止泻奇效散的制备和质量控制

摘要：目的：探讨止泻奇效散的制备工艺和质量标准。方法：该制剂中主要中药成分的定性鉴定用显微鉴定法，主要有效成分的鉴定用薄层层析法，葛根的含量测定用高效液相色谱法。结果：该制荆制备工艺合理，质量稳定、可控。结论：本方法简便易行，准确可靠，重现性好，可用于该制荆的质量控制。

关键词：止泻奇效散；制备工艺；质量控制；显微鉴定；薄层层析鉴定；高效液相色谱法

中图分类号：R282.4　文献标识码：A　文章编号：1673-7717(2007)11-2416-03

乳婴腹泻是一种常见的慢性病症，若不及时控制，则可能导致生长发育障碍，卫生部已将其列为儿科重要“四防病”之一。本课题组根据临床经验，提出“母婴兼治法”，以西洋参、茯苓等为主药组成“止泻奇效散”治疗本病，取得满意疗效。现将止泻奇效散的制备和质控研究报道如下。

1　仪器试药

Waters 1525高效液相色谱仪和2487双通道紫外可见光检测器(美国Waters公司)，sB-3薄层色谱仪(天津天分分析仪器厂)，JBT／C―YCLS00T／3P(D)超声波药品处理机(济宁金百特公司)，SH10A水分快速测定仪(上海恒平公司)，FA1004电子分析天平(上海恒平公司)，YHC,600-S远红外快速干燥箱(上海三浦医疗设备公司)，DC100不锈钢高速粉碎机(浙江丰华药机厂)，XS-402生物显微镜(江南永新光学有限公司)，DSH-双螺旋锥形混合机(上海升立混合机厂)。

西洋参、茯苓等处方中药材购自张仲景国医学院饮片场，经本院中药鉴定教研室鉴定确认；西洋参、苍术、诃子、山楂、木香等中药材对照品由河南哈森药业公司提供；葛根素、没食子酸、熊果酸标准品由南京天源生物公司生产；含量测定所用试剂为色谱纯，其他试剂均为分析纯。

2　制备方法

2.1　处方组成

西洋参900g，茯苓900g，炒白术500g，葛根300g，炒苍术600g，车前子300g，泽泻300g，炒诃子500g，乌梅200g，焦山楂600g，鸡内金600g，神曲300g，木香200g。

2.2　制备工艺

处方中各药按有关规定进行净选、炮制后，苍术、木香于50℃烤箱内烘烤4h，余药于70℃烤箱内烘烤3h，自然放凉。西洋参、车前子、乌梅、鸡内金分别单独粉碎，余药混合粉碎，均过5号筛，所得细粉置混合机内混合30min后，紫外线照射灭菌3h，按每袋30g分装，密封。每天2次，每次1袋。

3 质量控制

3.1　性状

本品为棕褐色的粉末，气香，味甘、苦，微涩。

3.2　显微鉴别

取本品，置显微镜下观察：树脂道内含金黄色油滴状物和少量橙红色条块状分泌物；分泌细胞含油滴状或颗粒状物。油室类圆形。不规则分枝状团块，无色，遇水合氯醛试液溶化；菌丝无色或淡棕色，细长，稍弯曲，有分枝，直径3～8μm。草酸钙簇晶直径17～78μm，棱角多尖锐；针晶细小，长10～32μm，存在于薄壁细胞中；纤维周围细胞含草酸钙方晶，形成晶纤维，含晶细胞壁厚薄不一，木化。菊糖表面显放射状纹理。木纤维多成束，长梭形，纹孔口横裂缝状、十字状或人字状。淀粉粒单或复粒，脐点多点状、裂缝状、一字状或人字状等。石细胞不规则形，有的与木栓细胞连接。木栓细胞表面观类多角形、类长方形或类方形，壁薄，细波状弯曲，栓内层细胞纵断面观可见径向排列的纹孔。内胚乳细胞壁甚厚，充满细小糊粉粒。网纹导管直径23～40μm，具缘纹孔六角形或椭圆形，排列比较紧密。非腺毛单细胞或2―5个细胞组成，表面有螺纹交错的纹理，基部稍圆或略平直。

3.3　薄层层析鉴别

①取本品8g，加三氯甲烷200mL，加热回流1h，放冷，滤过，弃去三氯甲烷，药渣挥尽溶剂，加甲醇50mL，加热回流1h，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水20mL使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20mL，合并正丁醇液，用0.1mol／LNaOH溶液洗涤2次，每次20mL，再用正丁醇饱和的水20mL洗涤，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1mL使溶解，作为供试品溶液。另取西洋参对照药材1g，同法制成对照药材溶液。再取拟人参皂苷F11。、人参皂苷Rb1、Re1、Rg1。对照品，加甲醇制成每1mL各含2mg的溶液，作为对照品溶液。照药典薄层色谱法试验，吸取上述6种溶液各2μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿－醋酸乙酯－甲醇－水(15:40:22:10)5～10℃放置12h的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，分别置日光及紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，分别显相同颜色的斑点或荧光斑点。

