6种杀菌剂对5种蓝莓枝枯病原菌的室内毒力测定

摘 要：

葡萄座腔菌Botryosphaeria dothidea、棒状拟盘多毛孢Pestalotiopsis clavispora、乌饭树拟茎点霉Phomopsis vaccinii、尖孢炭疽菌Colletorichum acutatum、胶孢炭疽菌 Colletotrichum gloeosporioides 5种病原菌是目前引起山东青岛胶南地区蓝莓枝枯病的主要病原菌。本试验采用菌丝生长速率法测定6种杀菌剂的毒力。结果表明，吡唑嘧菌酯、咯菌腈、苯甲・丙环唑对5种病原菌抑制作用较强，EC50值介于0.0035～2.2245 mg・L-1之间，对由该5种病原菌引起的蓝莓枝枯病防效很好。

关键词：蓝莓枝枯病;杀菌剂;毒力测定

中图分类号：S436.639 文献标识号：A 文章编号：1001-4942（2015）06-0101-03

Indoor Toxicity Test of Six Fungicides

against Five Pathogens of Blueberry Twig Dieback

Yue Qinghua1，2， Gao Yong1，2， Liao Tiantian1，2， Zheng Jianli1，2， Dong Kefeng1，2， Jiang Huitie1，2

（1.Qingdao Engineering Technology Center of Blueberry/Wallen Blueberry Limited Company of Joyvio，

Qingdao 266000， China; 2. Wallen Agricultural （Qingdao） Limited Company， Qingdao 266000， China）

Abstract Botryosphaeria dothidea， Pestalotiopsis clavispora， Phomopsis vaccinii， Colletorichum acutatum， Colletotrichum gloeosporioides were 5 main pathogens of blueberry twig dieback in Qingdao Jiaonan area of Shandong Province. The indoor toxicities of 6 fungicides against 5 pathogens were detected by mycelium growth rate method. The results showed that pyraclostrobin，fludioxonil，difenoconazole-propiconazole had relatively strong inhibition rate. The EC50 were between 0.0035～2.2245 mg・L-1. The control effects were excellent.

Key words Blueberry twig blight; Fungicide;Toxicity test

蓝莓果实营养价值高，除一般的果糖、维生素外，还富含抗氧化剂、花青素和黄酮素，具有抗氧化、抗发炎、抗癌、降血压、降胆固醇、降血脂等作用，是一种营养丰富且蕴含较大经济价值的水果，市场上对蓝莓的需求在不断增长[1]。引种以来我国栽培面积逐年增加，仅山东青岛地区栽种面积就已达到上万亩。目前我国蓝莓病害种类较少[2～5]，枝枯病已成为危害蓝莓生产的重要病害。近几年来，青岛胶南地区蓝莓园内，枝枯病的发生逐年加重，4～5月和7～9月是枝枯病发生的高峰期，枝条萎蔫枯死，花朵、果实干枯脱落，常造成几十株至上百株树体死亡，经过调查并进行了病原菌分离，经形态学及分子生物学方法鉴定，葡萄座腔菌Botryosphaeria dothidea[6]、棒状拟盘多毛孢Pestalotiopsis clavispora[7]、乌饭树拟茎点霉Phomopsis vaccinii[8]、尖孢炭疽菌Colletorichum acutatum[9]、胶孢炭疽菌 Colletotrichum gloeosporioides [9]5种病原菌是引起该地区枝枯病的主要病原菌。笔者选用几种高效低毒的新型杀菌剂进行室内毒力测定，筛选效果较好者，以防治该病害。

