大黄素微乳的制备与稳定性研究

[摘要] 目的 制备大黄素微乳，并考察其稳定性。 方法 以正丁酸乙脂为油相、乙醇为助乳化剂、聚山梨酯-80为乳化剂，制备了大黄素微乳。以外观、粒径及分布、离心变化为指标，考察了其稳定性。 结果 以大黄素2 g，乙醇15 g，正丁酸乙脂15 g，聚山梨酯-80 10 g，加水50 g，制备的微乳，外观澄清透明，均一稳定。透射电镜观察为均匀球状液滴。粒径为23.2 nm，粒径与多分散系数（PI）为0.122。加速试验与留样试验对微乳稳定性无明显影响。 结论 大黄素微乳稳定性良好，微乳可作为大黄素的新型给药制剂。

[关键词] 大黄素；微乳；制备；稳定性

[中图分类号] R283.1 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2013）08（c）-0116-03

大黄素（emodin，EMO）属于天然蒽醌类衍生物，是许多中药如大黄、虎杖、何首乌的主要有效成分。大黄素具有多种药理作用，它能抗肿瘤、抗炎、抗氧化、抑菌，并且还具有抑制胰酶活性、免疫调节、保护肝肾、抑制血小板聚集、松弛血管、改善微循环、利尿、促进胃肠蠕动等，具有较好的应用价值[1-3]。

大黄素具有强亲脂性，在水中溶解度较小，从而影响了大黄素制剂的开发应用。微乳（microemulsion，ME）是一种由乳化剂、助乳化剂、油相和水相按适当比例自发形成的外观透明、液滴粒径小于100 nm、热力学稳定的体系。微乳具有各向同向性、药物分散性好、溶出度高、吸收迅速，可提高生物利用度；界面积大，表面张力低，易于通过水化层，增加穿透性，促进吸收；系统黏度低、热力学稳定，可自发形成，制备简单等特点[4]。本实验以正丁酸乙脂、乙醇、聚山梨酯-80为材料，制备了大黄素微乳，并考察了其稳定性能。

1 仪器与试药

1.1 仪器

电子分析天平（sartorius，d=0.1 mg），旋涡混合仪（XW-80A，海门其林贝尔仪器制造公司），TDL-5离心机（上海安亭科学仪器厂），透射电子显微镜（JEM1400日本电子JEOL公司），激光粒度仪（Malvern），低温高速离心机（Thermo），恒温恒湿箱（SPX-150C），磁力加热搅拌器（上海乔跃电子有限公司）。

1.2 试药

大黄素原料药（宝鸡市方晟生物开发有限公司，110726），聚山梨酯-80（天津市大茂化学试剂厂），无水乙醇（广州化学试剂厂），正丁酸乙脂（天津市大茂化学试剂厂），水为纯水。

2 方法与结果

2.1 大黄素微乳的制备[5-6]

精密称取处方量的大黄素2 g，乙醇15 g，正丁酸乙脂15 g，聚山梨酯-80 10 g，混合均匀，加水50 g，搅拌均匀，即可得到透明均一的微乳液。

2.2 微乳电镜观察

将3%的磷钨酸溶液滴到蜡板上，另将大黄素微乳滴加到铜网上，用滤纸吸取过多的样品溶液，将铜网正面朝下盖到染液上负染20 min，取出铜网，用滤纸吸取过多的染色液，在透射电镜下（200 nm视野）观察并照相，见图1，表明微乳在透射电镜观察为均匀球状液滴。

2.3 粒径测定及其分布

取3批自制的微乳，稀释约10倍后，用激光粒度测定仪测定粒径与多分散系数（PI）。结果显示3批样品的平均粒径为（23.2±0.2）nm，PI为（0.122±0.005），粒径分布范围为18.6～29.2 nm。图2结果表明粒径分布范围小，大小均匀。

2.4 稳定性研究[7-8]

2.4.1 加速试验 将大黄素微乳装于棕色西林瓶中，密封后避光在温度（40±2）℃、相对湿度（75±5）%条件下放置3个月，考察微乳的外观，粒径变化，及经10 000 r/min，10 min离心后的微乳外观变化，并与0个月结果比较，结果见表1。

结果显示，大黄素微乳在温度（40±2）℃、相对湿度（75±5）%条件下放置3个月后，其外观性状、粒径变化、经离心后外观，与0个月结果比较，没有明显变化，表明大黄素微乳稳定性良好。

2.4.2 留样试验 将大黄素微乳装于棕色西林瓶中，密封后避光在室温条件下放置6个月，于1、2、3、6月取样，考察微乳的外观，粒径变化，及经10 000 r/min，10 min离心后的微乳外观变化，并与0个月结果比较，结果见表2。

结果表明，在室温留样条件下放置6个月，大黄素微乳的各项考察指标无明显变化，表明大黄素微乳稳定性良好。

3 讨论

制备微乳最重要的是确定适宜的处方组成与组分比例，否则不能形成微乳[9]。处方筛选也是自微乳化给药系统（SMEDDS）研究的关键，乳化剂的亲水亲油平衡值（HLB）是影响自微乳给药系统成乳的一个重要指标，当HLB值在12～20时，系统易形成O/W型的微乳，本实验所用乳化剂HLB值在12～20之间，符合SMEDDS对乳化剂的要求[10]。

常用的助乳化剂多为短链醇，由于乙醇流动性好，可增强界面的柔性，使用用乙醇为助乳化剂，易于微乳的形成。同时由于助乳化剂的应用，相对减少乳化剂的用量，所以混合乳化剂的使用能降低毒性且易制得微乳[11]。在微乳体系中，只有乳化剂和助乳化剂达到最佳配比（S/CoS），即达到最佳的Km，才能形成均一稳定的微乳。本实验最终确定Km=2∶3，微乳区面积最大，并且能够形成均一、透明、稳定的微乳[6]。

大黄素为亲脂性，几乎不溶于水，溶于乙醇及碱溶液。制备中，先用助乳化剂乙醇溶解后，再加油相正丁酸乙脂与乳化剂聚山梨酯-80，最后加水相。大黄素微乳体系中，Km（乳化剂∶助乳化剂）=2∶3，乳化剂聚山梨酯-80占10.9%，助乳化剂乙醇占16.3%，油相正丁酸乙脂占16.3%，药物大黄素占2.2%，水相占54.3%[12]。

近年来评价微乳物理稳定性方法有：测定微乳的粒径和分布法、离心法、稳定指数法、浊度法、加速实验法、粘度法和计算法等，各种方法侧重点不同，应根据具体情况选择应用[7-8]。

本实验研究制备的大黄素微乳外观澄清透明，粒径为（23.2±0.2）nm，PI为（0.122±0.005）。微乳是热力学稳定体系，加速试验与留样试验结果，也说明了大黄素微乳的稳定性。本实验以微乳为给药载体，研究制备了大黄素微乳，并考察其稳定性能，为大黄素的新型给药制剂开发提供参考。

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（收稿日期：2013-07-04 本文编辑：卫 轲）