葶苈大枣桑白皮汤对兔心肌收缩力的影响

摘要：目的观察葶苈大枣桑白皮汤的强心作用。方法按均匀设计和灰色关联理论方法，根据U6*均匀设计表及使用表组成6个实验方剂，用含药血清法，观察葶苈大枣桑白皮汤对正常兔离体心脏的心肌收缩力及心率的影响，并找到该方的最佳配伍剂量。结果最佳配方和地高辛片给药后的心肌收缩力高于给药前(P＜0.01)；地高辛片给药后的心率低于给药前(P＜0.01)，最佳配方给药后心率的变化与给药前比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。结论 葶苈大枣桑白皮汤具有增强心肌收缩力的作用。

关键词：葶苈大枣桑白皮汤；含药血清法；心肌收缩力；均匀设计；灰关联分析

中图分类号：R541.6 R289.5 文献标识码：A 文章编号：1672―1349(2007)04―0314―02

充血性心力衰竭(congestive heart failure，CHF)，是临床上常见的危重症，是多数器质性心脏病病人几乎不可避免的结局[1]。该病累及2％的成年人，在世界各国的不同人群中，这个比率稳定不变。事实上，越发达的国家，CHF的发病率越高[2]。本文旨在通过动物实验所观察到的葶苈大枣桑白皮汤的强心作用。

1　材料与方法

1.1 动物湖南中医药大学实验动物中心提供。清洁级大耳白兔26只，雄性，兔龄(9～24)个月，体重(3.O～4.O)kg，分笼饲养。

1.2　药物及试剂　苦葶苈、桑白皮、大枣由湖南中医药大学附二医院药剂科提供；地高辛片：杭州赛诺菲圣德拉保民生制药有限公司出品；洛氏液：由湖南中医药大学机能实验中心配制。

1.3　主要仪器HH－WZL420型电热恒温器：北京长安新仪厂；AG204型电子天平：上海第二：天平仪器厂；sJ－42型多道生理记录仪：苏州医用电子仪器厂。

1.4　实验方剂按均匀设计[3]和灰色关联理论[4]方法，将葶苈大枣桑白皮汤中的3味药剂量各取6个水平，即苦葶苈10 g、15 g、20 g、30 g、40 g、50 g，桑白皮0 g、10 g、15 g、20 g、30 g、40g，大枣O g、5 g、10 g、15 g、20 g、30 g，根据U6*(64)均匀设计表及使用表[13]组成6个实验方剂，即A方：苦葶苈10 g，桑白皮10 g，大枣10 g；B方：苦葶苈15 g，桑白皮20 g，大枣30 g；C方：苦葶苈20 g，桑白皮40 g，大枣5 g；D方：苦葶苈30 g，桑白皮0g，大枣20 g；E方：苦葶苈40 g，桑白皮15g，大枣0g；F方：苦葶苈50 g，桑白皮30 g，大枣15 g；各药经鉴定后加水常规煎煮2次，每剂浓缩至300 mL，备用。

1.5 含药血清的制备[5] 6个实验方剂及最佳配方[相当于成人剂量300 mL/(60 kg・d)]和对照西药地高辛[相当于成人剂量0.25 rag/(60 kg・d)]，分别给8只正常兔(均为雄性白兔，重3.0 kg～5.0 kg)灌胃给药，其剂量按体型系数换算公式dB＝　计算[6]，每日1次，连续3 d，末次给药后2h从兔耳中央动脉采血，无菌分离血清，56℃水浴30 min灭活补体后，-20℃冰箱保存备用。

1.6 药物对兔心肌收缩力及心率的影响[6] 调节电热恒温器的水温，泵出的水进入冷凝管，使通过冷凝管的灌流液保持恒温38℃～39℃，冷凝管上端连接盛有洛氏液通氧的灌流瓶，下端通过橡皮管与主动脉套管相连，灌流液面的高度距主动脉根部(50～60)cm，使全部管道充满已充氧气的洛氏液后，用螺旋夹夹住。每次取正常兔1只，击后脑致昏，剪开胸腔与心包膜，轻轻提起心脏。在主动脉分枝处剪断主动脉，并剪断肺动脉、静脉和上下腔静脉，将心脏迅速取出，移至恒温充氧洛氏液中，用手轻轻挤压心脏几次，尽量洗出心脏血液。剥离主动脉，剪掉连接心脏的所有组织和血管。迅速把主动脉套在上述主动脉套管上，调节螺旋夹使灌流液流出速度约为(5～10)mL/min。用蛙心夹夹住心室尖端，以丝线通过滑轮与换能器相连，在电子计算机上记录心脏收缩曲线。其后从主动脉插管侧支缓慢注入含药血清5滴，观察它们对心肌收缩力及心率的影响。给药顺序：①6个试验方按6×6拉丁方设计；②最佳配方和西药地高辛按自身前后没计随机。

1.7 统计学处理用t检验，在SPSS 12.0软件包上计算；最优化方法，在MATLAB 7.0软件包上用序列二次规划法(SQP)计算[7]；关联度计算，参照田俊等[8]介绍的方法。