②取本品4g，加乙醚20mL，超声处理(功率250W，频率33kHz，时间15min，下同)，滤过，滤液挥干，残渣加乙醇1mL使溶解，作为供试品溶液。另取木香对照药材0.5g，同法制成对照药材溶液。吸取上述两种溶液各5μL，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以环己烷一乙酸乙酯(9:1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

③取本品4g，加乙醚20mL，超声处理，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯1mL使溶解，作为供试品溶液。另取苍术对照药材0.5g，同法制成对照药材溶液。吸取上述两种溶液各5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60～90℃)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％对二甲氨基苯甲醛的10％硫酸溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的暗绿色斑点。

④取本品4g，加乙酸乙酯20mL，超声处理，滤过，滤液浓缩至5mL，作为供试品溶液。另取诃子对照药材1g，同法制成对照药材溶液。再取没食子酸对照品，加乙酸乙酯制成每1mL含0.3mg的溶液，作为对照品溶液。吸取上述3种溶液各5μL，分别点于同一以羧甲基纤维紊钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸(6：4:1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2％三氯化铁乙醇溶液。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色普相应的位置上，显相同颜色的斑点。

⑤取本品4g，加乙醚20mL，超声处理，滤过，滤液挥干，残渣加甲乙醇1mL使溶解，作为供试品溶液。另取葛根素对照品，加无水乙醇制成每1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液。吸取上述两种溶液各5μL，分别点于同一以0.2％羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，

以三氯甲烷-甲醇-水(28:10:1)为展开剂，展开，取出，晾干，置氨蒸汽中熏15min，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

⑥取本品4g，加甲醇20mL，超声处理，滤过；取滤液2mL蒸干，残渣加乙酸乙酯4mL使溶解，超声处理，滤过，滤液作为供试品溶液。另取山楂对照药材1g，同法制成对照药材溶液。再取熊果酸对照品，加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液。吸取上述供试品溶液8μL、对照药材溶液及对照品溶液各2μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯一乙酸乙酯-甲酸(20:4:0:5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以硫酸乙醇(110)溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，分别置日光及紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，分别显相同颜色的斑点；紫外光下显相同颜色的荧光斑点。

3.4　含量测定

高效液相色谱法。①色谱条件与系统适应性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇一0.025mol／L磷酸溶液(取磷酸0.7mL，置1000mL量瓶中，加水约800mL、三乙胺1.8mL，再加水至刻度，摇匀)(20：80)为流动相；柱温为40℃；检测波长为250nm；理论板数按葛根素峰计算应不低于4000。②对照品溶液的制备：取葛根素对照品适量，精密称定，加30％乙醇制成每1mL含22p,g的溶液，即得。③供试品溶液的制备：取本品1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加人30％乙醇50mL，密塞，称定重量，超声处理(功率250W，频率33Hz)30min，放冷，再称定重量，用30％乙醇补足减失的重量，摇匀，取上清液，滤过，取续滤液，即得。④测定法：分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各5μL，注入液相色谱仪，测定，即得。

本品每1袋含葛根以葛根素(C21H20O9)计，不得少于33mg。

3.5　检查

应符合药典附录IB散剂项下的各项规定。①均匀度：取本品适量置光滑纸上，平铺约5cm2，将其表面压平，在亮处观察，应呈现均匀的色泽，无花纹、色斑。②水分：取本品按药典水分测定法测定，不得超过9％。③微生物限度：按药典微生物限度检查法检查，应符合规定。

4　稳定性考察

按中药稳定性实验要求，本品室温存放，温度15～30℃，相对湿度50％～90％，对不同批号的3批止泻奇效散进行3个月、1年、2年的稳定性考察，检验项目包括性状、鉴别、均匀度、水分及菌检。

结果表明，检品2年内均无明显变化，符合质量标准规定。

5 讨论

乳要腹泻是一种常见的慢性迁延性病症，用药周期较长。止泻奇效散以水冲服，起效快，易于吸收，使用方便，大大减轻了用药过程中的负担，乳母对其有较好的依从性。该制剂制作简便，携带方便，节省药材和经费开支而疗效不减，深受患者欢迎。

处方中苍术、木香含挥发油，干燥温度不宜超过50℃，以免有效成分散失。本品由原药材制成，除掉杂质和灭菌较为困难，在制作过程中要对原药材进行预处理，按照卫生学的操作规程进行生产，并改进包装使之能较长时间保存而不霉变或腐烂。只有严格按照中国药典的规定搞好散剂的制备和储存，提高药品质量控制水平，才能发挥其在临床上的使用效果。

在含量测定中，比较了超声处理、回流提取、索氏提取3种不同方法，结果表明采用超声处理测得含量明显高于另外二法，故选择超声提取。