300例HBsAg携带者HBV―DNA检测与分析

摘要：目的：探讨HBsAg携带者HBV-DNA与血清HBV免疫标志物的关系，为临床诊治提供更准确的依据。

方法：选取300例hbsag携带者，检测定量检测hbv-dna和血清HBV免疫标志物。

结果：性别之间HBV-DNA检测结果阳性率差异无统计学意义（P>0.05）。大三阳及HBsAg（+）、HBeAg（+）者HBV-DNA阳性率及定量平均值均显著高于其他模式患者，差异有显著性（P

结论：定量检测HBV-DNA较HBV血清免疫标志物更准确反映HBV的存在、复制状态以及传染性的大小，为临床诊治提供重要依据。

关键词：乙型肝炎病毒 HBV-DNA HBV免疫标志物 HBsAg携带者

【中图分类号】R-1 【文献标识码】B 【文章编号】1671-8801（2013）10-0561-01

1 资料与方法

1.1 研究对象。2010年6月～2013年6月，收集在我疾控中心检查确诊为HBsAg携带者300例，其中男187例、女113例，年龄18～59周岁，平均（32.45±7.03）岁。患者均排除丙型肝炎病毒、酒精及药物等因素所致的肝损害，以及2周内应用抗病毒药物、1个月内应用激素或免疫抑制剂等患者。

1.2 标本采集。所有患者均于空腹清晨8时抽血，采集静脉血5ml，进行HBV血清标志物及HBV-DNA定量检测。

1.3 HBV血清标志物检测。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb及HBcAb，试剂盒由上海阿尔法生物技术有限公司生产，仪器使用上海科华KHB-ST-360酶标仪，DEM-Ⅲ型自动酶标洗板机，严格按照试剂盒及仪器操作说明进行。

1.4 HBV-DNA定量检测。HBV-DNA采用荧光定量PCR方法检测，结果以>103copies/ml为判定阳性的标准，DA-7600实时荧光定量PCR仪及试剂盒均由中山大学达安基因股份有限公司生产，操作步骤严格按照说明书进行。

1.5 统计学处理。采用SPSS11.5软件进行数据统计分析，率的比较采用X2检验，计量资料比较采用t检验，以P≤0.05时为差异有显著性。

2 结果

2.1 性别分布。300例HBsAg携带者HBV-DNA检测结果阳性186例，阳性率62.00%；其中男122例，阳性率65.24%（122/187）；女64例，阳性率56.64%（64/113），性别之间HBV-DNA检测结果阳性率差异无统计学意义（P>0.05）。

2.2 HBsAg携带者HBV血清标志物模式与HBV-DNA检测结果。大三阳（HBsAg、HBeAg、抗HBc阳性者）及HBsAg（+）、HBeAg（+）患者HBV-DNA阳性率及定量平均值均显著高于其他模式患者，差异有显著性（P

3 讨论

HBV血清免疫学标志物传统的检测方法是ELISA法，该法简便易行，检测结果能够较为准确地反映机体对HBV的免疫反应状态，基本上能满足临床诊断的需要。该法实际检测的是机体对HBV的免疫应答状态，并不能够量化反映HBV的存在状态和复制情况，有一定的局限性，并且敏感性及特异性较低[2]。近年来，随着分子生物学技术和聚合酶链式反应（PCR）技术的发展与成熟，在临床上得到广泛应用。有文献报道，采用定量PCR技术检测HBV-DNA，具有灵敏度高、特异性好，能够准确把握HBV的复制水平、病程变化、治疗恢复情况以及准确判定血清有无感染等状况[3]。我们对300例HBsAg携带者HBV-DNA定量检测结果与血清HBV免疫标志物进行分析，结果显示，大三阳及HBsAg（+）、HBeAg（+）者HBV-DNA阳性率及定量平均值均显著高于其他模式者，表明此两种模式HBsAg携带者体内HBV复制活跃，具有很强的传染性。HBeAg（+）者HBV-DNA阳性率高于HBeAg（-）者，表明HBeAg阳性与HBV-DNA定量检测结果明显相关。虽然HBeAg作为HBV复制的标志物具有较好的灵敏度及较高的特异性，能反映体内HBV复制增殖水平[4]，但是HBeAg的阳性也不能绝对代表HBV病毒在肝细胞的复制水平，如大三阳者HBV-DNA定量检测中仍然有2.34%的标本为阴性，可能原因为HBeAg阳性者体内病毒低水平复制，导致HBV-DNA定量检测结果为阴性。HBsAg阴性的小三阳及其他一些模式下也检测到HBV的复制，所以当患者血液中HBeAg消失并不能代表病毒已经停止了复制，可能是复制水平低而已。总之，定量检测HBsAg携带者HBV-DNA能够直接反映HBV的存在、复制状态以及传染性的大小，可以动态判断患者病情变化，值得临床推广应用。

参考文献

[1] 秦雯，董慧珠.乙型肝炎两对半和HBV-DNA定量检测的临床应用[J].检验医学与临床，2008，5（22）：1353

[2] 黄超群，杨小兰，黄春花，等.乙型肝炎血清学标志物与HBV-DNA含量关系的探讨[J].医学理论与实践，2009，22（6）：629-632

[3] 魏俊妮，王素萍，冯永亮.母血HBV-DNA含量与新生儿HBV感染关系[J].中国公共卫生，2010，26（1）：98-99