强化肠内营养对肝硬化大鼠肝功能的影响

【摘要】 目的 探讨部分营养成分强化肠内营养对肝硬化大鼠肝功能的影响。方法 用硫代乙酰胺制作肝硬化大鼠模型，随机分为正常饮食的对照组，和应用支链氨基酸、谷氨酰胺、胆酸强化肠内营养的试验组，检测肝功能主要指标和血浆内毒素水平对比分析。结果 试验组较对照组血清谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）、总胆红素（TBIL）、血浆内毒素水平均显著下降（P

【关键词】肝硬化；肠内营养；支链氨基酸；谷氨酰胺；胆酸

肝硬化的综合治疗涉及多个方面，营养支持是其中重要的一项治疗措施，但容易被忽视，或应用不当，不合理的营养支持甚至会引起肝功能障碍[1]。本文利用肝硬化大鼠模型就此进行一些探讨研究，应用支链氨基酸、谷氨酰胺和胆酸联合强化肠内营养，观察其对肝硬化大鼠的肝功能和血浆内毒素水平的影响，探究选择性强化肠内营养的方案及其在肝硬化治疗中的价值，以期找到一个简便易行，而又合理的营养支持措施。

1 材料与方法

1.1 材料 动物：清洁级SD雄性大鼠18只，6周龄，体重（230±10）g，徐州医学院实验动物中心提供。实验动物生产许可证号SCXK（苏）20100003，使用许可证号SYXK（苏）20100011。药品：戊巴比妥钠（中国医药（集团）上海化学试剂公司）、硫代乙酰胺（thioacetamide，TAA）（上海士锋生物科技有限公司）、支链氨基酸和谷氨酰胺（无锡一诺化工产品有限公司）、熊去氧胆酸（上海恒远生化试剂公司）。

1.2 肝硬化大鼠模型和分组 应用硫代乙酰胺（thioacetamide，TAA）造模[2]，用0.03%TAA溶液代替大鼠饮用水，自由进食12周制备肝硬化模型，终末有3只濒死状态去除，剩余大鼠恢复清洁自来水饮水2周。随机取7只一组分为两组，分别移至清洁新笼适应1 d开始试验。两组随机编为A组（对照组）和B组（试验组），在自由饮水和进食的基础上，B组给予营养强化，2次/d营养液灌胃，连续一周。营养液组成：支链氨基酸（1.8 ml/100 g体重）、谷氨酰胺（1.0/100 g体重）、以及占比0.2%的胆酸。A组予同量同次生理盐水灌胃作为对照。试验结束后首先给大鼠称重记录，然后用1%戊巴比妥钠（0.3 ml/100 g体重）腹腔注射麻醉，固定于手术台上，手术部位用碘伏消毒，打开腹腔暴露肝脏，将胃挪开稍翻转肝脏，在肝门与肠道之间找到颜色暗的粗血管即门静脉，用一次性无菌无热原污染真空采血管（含少许抗凝剂）由门静脉采血4 ml，进行3000rpm/min离心1 min，分离血浆、血清待测。

1.3 检测指标 ①肝功能测定：自动生化分析仪（HRTACHR7600）测定血清谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）、碱性磷酸酶（ALP）、总胆红素（TBIL）、白蛋白（ALB）浓度、前白蛋白（preALB）浓度。②血浆内毒素（endotoxin）检测：采用显色基质鲎试剂盒，操作步骤按其说明书进行。结果以Eu/ml表示。③记录试验后两组大鼠体重。

1.4 统计学方法 计量资料以均数±标准差（x±s）表示，应用简明统计分析软件t检验方法检验。

2 结果

2.1 A组和B组肝功能结果比较 见表1。

B组（试验组）与A组（对照组）比较，ALT、AST、TBIL显著降低，preALB明显提高，ALB无明显变化。

2.2 A组和B组内毒素和体重结果 见表2。

3 讨论

肝硬化的营养不良表现是多方面的，低蛋白血症及氨基酸失衡是其中重要的一个方面，支链氨基酸减少而芳香族氨基酸增多，是诱发肝性脑病的原因之一。同时氨基酸成分的紊乱又影响蛋白质的合成，而内源性蛋白质的降解进一步加剧低蛋白血症，形成恶性循环[3]。本研究强化了肝硬化大鼠的支链氨基酸营养，试验组前白蛋白水平得到提高，说明该营养方案有利于蛋白合成，而白蛋白没有显著变化。可能与前白蛋白半衰期较白蛋白短，而试验时间不够长有关，而前白蛋白更能敏感反应肝脏合成功能。研究表明肝硬化伴随着肠屏障功能的损伤[4]，肝硬化时肠上皮细胞微绒毛稀疏、排列不整齐并有部分缺如，而且上皮细胞间紧密连接开放。部分线粒体肿胀，基质密度降低，嵴减少。肝硬化使肠黏膜发生一系列的变化导致其屏障功能受损[5]。谷氨酰胺是肠上皮细胞增殖的重要原料，是肠道修复的主要营养物质[6]。血中内毒素水平与肠黏膜屏障的通透性密切相关[7]，本研究显示，含谷氨酰胺的营养强化干预措施降低了肝硬化大鼠的血浆内毒素水平，说明应用谷氨酰胺可减轻肝硬化的肠屏障功能损伤。肝硬化时胆汁分泌可显著减少[8]，研究表明如增加肠内胆酸含量则有利于肝功能改善[9]，对营养支持有益，也有益于抑制肠内细菌过生长。本研究的肠内营养强化方案就包含了胆酸成分，肝功能的改善结果也是令人满意的。这一营养强化方案方便易行、价格低廉，值得在临床进一步研究推广。

参 考 文 献

[1] 谢钢，李运景.全胃肠外营养长期应用引起的肝损害.药物不良反应杂志，2007，9（5）：335338.

[2] 罗时敏，谭卫民，庄思敏，等.硫代乙酰胺诱导的肝硬化大鼠蛋白质代谢变化.中国医师杂志，2005，7（7）：919921.

[3] Ikeda S，Kudsk KA，Fukatsu K，et al. Enteral feeding preserves mucosal immunity despite in vivo MAdCAM1 blockade of lymphocyte homing.Ann Surg，2003，237（5）：677685.

[4] 陈渝萍，钟转华，梁月环，等.微生态制剂对肝硬化患者肠屏障功能影响及疗效观察.临床消化病杂志，2010，22（4）：204207.

[5] 李建红，霍丽娟，高峰.谷氨酰胺对肝硬化大鼠肠屏障功能的保护作用.中国药物与临床， 2013，13（3）：305307.

[6] 果磊，黄崇本.谷氨酰胺在肠道的代谢及其作用.中国药房，2005，16（4）：305307.

[7] 高青芳，马小美，刘虹.血必净对肠源性内毒素血症引起的急性肝损伤的保护作用.中国药物与临床，2010，13（3）：775777.

[8] Raedsch R，Stiehl A，GundertRemy U，et al. Hepatic secretion of bilirubin and biliary lipids in patients with alcoholic cirrhosis of the liver. Digestion，1983，26（2）：8088.

[9] 罗时敏，谭卫民，罗建威，等.含胆酸的肠内营养在肝硬化大鼠肝切除术后的应用.中华普通外科学文献，2009，3（3）：204207.