于糖尿病的确诊，增加糖尿病检测的灵敏度和简便性，是目前公共卫生领域一个非常引人注目的问题。众多医护人员也为糖尿病的治疗护理出谋划策。如农丽宁就认为进行胰岛素治疗的病人可用对家属进行指导、为患者提高信心和惊醒胰岛素治疗只是的健康宣教等护理细则。

在目前临床当中，最为常用的测定方法有化学发光免疫分析（CLIA）、酶联免疫分析（ELISA）和放射免疫分析（RIA）等。过去以放射免疫法（RIA）较为多采用，此法的使用已有超过30年的历史了。在1959年由美国学者Yalow等人首先建立，当时取得了十分振奋人心的效果。然而由于该法的操作时间长、保质期短、检测的设备十分昂贵等缺憾，影响了RIA在临床糖尿病诊断当中的推广。化学发光免疫分析（CLIA）是继酶免疫测定法和放射免疫测定法后出现的一种新型技术，它既具化学发光分析的灵敏性，又具免疫测定的特异性。不单有快速、特异和敏感不差于其他两者，又以其无毒性、安全稳定性和经济实用性的优势。目前发光免疫分析在应用在临床当中超过40项，例如在生殖系统、甲状腺、贫血、治疗药物的检测等，其应用广泛并快速准确的特点已被广泛认可。但由于试剂的费用昂贵，且可能造成实验人员的损害，因此制约了其发展。

化学发光免疫分析法的灵敏度高、范围广、使用的设备简便的一种令人满意的胰岛素测定法，而且其成本低，无放射性污染，是目前较为有发展前途的一种方式。本次研究的结果也表明，在空腹时糖尿病患者的胰岛素水平较非糖尿病患者高，其原因可能是糖尿病患者在空腹的时候血清的生长激素和皮质醇上升，令到患者空腹的血糖升高，这一点贾伟平等已有资料表明。糖尿病人胰岛分泌胰岛素的反应时间较非糖尿病人慢，胰岛素的回复速度也较非糖尿病人慢，可见糖尿病人的胰岛B细胞功能较差。CLIA法的检测时间也较RIA的检测时间短，因此认为CLIA可作为糖尿病的快速诊断方法之一，在临床当中可广泛推广。

参考文献

[1] 谢玮，赵枰，陶国华.化学发光免疫分析测定胰岛素及C肽在2型糖尿病诊断中的临床应用[J].标记免疫分析与临床，2009,16(5)：283-285.

[2] 牛群.糖尿病患者生存质量和心理教育的关系研究综述[J].中外医疗，2009,33：172.

[3] 农丽宁.糖尿病患者应用胰岛素治疗的临床观察和护理[J]. 中外医疗，2011,28：97.

[4] UK Prospective Diabetes Study(UKPDS)Group．Intensive blood―glucose control with sulphonylureas or insulin compared with conventional treatment and risk of complications in patients with type 2 diabetes (UKPDS 33)．Lancet．1998：352：837―53．