香蕉枯萎病诱导抗性的小区试验

摘要：在田间小区栽培的香蕉苗上，接种串珠镰刀菌（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｍｏｎｉｌｉｆｏｒｍｅ）、喷施饱和石灰水和无菌水７ ｄ后，接种尖孢镰刀菌（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ），测定过氧化物酶（ＰＯＤ）、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、过氧化氢酶（ＣＡＴ）活性。结果表明，饱和石灰水能够诱导香蕉植株对尖孢镰刀菌产生抗性，串珠镰刀菌与尖孢镰刀菌复合侵染，加重了病害的发生。

关键词：香蕉枯萎病；石灰水；串珠镰刀菌；尖孢镰刀菌；诱导抗性

中图分类号：Ｓ４３６．６８ 文献标识码：Ａ 文章编号：0439－８114（２０12）16－3485-03

Field Plot Test on Induced Resistance of Banana Fusarium Wilt

ＷＡＮＧ Ｆａｎｇ，ＬI Ｊｉｎｇ，ＴＡＮＧ Ｂｉ－ｔａｏ

（Ｆｏｓｈａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ， Foshan ５２８０００，Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ，China）

Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｉｎ ｔｈｅ ｆｉｅｌｄ ｐｌｏｔ ｔｅｓｔ， ｂａｎａｎａ ｐｌａｎｔｓ ｗｅｒｅ ｔｒｅａｔｅｄ ｗｉｔｈ Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｍｏｎｉｌｉｆｏｒｍｅ，ｓａｔｕｒａｔｅｄ ｌｉｍｅｗａｔｅｒ ａｎｄ ｓｔｅｒｉｌｅ ｗａｔｅｒ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ ａｎｄ ｉｎｏｃｕｌａｔｅｄ ｗｉｔｈ Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ ７ ｄａｙｓ later； ａｎｄ ｔｈｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ （ＰＯＤ）， ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ ｄｉｓｍｕｔａｓｅ （ＳＯＤ）， ｃａｔａｌａｓｅ （ＣＡＴ）ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｌｉｍｅｗａｔｅｒ ｃould ｉｎｄｕｃｅ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｏｆ ｂａｎａｎａ ｔｏ Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ. Cｏｍｐｌｅｘ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｂｏｔｈ Ｆ． ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ ａｎｄ Ｆ． ｍｏｎｉｌｉｆｏｒｍｅ ａｇｇｒａｖａｔｅｄ ｄｉｓｅａｓｅｓ ｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅ．

Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： banana Fusarium wilt； ｌｉｍｅｗａｔｅｒ； Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｍｏｎｉｌｉｆｏｒｍｅ； Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ； ｉｎｄｕｃｅｄ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ

香蕉枯萎病是由尖孢镰刀菌古巴专化型［Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ ｆ．ｓｐ．ｃｕｂｅｎｓｅ（ＦＯＣ）］引起的香蕉毁灭性病害，防治困难［１］，被列为我国进口检疫对象［２］，所谓的“蕉癌”即是香蕉枯萎病［３］，国内最早于１９６０年在广西的西贡蕉上发现此病［４］，２００７年该病导致海南、广东地区多数蕉农损失惨重。加强香蕉枯萎病的防治迫在眉睫，目前主要防治方法有严格执行检疫制度，限制蕉苗和马尼拉麻苗及其所附带的土壤由病区输入；选栽无病种苗和抗病品种；隔离病区，毁灭病株；病土处理；施用杀菌药剂。生物防治作物病害越来越受到人们的重视［５］，从香蕉地土壤中分离到对香蕉枯萎病有抑制作用的拮抗菌，并对其抑菌作用进行测定，开发防治香蕉枯萎病的生防制剂是今后研究和开发的方向之一。试验以串珠镰刀菌（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｍｏｎｉｌｉｆｏｒｍｅ）、饱和石灰水作为诱导因子，模拟大田条件，通过对相关酶的活性的测定［６］，研究香蕉枯萎病的诱导抗性，探索香蕉枯萎病诱导抗病性的生理指标。

