野甘草的生药学研究

摘要：目的：建立野甘草的生药鉴定方法。方法：利用性状、显微、理化鉴别的方法。结果 ：野甘草茎髓部存在针晶，茎、叶表皮细胞均有非腺毛存在，而且叶表皮存在6~8个细胞组成的腺鳞；主要化学成分为生物碱及黄酮类，生物碱主要分布在根部，黄酮类主要分布在地上部分。结论：本实验建立的方法简便、可行，为野甘草的药材的鉴别及质量标准制定提供依据。

关键词：野甘草；性状鉴别；显微鉴别；理化鉴别

中图分类号：R284.1文献标识码：A

文章编号：1007-2349（2012）02-0052-03

野甘草又名冰糖草、香仪、假甘草等，为玄参科植物野甘草（Scoparia dulcis L.）的全株，主要分布在广西、广东、福建、台湾等地，具有清热解毒，疏风止咳，利尿消肿的功效［1］。我国主要用于治疗感冒发热、肺热咳嗽、暑热吐泻、脚气浮肿、小儿麻疹、湿疹、热痱、高血压和丹毒等证［2］。目前，国内外对野甘草的研究集中在化学成分及药理作用方面［3~4］，先后发现了野甘草酸（scopadulcic acid）A、B［5］、野甘草属酸（scoparic acid）A、B、C、野甘草都林（scopadulin）［6］等活性成分，但尚未见野甘草生药学方面的研究报道，本文就其生药学特征展开研究，为该药的鉴别、质量控制和进一步的开发利用提供依据。

1仪器与试剂

XSP-ZCA生物显微镜；SK3300H超声波清洗器（上海科导超声仪器有限公司）；HH－6恒温水浴锅（江苏金坛市宏华仪器厂）；YH系列规格1000ml电热器（江苏近湖镇教学仪器厂）；ZF-20C暗箱式紫外透射仪（上海顾村光电仪器厂）。所用试剂均为分析纯。

2材料与方法

2.1试验材料野甘草采于广东省广州市和肇庆市，经广东药学院药用植物教研室杨全副教授鉴定为玄参科植物野甘草（Scoparia dulcis L.）。

2.2试验方法运用徒手切片、粉末装片、表面制片方法进行野甘草的显微鉴别；采用试管定性反应及薄层色谱法进行理化鉴别。

3结果与分析

3.1药材性状鉴别主根呈圆锥形，平直或带弯曲，木化，长10～30cm，表面棕黄色，常具侧根，质脆易折断，断面淡黄绿色，皮部薄。茎多分枝，基部圆柱形，黄褐色，上部灰绿色，茎节明显，体轻；嫩茎表面具6条纵棱，质脆易折断，断面髓部中空；分枝由叶腋伸出，光滑无毛。叶片多，皱缩易碎，灰绿色，完整叶浸润展开后为菱状卵形或菱状披针形，叶缘具齿或细小缺刻，网状脉序，草质，两面无毛。花黄白色，生于叶腋处，偶见卵圆形至球形的蒴果，黄褐色，皱缩，多开裂，散出极小粉状种子。

3.2显微鉴定

3.2.1根横切面木栓层由4～5列细胞组成，多呈扁平状，类长方形，排列整齐，往往多层相迭，细胞壁木栓化，呈褐色。皮层较宽，为数层薄壁细胞组成，细胞呈长卵圆形、圆形以及不规则多角形，排列疏松，有明显的细胞间隙，偶见大型裂隙，断续排列成环。韧皮部较狭窄，细胞小而不规则。形成层为2～3列排列整齐的扁平细胞组成。木质部较宽，约占2/3左右，导管多单个散在，偶见几个相连，木射线明显。见图1。

1.木栓层；2.皮层；3.韧皮部；4.形成层；5.木质部

图1野甘草根横切面简图

3.2.2茎横切面茎的横切面略呈圆柱形，有六条纵棱，棱角处为厚角组织。表皮由一列排列整齐紧密、扁平的细胞组成，外壁稍厚，常见由4～5个细胞组成的非腺毛。皮层所占比例较小，细胞大，壁薄，多为球形或椭圆形，排列疏松，靠近表皮的细胞具有叶绿体，有断续排列成环状的不规则小型裂隙。维管束为外韧型，呈放射状排列，韧皮部较狭窄，约占茎的1/8，由筛管、伴胞、韧皮薄壁细胞和韧皮纤维组成，细胞小且不规则。木质部比例较大，约占茎的1/4，由导管、管胞、木薄壁细胞和木纤维组成。髓部较宽，约为茎的1/2，呈类三角形，常有针晶束分布。见图2。

1.表皮；2.厚角组织；3.裂隙；4.皮层；5.韧皮部；6.木质部；7.髓

图2野甘草茎的横切面详图

3.2.3叶片横切面上下表皮细胞各一列，排列紧密，均有气孔和腺鳞分布，上表皮细胞较大，外壁厚，多不规则，下表皮细胞类方形。栅栏组织1列，细胞内含有大量叶绿素，与海绵组织分化明显。主脉维管束为半月形，外韧型，维管束上下方均有厚角组织，木质部位于向茎面，导管呈放射状径向排列。见图3。

1.非腺毛；2.厚角组织；3.下表皮；4.韧皮部；5.木质部；

6.海绵组织；7.气孔；8.栅栏组织；9.上表皮；10.腺鳞

图3野甘草叶片横切面图

3.2.4叶表皮片上下表皮细胞不规则，侧壁（垂周壁）呈波浪状，彼此互相嵌合，有腺鳞分布，由6~8个细胞组成；上表皮气孔器为不定式，下表皮为不等式，偶见直轴式。见图4。