2　结　果

2.1 均匀设计实验结果A方、B方、C方给药后的心肌收缩力高于给药前(P＜0.05或P＜O.01)；6方给药后的兔离体心脏心率的变化与给药前相比，差异无统计学意义(P＞0.05)。将表2的数据输入电脑，进行二次多项式逐步回归：关于心肌收缩力的回归方程未能建立(P＞0.05)，经计算得优化处方为X1=20，X2=20，X3=10；如此，则预测值V0≥13.9。从表3可知，关于心肌收缩力，因素问的关联度为|r1|＞|r12|＞|r13|，说明苦葶苈对心肌收缩力的影响最大，其次为桑白皮和大枣。详见表1～表3。

2.2　最佳配方对兔心肌收缩力、心率的影响综合上述实验结果，结合临床用药情况，制定出最佳配方：苦葶苈20 g、桑白皮20 g、大枣10 g。经验证试验，关于心肌收缩力，Y=14.6，证明所求得的最佳配方是可信的。最佳配方和地高辛片给药后的心肌收缩力高于给药前(P＜0.01)，两者疗效相当(P＞0.05)；地高辛片给药后的兔离体心脏心率低于给药前(P＜0.01)，最佳配方给药后的兔离体心脏心率的变化与给药前相比，其差异无统计学意义(P＞0.05)。详见表4。

3　讨　论

葶苈大枣桑白皮汤来源于明・李时珍《本草纲目・草部卷十六・葶苈》[9]：“通身肿满，苦葶苈炒四两，为末，枣肉和丸梧子大，每服十五丸桑白皮汤下，日三服”。显而易见，该方由葶苈大枣泻肺汤发展而来。后者源于《金匮要略》[10]：“葶苈子熬令色黄，捣丸如弹子大(9 g)；大枣十二枚。上药先以水三升煮枣，取二升，去枣，内葶苈，煮取一升，顿服”。用于治疗“支饮不得息”和

“肺痈，喘不得卧”。葶苈大枣桑白皮汤方中，葶苈子为君，其味辛、苦，性大寒，归肺、膀胱、大肠经，功专泻肺气之实而下气定喘，又能下行逐水，兼可泄大便；桑白皮为臣，其味甘，性寒，归肺经，功能泻肺平喘，利水消肿，对君药起到辅助加强的作用；大枣为佐，其味甘，性温，归脾胃经，功能补中益气，养血安神，缓和药性，以防君药之苦寒伤胃。三药合用，共奏“泻肺平喘，利水消肿”之功。

现代药理研究证实[11]，葶苈子主要含强心甙类(如毒毛旋花子甙配基、葶苈甙等)、异硫氰酸类和脂肪酸，具有强心、抗菌、抗肿瘤、平喘和利尿等作用；大枣含有三萜类皂甙、生物碱、黄酮类、大量糖类、环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cCMP)、氨基酸、维生素、有机酸、黏液质及微量元素，具有抗变态反应、镇静、降压、抗肿瘤、保肝、抗疲劳、促生长、抗衰老等作用；桑白皮中主含黄酮类化合物(如桑根皮素、桑素、桑皮色烯素等)、二氢黄酮类化合物(如桑根酮)、香豆精类、多种糖类、软脂酸等成分，具有降压、利尿、镇静、镇痛、抗炎、抗菌、抑制血小板聚集、轻度镇咳等作用。

本研究表明，葶苈大枣桑白皮汤能够增强正常兔离体心脏的心肌收缩力，具有强心作用。

参考文献：

[1]　陈国伟，郑宗锷．现代心脏内科学[M]．长沙：湖南科学技术出版社，1994：585―588．

[2]　Cowie MR，Mosterd A，wood DA．et al．The epidemiology of heartfailure[J]．Eur Heart J，1999，18：218―225．

[3] 方开泰．均匀设计与均匀设计表[M]．北京：中国科学出版社，1994：2―6．

[4]　谭学瑞，邓聚龙．灰关联分析－医学多因素分析新法[J]．数理医药学杂志，1996，9(1)：14―16．

[5]　崔晓兰，贺玉琢，高英杰，等．中药复方血清药理研究方法学探讨[J]．中国实验方剂学杂志，1998，4(2)：13―15．

[6]　陈奇．中药药理研究方法学[M]．北京：人民卫生出版社，1993：393；414―415．

[7]　苏金明，阮沈勇，王永利．MATLAB工程数学[M]．北京：电子工业出版社，2003：80―82．

[8] 田俊，孙昌盛，张新耕．灰关联分析应用于因素分析时关联度指标的改进[j]．中国卫生统计，1997，14(2)：13―16．

[9]　明・李时珍．本草纲目(校点本)[M]．北京：人民卫生出版社，1997：1067．

[10]　盂如．金匮要略选读[M]．上海：上海科学技术出版社，1997：82．

[11]　梅全喜，毕焕新．现代中药药理手册[M]．北京：中国中医药出版社，1998：185；188；537．

作者简介：陈跃飞(1962―)，男，毕业于湖南中医药大学，副教授，医学博士，副主任医师，副教授，现工作于湖南中医药大学附二医院(邮编：410005)；江秋玉、陈大舜，工作于湖南中医药大学附一医院。

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