1 材料与方法

1.1 供试菌株

供试5种菌株从山东青岛胶南地区蓝莓园内枝枯病枝中分离得到，经形态学及分子生物学测序鉴定后使用。菌株目前保存在青岛蓝莓工程技术中心微生物实验室。

1.2 供试药剂

供试药剂见表1。

表1 供试药剂

药剂名称英文通用名剂型生产厂家

250 g/L 吡唑嘧菌酯Pyraclostrobin乳油德国巴斯夫股份有限公司

24% 腈苯唑Myclobutanil悬浮剂美国陶氏益农公司

25 g/L 咯菌腈Fludioxonil悬浮种衣剂瑞士先正达作物保护有限公司

500 g/L 氟啶胺Fluazinam悬浮剂日本石原产业株氏会社

250 g/L 嘧菌酯Azoxystrobin悬浮剂瑞士先正达作物保护有限公司

300 g/L 苯甲・丙环唑Difenoconazole

-propiconazole乳油深圳诺普信农化股份有限公司

1.3 室内毒力测定方法

采用菌丝生长速率法[10]测定6种杀菌剂对葡萄座腔菌、乌饭树拟茎点霉、棒状拟盘多毛孢、尖孢炭疽菌、胶孢炭疽菌的毒力，用无菌水将供试药液稀释成一系列梯度浓度（20、10、5、1、0.2、0.05 mg/L）后配制含药PDA平板。取培养4 d的病原菌菌落，打取直径为6 mm的菌饼，用接种针将菌饼反面移植到含药培养基上，每皿接入一个菌饼，以加入无菌水的培养基为对照。每处理重复3次。接菌后将培养皿倒置放入28℃恒温培养箱中黑暗培养，5 d后采用十字交叉法测量菌落直径大小，计算抑制率。并以药剂质量浓度的对数值为横坐标，各处理浓度的生长抑制率的几率值为纵坐标，求出毒力回归方程、EC50值和相关系数[11]，根据EC50值评价杀菌剂毒力大小。

2 结果与分析

2.1 6种杀菌剂对B. dothidea的毒力测定

从表2可以看出，吡唑嘧菌酯的EC50值最小，为0.0081 mg・L-1;其次为苯甲・丙环唑、咯菌腈、腈苯唑，EC50值分别为0.0155、0.0177、0.2716 mg・L-1;氟啶胺、嘧菌酯的EC50值较大，分别为8.9653、321.6918 mg・L-1。结果表明，吡唑嘧菌酯对B. dothidea的抑制效果最好，嘧菌酯的抑制效果最差。

表2 6种杀菌剂对B. dothidea的毒力回归方程

药剂名称毒力回归方程EC50

（mg・L-1）相关系数

（r）

250 g/L 吡唑嘧菌酯Y=1.2459X+7.60740.00810.9426

24% 腈苯唑Y=0.2507X+5.14190.27160.9497

25 g/L 咯菌腈Y=1.0243X+6.79440.01770.9502

500 g/L 氟啶胺Y=0.3626X+6.10508.96530.9541

250 g/L 嘧菌酯Y=0.3293X+4.1743321.69180.9522

300 g/L 苯甲・丙环唑Y=1.2841X+7.32370.01550.9644

2.2 6种杀菌剂对P. vaccinii的毒力测定

从表3可以看出，吡唑嘧菌酯的EC50值最小，为0.0406 mg・L-1;其次为腈苯唑、咯菌腈、苯甲・丙环唑、氟啶胺，EC50值分别为1.5568、1.8358、2.2245、4.5628 mg・L-1;嘧菌酯的EC50值最大，为59.1282 mg・L-1。结果表明，吡唑嘧菌酯对P. vaccinii的抑制效果最好，嘧菌酯的抑制效果最差。

表3 6种杀菌剂对P. vaccinii的毒力回归方程

药剂名称毒力回归方程EC50

（mg・L-1）相关系数

（r）

250 g/L 吡唑嘧菌酯Y=1.0913X+6.51830.04060.9548

24% 腈苯唑Y=0.3782X+6.81831.55680.9585

25 g/L 咯菌腈Y=0.2786X+6.04091.83580.9411

500 g/L 氟啶胺Y=0.8296X+7.77154.56280.9521

250 g/L 嘧菌酯Y=0.312X+4.447259.12820.9548

300 g/L 苯甲・丙环唑Y=0.8225X+8.00442.22450.9550

2.3 6种杀菌剂对P. clavispora的毒力测定

从表4可以看出，吡唑嘧菌酯的EC50值最小，为0.0085 mg・L-1;其次为咯菌腈、苯甲・丙环唑，EC50值分别为0.0424、0.0452 mg・L-1;氟啶胺、嘧菌酯、腈苯唑的EC50值较大，为7.8400、8.9232、14.3743 mg・L-1。结果表明，吡唑嘧菌酯对P. clavispora的抑制效果最好，腈苯唑的抑制效果最差。

2.4 6种杀菌剂对C. acutatum的毒力测定

从表5可以看出，苯甲・丙环唑的EC50值最小，为0.0035 mg・L-1;其次为咯菌腈、吡唑嘧菌酯、嘧菌酯、腈苯唑、氟啶胺，EC50值分别为0.0038、0.0145、0.0369、0.0802、0.0984 mg・L-1。结果表明，6种药剂对尖孢炭疽菌均有较强的抑制作用，其中苯甲・丙环唑对C. acutatum的抑制效果最好，氟啶胺的抑制效果稍差。

