黄芪对黑曲霉植酸酶代谢活性的影响

摘要：利用ＦｅＳＯ４－钼蓝法研究了中草药黄芪（Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ）粉末、黄芪水提取液对黑曲霉（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒ）植酸酶在固体培养基和液体培养基中代谢活性的影响。结果表明，在０．０３ ｇ／ｍＬ的黄芪粉末和０．０３ ｇ／ｍＬ的黄芪水提取液作用下，４４ ｈ时黑曲霉中植酸酶活性最高。与对照相比，固体培养基中加入黄芪粉末和黄芪水提取液的吸光度分别提高了３３．６％和３７．８％，液体培养基中加入黄芪粉末和黄芪水提取液的吸光度分别提高了２１．０％和２８．７％。在最佳培养时间，植酸酶活性均随着黄芪浓度的增大而呈下降趋势，其中加入黄芪粉末的液体培养基变化幅度最大，植酸酶活性浓度０．０１ ｇ／ｍＬ是浓度０．０５ ｇ／ｍＬ的１．６４倍；加入黄芪水提取液的液体培养基中植酸酶活性浓度０．０１ ｇ／ｍＬ是浓度０．０５ ｇ／ｍＬ的１．５４倍；加入黄芪粉末和黄芪水提取液的固体培养基中植酸酶活性浓度０．０１ ｇ／ｍＬ分别是浓度０．０５ ｇ／ｍＬ的 １．５０和１．４２倍。

关键词：黄芪（Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ）；黑曲霉（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒ）；植酸酶；代谢活性

中图分类号：Ｓ５６７．２ 文献标识码：Ａ 文章编号：0439－８114（２０12）17－3786-03

Effect of Astragalus membranaceus on Aspergillus niger Phytase Metabolic Activity

ＷＡＮＧ Ｈｕｉ１，ＳＡＮＧ Ｗｅｉ－ｊｕｎ１，ＪＩＡＯ Ｑｉａｎｇ２，ＺＨＡＮＧ Ｘｉｎ－ｑｉａｎｇ１，ＤＯＮＧ Ｃｕｎ－ｑｉｎ１

（１．Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｇｕｉｚｈｏｕ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｇｕｉｙａｎｇ ５５００２５，Ｃｈｉｎａ；２． Ｑｕａｎｃｈｅｎｇ Ｃｏｌｌｅｇｅ， Ｊｉｎａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｊｉｎａｎ ２５００００，Ｃｈｉｎａ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ mｅｄｉｃｉｎｅ Ｒａｄｉｘ Ａｓｔｒａｇａｌｉ ｐｏｗｄｅｒ ａｎｄ ｗａｔｅｒ ｅｘｔｒａｃｔ ｏｎ Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒ ｐｈｙｔａｓｅ ｍｅｔａｂｏｌｉｃ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｎ ｓｏｌｉｄ ａｎｄ ｌｉｑｕｉｄ ｃｕｌｔｕｒｅ ｍｅｄｉｕｍ ｗｅｒｅ ｓｔｕｄｉｅｄ ｂｙ ｕｓｉｎｇ ＦｅＳＯ４－ｍｏｌｙｂｄｅｎｕｍ ｂｌｕｅ ｍｅｔｈｏｄ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｐｈｙｔａｓｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｗａｓ ｔｈｅ ｈｉｇｈｅｓｔ if ｔｒｅａｔｅｄ ｆｏｒ ４４ ｈｏｕｒｓ ｂｙ ０．０３ ｇ／ｍＬ ｏｆ ａｓｔｒａｇａｌｕｓ ｐｏｗｄｅｒ ａｎｄ ０．０３ ｇ／ｍＬ ｏｆ ｗａｔｅｒ ｅｘｔｒａｃｔ． Ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ， ｔｈｅ ａｂｓｏｒｂａｎｃｅ ｖａｌｕｅ was ｉｍｐｒｏｖｅｄ by ３３．６％ ａｎｄ ３７．８％ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ ｂｙ ａｄｄｉｎｇ ａｓｔｒａｇａｌｕｓ ｐｏｗｄｅｒ ａｎｄ ａｓｔｒａｇａｌｕｓ ｅｘｔｒａｃｔ ｗａｔｅｒ ｉｎ ｓｏｌｉｄ ｃｕｌｔｕｒｅ ｍｅｄｉｕｍ； ｈｏｗｅｖｅｒ， iｎｃｒｅａｓｅ ｏｆ ２１．０％ ａｎｄ ２８．７％ ｗｅｒｅ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ ａｃｈｉｅｖｅｄ ｉｎ ｌｉｑｕｉｄ ｃｕｌｔｕｒｅ． Ｉｎ ｔｈｅ ｂｅｓｔ ｃｕｌｔｕｒｅ ｐｅｒｉｏｄ， ｐｈｙｔａｓｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｉｎｃｒｅａｓｉｎｇ ｏｆ ｔｈｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ａｓｔｒａｇａｌｕｓ． Ｔｈｅｒｅ ｗａｓ ｂｉｇｇｅｓｔ ｃｈａｎｇｅ ｒａｎｇｅ ｉｎ ｌｉｑｕｉｄ ｍｅｄｉｕｍ ｗｈｉｃｈ ａｄｄｅｄ ａｓｔｒａｇａｌｕｓ ｐｏｗｄｅｒ．

Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： Aｓｔｒａｇａｌｕｓ ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ； Aｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ niger； ｐｈｙｔｉｃ ａｃｉｄ ｅｎｚｙｍａｔｉｃ； ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ ａｃｔｉｖｉｔｙ

水解植酸及其盐类的酶被称为植酸酶［１］，它能使饲料中有机磷得到有效利用［２］。一般情况下为了满足畜禽对磷的需要，普遍采用的方法是在饲料中加入有机磷，但由此带来一些问题，例如消耗了大量的磷矿资源和若未被消化吸收的磷被动物排出体外，对土壤和水源造成污染。在饲料中加入植酸酶不但能提高动物生产性能，还能提高钙、镁、锌、锰、铜和铁的生物利用率［３］。植酸酶的研制和开发受到广泛重视。

黄芪（Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ）是一种常用中药材［４］，可促进黑曲霉（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒ）中植酸酶的代谢。黑曲霉是一种常见的真菌，广泛分布于世界各地的粮食、植物性产品和土壤中［５］，便于收集培养，而且黑曲霉是微生物中产植酸酶的高产真菌。试验研究了黄芪对植酸酶代谢的影响［６］，得出了植酸酶活性的最佳培养时间和浓度，有利于提高植酸酶的利用率，提高经济效益。

１ 材料与方法

１．１ 供试材料

黄芪购自中药材市场，粉碎成粉末备用；１０％黄芪水提取液的制备：准确称取固体黄芪１０ ｇ于２５０ ｍＬ烧杯中，加入５０ ｍＬ去离子水，沸腾后煮２０ ｍｉｎ，冷却后用八层纱布过滤得到滤液，再次倒入烧杯５０ ｍＬ去离子水，沸腾后再煮２０ ｍｉｎ，冷却后用八层纱布过滤的滤液和第一次的滤液混合后定容至１００ ｍＬ，放置待用；黑曲霉由贵州大学农学院植物病理实验室提供；植酸酶活性测定采用ＦｅＳＯ４－钼蓝法进行［７］。

１．２ 培养基的配制

１）不加黄芪的对照培养基。固体培养基的配制：麸皮２０ ｇ，硫酸铵４ ｇ，去离子水定容至５０ ｍＬ；液体培养基的配制：麸皮５ ｇ，硫酸铵４ ｇ，去离子水定容至５０ ｍＬ。