HPLC法测定安胎益母丸中芍药苷的含量

[摘要] 目的 建立安胎益母丸中芍药苷的含量测定方法。方法 采用RP-HPLC法，以乙腈-水（15∶85）为流动相，检测波长为230nm。结果 芍药苷在（15.40～154.00）μg/mL（r=0.9999）范围内线性关系良好，平均回收率为99.6%，RSD为0.64%（n=6）。结论 本文方法简便可靠，专属性强，重复性好，可用于安胎益母丸的质量控制。

[关键词] HPLC；安胎益母丸；芍药苷

[中图分类号] R927.2 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2011）34-90-02

Determination of Paeoniflorin in Antai Yimu Pill by HPLC

WANG Zhengyu ZHAO Xiangyang

Suzhou Institute for Food and Drug Control in Anhui Province，Suzhou 234000，China

[Abstract] Objective To establish the methods of determination of paeoniflorin in Antai Yimu Pill. Methods HPLC was used and acetonitrile-water（15∶85） mixture as a mobile phase. The detection wavelength was set at 230nm. Results Paeoniflorin showed a good linear relationship at a ranger of （15.40-154.00）μg/mL，（r=0.9999）. The average recovery was 99.6%，and RSD was 0.64%（n=6）. Conclusion The method is simple with good reproducibility and can be used in quality control of Antai Yimu Pill.

[Key words] HPLC；Antai Yimu Pill；Paeoniflorin

安胎益母丸是卫生部中药成方制剂第十二册的品种，由益母草、香附、川芎、当归、续断、艾叶、白芍、白术等17味中药组成，具有调经、活血、安胎的功效，用于气血两亏、月经不调、胎动不安。本研究参考相关文献[1-5]对处方中的白芍建立了含量测定方法，为有效控制该药物的内在质量提供了专属性强、操作简便、快速、准确的方法，现报道如下。

1 仪器与试药

1.1 仪器

Agilent 1260高效液相色谱仪；十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱；1260VWD紫外可变波长检测器；Agilent C18色谱柱；梅特勒AB-135S电子分析天平（0.01mg）。

1.2 试药

芍药苷对照品（中国药品生物制品检定所，批号：110736-200732）；安胎益母丸（安徽雪枫制药厂，批号：20090703，20090904， 20091003）。试剂：水为纯化水，乙腈为色谱纯，甲醇为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件及系统适用性试验

色谱柱：Agilent C18（4.6mm×150mm；5.0μm）；流动相：乙腈-水（15∶85）；流速：1.0mL/min；检测波长为230nm；进样量：10μL。

2.2 对照品溶液的制备

精密称取芍药苷对照品适量（置P2O5干燥器中真空干燥24h），加甲醇制成每1mL含芍药苷0.154mg的溶液。

2.3 供试品溶液的制备

取本品研细，精密称取4g，置锥形瓶中，精密加甲醇50mL，密塞，称定重量，超声处理30min，用甲醇补足减失的重量，滤过，取续滤液，经0.45μm微孔滤膜过滤，即得供试品溶液。同法，制得不含白芍的阴性对照液。

2.4 阴性对照试验

按照本品的处方、制法制备不含白芍的模拟样品，按供试品溶液制备方法制成白芍阴性对照溶液，将芍药苷对照品溶液、供试品溶液和白芍阴性对照溶液分别注入高效液相色谱仪进行测定，结果表明处方中其它成分不干扰芍药苷的测定。见图1。

2.5 线性关系考察

精密吸取对照品溶液1、2、4、6、8、10μL注入液相色谱仪进行分析。以芍药苷峰面积值为纵坐标，进样量为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程Y=1164.60X+28.14，r=0.9999。结果表明芍药苷在（0.154～1.54）μg/mL范围内呈良好的线性关系。

2.6 精密度试验

取同一供试品溶液（批号：20090703），精密量取10μL，注入液相色谱仪，重复进样5次，测定峰面积，结果芍药苷峰面积RSD为0.45%（n=5），表明精密度良好。

2.7 稳定性试验

取同一供试品溶液（批号：20090703），每隔2h进样10μL，依法测定芍药苷峰面积值，RSD为芍药苷0.36%（n=6），结果表明供试品溶液在12h内稳定。

2.8 加样回收率试验

精密称取已知含量的安胎益母丸（批号：20090703）6份，分别精密加入芍药苷对照品适量，精密加50mL甲醇，按含量测定方法制备供试品溶液，依法测定，计算回收率。见表1。

2.9 样品测定

取本品研细，精密称取4g，置锥形瓶中，精密加甲醇50mL，密塞，称定重量，超声处理30min，用甲醇补足减失的重量，滤过，取续滤液，经0.45μm微孔滤膜过滤，精密量取10μL，注入液相色谱仪，计算芍药苷含量。见表2。

3 讨论

3.1 测定波长的选择

取本品供试品溶液，经紫外分光光度计全波长扫描，发现在230.1nm处吸收强度大，确定230nm为检查波长。

3.2 流动相的选择

试验摸索阶段分别用乙腈-水（15∶85）、甲醇-水-冰醋酸（15∶90∶1.0）、乙腈-0.05%冰醋酸（17∶83）为流动相进行试验，考察了分离度、理论塔板数等情况，综合考虑以乙腈-水（15∶85）为流动相时，芍药苷分离效果和适用性较好。

本文拟定的含量测定方法简便、快速、重现性好，为安胎益母丸的质量检查提供了实验依据。

[参考文献]

[1] 李亚红，王凤双，袁兆坤. HPLC测定八珍益母片中芍药苷的含量[J]. 安徽医药，2009，13（8）：898-899.

[2] 高立金，郭志鹏. RP-HPLC法测定柴黄升板颗粒中芍药苷的含量[J]. 中国药师，2009，12（9）：1264-1265.

[3] 易润青，李艺，宋粉云. HPLC法测定清瘟解毒片中芍药苷的含量[J]. 广东药学院学报，2009，25（4）：379-381.

[4] 杨忠兰，石尚友. RP-HPLC法测定血府逐瘀口服液中芍药苷的含量[J]. 中国药房，2008，19（21）：1648-1649.

[5] 陈艳霞. HPLC测定九味乳安糖浆中芍药苷的含量[J]. 中成药，2008， 30（9）：I0023-I0024.

（收稿日期：2011-10-08）

本文为全文原貌 未安装PDF浏览器用户请先下载安装 原版全文