AB

A.上表皮;B.下表皮1.腺鳞;2.气孔;3.表皮细胞

图4野甘草叶片上下表皮片

3.2.5粉末灰绿色，淀粉粒多为单粒淀粉，偶见复粒，直径10～30 μm。导管多为螺纹导管，直径20～34 μm。纤维有2种，一种细长，壁厚，另一种壁薄，两头稍尖，直径12～32 μm。腺鳞成群存在，腺头由6～8个细胞组成，直径85～120 μm。非腺毛偶见，由3～4个细胞组成。可见木栓细胞碎片，细胞呈正方形及多角形。见图5。

1.淀粉粒;2.螺纹导管;3.非腺毛;4.腺鳞;

5.纤维管胞;6.纤维;7.木栓细胞

图5野甘草粉末图

3.3理化鉴别

3.3.1显色试验

3.3.1.1生物碱类成分鉴别取本品根部粉末6 g，用40 mL乙醇加热回流2 h，过滤，滤液加热浓缩至10 mL过滤，滤液用3倍量水稀释后加30 mL乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层，水浴蒸干，残渣用4 mL乙醇溶解。溶液置于3支试管中，1号试管加入2 mL苦味酸试剂，有黄色沉淀产生；2号试管加入2 mL碘化铋钾试剂，有黄棕色沉淀产生；3号试管加入2 mL碘－碘化钾试液中，有红棕色沉淀产生。

3.3.1.2黄酮类成分鉴别取本品地上部分粗粉10 g，用 60 mL 95％乙醇加热回流2 h后蒸馏水稀释至含醇量为70％，滤过，滤液用石油醚萃取，水浴蒸干，加30 mL 50％乙醇溶解，25 mL水饱和正丁醇洗涤2次，取水层水浴蒸干，加4 mL乙醇溶解［7］。吸取0.5 mL上述样品溶液乙醇稀释至2 mL，加少量的镁粉，滴入2滴浓盐酸，溶液显红色。用毛细管吸取上述样品溶液约4 μL，点于滤纸上，晾干，喷1%的三氧化铝乙醇试液，热风吹干，置于紫外365 nm下观察，显鲜黄色荧光。

3.3.2薄层色谱鉴别

3.3.2.1黄酮类薄层层析①根部供试液制备：取根部粉末2 g，用20 mL乙醇加热回流2 h，过滤，滤液加热浓缩至约2 mL；②地上部供试液制备：取对照样品粉末3 g，用30 mL乙醇加热回流1 h过滤，挥干滤液，用2 mL甲醇溶解；③对照样品制备：取对照样品粉末4 g，具体方法参考3.3.1.2。取上述供试液各1 μL，点于同一聚酰胺薄层板上，以乙酰丙酮-乙醇-丁酮-水（1∶3∶3∶13）为展开剂，展开，晾干，喷1%三氯化铝乙醇试液，吹干，置紫外灯下检视。②和③供试液在Rf值为0.53、0.33处呈现蓝色荧光斑点，Rf值为0.56、0.47、0.40处呈现亮黄色荧光斑点，①供试液黄色荧光斑点不明显。

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3.3.2.2生物碱类薄层层析根部及地上部供试液制备方法参考3.3.2.1；对照样品制备同3.3.1。取上述供试液各8 μL，点于同一聚酰胺薄层板上，氯仿－环己烷－甲醇（19∶1.5∶1）为展开剂，展开，取出晾干。①依次喷碘化铋钾和亚硝酸钠乙醇试液，105 ℃烘至斑点清晰［8］，根部及对照样品在Rf值0.35、0.65处呈现红棕色斑点，地上部分未见斑点；②取同条件下展开后的薄层色谱，喷1％钼酸钠硫酸试液，105 ℃烘至斑点清晰［8］，3种供试液均在Rf值0.64处呈现蓝色斑点，根部和对照样品更清晰。

4结论与讨论

显微鉴别中，野甘草茎的髓部存在草酸钙针晶束。叶片为异面叶，上下表皮均有腺鳞和非腺毛存在，气孔轴式为不定式和不等式。理化鉴别初步判断野甘草的主要化学成分为生物碱、黄酮类化合物。其中，生物碱类主要分布在根部，黄酮类主要分布在地上部分。参考文献：

［1］中药大辞典编纂委员会.中药大辞典［M］.下册.上海：上海科学技术出版社，2006：2954.

［2］李宗友，倪暮云.野甘草的化学、药理［J］.国外医学中医中药分册，1994，16（2）：11~14.

［3］卢小曼，陈建华.野甘草痱子水的制备与临床应用［J］.广东药学，1996，（2）：56.

［4］蔡幼清译.野甘草提取物和粘霉烯酮在啮齿动物中的镇痛和抗炎特性［J］.国外医学中医中药分册，1994，16（4）：42.

［5］Hayashi T，Asano S，Mizutani M.Scopadulciol，an inhibitor of gastric H+，K（+）-ATPase from Scoparia dulcis，and its structure-activity relationships［J］.Nat Prod，1991，54（3）：802~809.

［6］Hayashi T，Kawasaki M，Miwa Y.Antiviral agents of plant origin.III.Scopadulin，a novel tetracyclic diterpene from Scoparia dulcis L［J］.Chem Pharm Bull（Tokyo），1990，38（4）：945~947.

［7］邹海舰，唐自明，韦群辉，等.凤尾茶的生药研究［J］.中国民族民间医药杂志，1999，6：359~363.

［8］匡海学.中药化学［M］.北京：中国中医药出版社，2003：323~327.（收稿日期：2011-11-23）

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