表4 6种杀菌剂对P. clavispora的毒力回归方程

药剂名称毒力回归方程EC50

（mg・L-1）相关系数

（r）

250 g/L 吡唑嘧菌酯Y=1.2555X+7.59890.00850.9487

24% 腈苯唑Y=0.0514X+4.940514.37430.9457

25 g/L 咯菌腈Y=1.0139X+6.39200.04240.9552

500 g/L 氟啶胺Y=0.2498X+6.77507.8400 0.9507

250 g/L 嘧菌酯Y=0.1152X+6.38818.92320.9107

300 g/L 苯甲・丙环唑Y=1.4781X+6.98770.04520.9605

表5 6种杀菌剂对C. acutatum的毒力回归方程

药剂名称毒力回归方程EC50

（mg・L-1）相关系数

（r）

250 g/L 吡唑嘧菌酯Y=1.3629X+7.50410.01450.9550

24% 腈苯唑Y=0.1304X+5.14290.08020.9479

25 g/L 咯菌腈Y=0.3044X+5.73840.00380.9494

500 g/L 氟啶胺Y=0.5931X+5.59730.09840.9515

250 g/L 嘧菌酯Y=0.1377X+5.19740.03690.9432

300 g/L 苯甲・丙环唑Y=1.0588X+7.59950.00350.9612

2.5 6种杀菌剂对C. gloeosporioides的毒力测定

从表6可以看出，氟啶胺的EC50值最小，为0.0075 mg・L-1;其次为吡唑嘧菌酯、苯甲・丙环唑、咯菌腈，EC50值分别为0.0079、0.0267、0.2167 mg・L-1;腈苯唑、嘧菌酯的EC50值大，分别为97 296.0565、54 858.7470 mg・L-1。结果表明，氟啶胺对C. gloeosporioides的抑制效果最好，腈苯唑的抑制效果最差。

表6 6种杀菌剂对C. gloeosporioides的

毒力回归方程

药剂名称毒力回归方程EC50

（mg・L-1）相关系数

（r）

250 g/L 吡唑嘧菌酯Y=1.243X+7.61000.00790.9509

24% 腈苯唑Y=0.0756X+4.622997296.0565 0.9387

25 g/L 咯菌腈Y=0.3245X+5.21550.21670.9549

500 g/L 氟啶胺Y=0.4838X+6.02820.00750.9494

250 g/L 嘧菌酯Y=0.1883X+4.107654858.7470 0.9507

300 g/L 苯甲・丙环唑Y=1.3888X+7.18560.02670.9598

3 结论与讨论

本试验测定了6种杀菌剂对5种蓝莓枝枯病原菌的室内毒力，针对引起蓝莓枝枯病的病原菌较多、在田间发病症状相似的特点，应选择杀菌谱广、高效低毒的农药进行防治。根据本试验结果，吡唑嘧菌酯、咯菌腈、苯甲・丙环唑对5种病原菌均有很好的抑制作用，EC50值介于0.0035～2.2245 mg・L-1之间。并且3种药作用方式各有不同，吡唑嘧菌酯为新型甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂，作用方式为抑制病原菌线粒体呼吸;咯菌腈为新型吡咯类保护性杀菌剂，作用方式为抑制病原菌葡萄糖磷酰化有关的转移，抑制真菌菌丝体的生长;苯甲・丙环唑由两种三唑类杀菌剂组合而成，作用方式为抑制病原菌的麦角甾醇生物合成，破坏真菌细胞膜的生理作用。3种农药均具有抗菌谱较广、高效低毒的特点，为避免病原菌产生抗药性，建议3种农药轮换使用。

目前国内针对蓝莓枝枯病还没有系统性的防治措施报道。防治蓝莓枝枯病除了要加强田间水肥管理、及时清理销毁病枝外，适时使用杀菌剂化学防治也是十分快速有效的手段。枝枯病菌潜伏期长，多在温度适宜、天气潮湿的季节发病，为预防枝枯病害的发生，应在春季和夏季产果后提早喷洒药剂进行预防。本试验中筛选的3种杀菌剂室内试验对病原菌有很好的抑制作用，在田间影响因素较多，其效果还需田间验证。

参 考 文 献：

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