１ 材料与方法

１．１ 试验材料

１．１．１ 供试菌种及石灰水 串珠镰刀菌、尖孢镰刀菌，由佛山科学技术学院生命科学学院试验基地植物病理实验室提供；饱和石灰水为实验室自制。

１．１．２ 香蕉苗 由佛山科学技术学院生命科学学院试验基地提供，组培苗，田间小区栽培。

１．１．３ 培养基 马铃薯葡萄糖琼脂（ＰＤＡ）培养基、玉米粒培养基。

１．２ 试验方法

１．２．１ 孢子悬浮液的配制和接种 菌种经PDA培养基活化培养后，接入玉米粒培养基。取１００ ｇ玉米粒培养基培养１５ ｄ的菌落，加入１ ０００ ｍＬ无菌水，１０ ０００ ｒ／ｍｉｎ离心５ ｍｉｎ，取出孢子悬浮液备用。

试验设３个处理，１０次重复。处理采用喷洒方式，处理１为无菌水（对照），处理２为串珠镰刀菌孢子悬浮液，处理３为饱和石灰水。处理７ ｄ后接种尖孢镰刀菌孢子悬浮液，采用土壤接种方法。

１．２．２ 酶的提取与活性测定 接种尖孢镰刀菌孢子悬浮液后第七天进行酶的提取与活性测定。取香蕉叶片为试验材料，测定酶活性，３次重复。

过氧化物酶（ＰＯＤ）的提取与活性测定方法参照文献［６］，以每克鲜样品酶液每分钟ＯＤ470 nm变化１．０为１个酶活单位（Ｕ）。

ＰＯＤ活性（Ｕ）＝■。式中，ｔ：反应时间（ｍｉｎ）；VT：样液总体积（ｍＬ）；V１：测定时样品用量（ｍＬ）；ＦＷ：样品鲜重（ｇ）。

超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）的提取与测定方法参照文献［３］，以每克鲜样品酶液抑制ＮＢＴ光化还原５０％为1个酶活单位（Ｕ）。

ＳＯＤ活性（Ｕ）＝■。式中，A0：对照管的ＯＤ值；ＡＳ：样品管的ＯＤ值；VT：样液总体积（ｍＬ）；V１：测定时样品用量（ｍＬ）；ＦＷ：样品鲜重（ｇ）；t：反应时间（min）。

过氧化氢酶（ＣＡＴ）的提取与测定方法参照文献［３］，以每克鲜样品酶液每分钟OD２４０ nm减少０．１为１个酶活单位（Ｕ）。

ＣＡＴ活性（Ｕ）＝■。式中，ｔ：反应时间（ｍｉｎ）；VT：样液总体积（ｍＬ）；V１：测定时样品用量（ｍＬ）；ＦＷ：样品鲜重（ｇ）。

２ 结果与分析

２．１ ３个处理的ＰＯＤ活性

３个处理香蕉植株的ＰＯＤ活性测定结果见图１。串珠镰刀菌、饱和石灰水及对照３个处理的ＰＯＤ活性随反应时间的延长均呈下降趋势。反应１ ｍｉｎ各处理的情况为，饱和石灰水３４．５６ Ｕ，串珠镰刀菌１７．９２ Ｕ，对照３２．６０ Ｕ；反应２ ｍｉｎ各处理的情况为，饱和石灰水３３．６２ Ｕ，串珠镰刀菌１６．８５ Ｕ，对照３１．２５ Ｕ；反应３ ｍｉｎ各处理的情况为，饱和石灰水３０．８２ Ｕ，串珠镰刀菌１４．３９ Ｕ，对照 ２６．５０ Ｕ；反应４ ｍｉｎ各处理的情况为，饱和石灰水２９．９６ Ｕ，串珠镰刀菌１３．７６ Ｕ，对照２３．５９ Ｕ；反应５ ｍｉｎ各处理的情况为，饱和石灰水２８．７６ Ｕ，串珠镰刀菌１３．０５ Ｕ，对照１８．５４ Ｕ。饱和石灰水处理的ＰＯＤ活性明显高于对照，而串珠镰刀菌处理的低于对照。