格林 第3期

【中图分类号】R745.44 【文献标识码】 B【文章编号】1672-3873（2011）03-0079-02

【摘要】目的 了解格林一巴利综合征(GBS)患者血清及脑脊液中白细胞介素IL-18的水平，探讨IL-18在GBS发病过程中的作用。方法 采用ELISA法对42例GBS患者血清及32例GBS患者脑脊液中IL-18进行测定，并分别与26例健康人血清及17例健康人脑脊液中IL-18水平进行比较。结果 GBS组患者血清及脑脊液中IL-18的水平均显著高于健康对照组(均p

【关键词】格林一巴利综合征;白细胞介素IL-18;酶联免疫吸附试验

格林一巴利综合征(GBS)，又名急性炎症性脱髓鞘性多发性神经根炎，是以周围神经和神经根的脱髓鞘及小血管周围淋巴细胞及巨噬细胞的炎性反应为病理特点的自身免疫性疾病。细胞因子(CK)是由T,B淋巴细胞，单核/巨噬细胞等多种细胞分泌的一种多肽，它可调节和决定免疫应答的性质，井涉及免疫的诸多环节，包括抗原递呈、细胞动员和激活、黏附分子的表达等。动物实验研究表明，一些细胞因子如TNF-α、IL-2、IL-6等在GBS以及其他免疫失衡疾病中起重要作用【1,2】。本研究采用免疫酶联ELISA技术检测GBS患者血清及脑脊液(CSF)中IL-18的水平，以探讨其在GBS发病过程中的作用，进一步了解GBS发病机制。

1材料与方法

1.1研究对象

1.1.1 GBS患者组:均为我院神经内科2010年1月至2010年10月门诊及住院患者。所有患者的诊断符合Asbury ( 1990)【3】修订的诊断标准;病情轻重评分按Hughs(1978)【4】标准，将患者分为轻型组和重型组，轻型组临床评分为1~3分，重型组为4~6分。Hughes标准:0级:正常;1级:症状与体征很轻;2级:不需帮助能行5米以上;3级：需帮助能行5米以上;4级:卧床不能步行;5级:需呼吸机辅助呼吸。（1）GBS急性期42例，男24例，女18例，年龄8―65岁，平均17. 23岁。抽血时间为3-14d，平均7.26d。（2）GBS恢复期29例，男17例，女12例，抽血时间为30 --45d，平均31.87d 。(3)GBS急性期脑脊液组32例，其中男19例，女13例，年龄9一63岁，平均26.38岁。抽脑脊液时间为发病后6一16 d。

1.1.2正常对照组 : (1)正常血清对照组:选择健康志愿者及门诊体检健康者26例，其中男15例，女11例，年龄，7~49岁，平均23.17岁，无过敏性疾病、自身免疫病，近期内无感染。(2)正常脑脊液对照组: 17例，男9例，女8例，年龄18~50岁，平均24.69岁。为门诊体检及生化检查正常的儿童及成人。研究对象抽血前未经手术、化疗及应用影响兔疫功能的药物。

1.2主要试剂及仪器人IL -18酶免试剂盒（含重组人IL -18标准品)购自深圳晶美生物工程有限公司(进口分装)，其它试剂均系国产分析纯。DG-3022A型酶联免疫检测仪(450nm，华东电子管厂生产)，4000r/ rn i n离心机，微量加样器，370C温箱。

1.3研究方法

1.3.1标本的采集:所有研究对象均在晨起7：00-9:00，采肱静脉血4rnl，经离心分离血清，分装3个冻存管内，-40℃以下保存待测。

1.3.2血清及脑脊液IL -18含量测定:严格按照IL-18酶免试剂盒的操作方法进行测定。

1.4统计学处理:数据用 土s表示，应用SPSS 11.0统计软件进行统计分析。多样本均数比较用方差分析，两样本均数比较用独立样本t检验，按α=0.05作为检验标准。

2 结果

2.1 GBS患者急性期、恢复期血清和脑脊液IL-18水平与对照组比较(见表1)。

目前，普遍接受的“分子模拟”学说认为，GBS发病是由于病原体某些组分与周围神经组分相似，机体免疫系统发生错误的识别，诱导出自身免疫性T细胞和自身抗体，产生针对周围神经组分的免疫应答，从而引起周围神经脱髓鞘和产生轴索变性【5】。

IL-18是近些年发现的细胞因子之一，在人胰腺、肾脏、骨骼肌、肺及未刺激过的外周血单个核细胞等40多个不同的细胞系中，可检测到IL-18mRNA的表达，在单核巨噬细胞中高度表达，而在T, B细胞很少或几乎不表达，说明IL-18主要由单核巨噬细胞产生【6】。研究表明【7】 IL-18是由非活性的前体形式合成，经IL-1β转化酶(ICE，又称Caspase-1)去除含有36个氨基酸的前导序列，成为成熟的IL-18而发挥生物活性。GBS的发生与细胞免疫和体液免疫功能紊乱有关，是由于一些外界因素的作用，使机体免疫功能发生了改变，产生了对自身髓鞘蛋白反应的免疫损害。有文献报导【8,9】，在免疫系统激活相关的炎症性疾病中，IL-18血清水平往往是明显升高的。另外，Jander等【10】研究还发现GBS病人血清IL-18水平也明显高于非炎性神经疾病对照组，认为细胞因子IL-18参与了免疫介导的外周神经系统(Peripheral nervous system ，PNS )脱髓鞘的作用。

本研究结果显示，GBS患者血清IL-18水平，急性期显著高于恢复期和对照组;同时，急性期脑脊液IL-18水平也明显高于对照组，与文献报道一致【10】，提示IL-18参与了GBS的发病，启动了免疫级联反应，使各种炎症细胞、细胞因子及其炎症介质释放，促使其进入血液、脑脊液及周围神经组织中，从而引起一系列免疫病理反应，导致神经组织髓鞘脱失。另外本研究观察发现，GBS恢复期患者血清IL-18水平，随病情好转较急性期明显降低，但仍高于正常对照组。提示，IL-18是一种早期促炎因子，与免疫反应的启动及髓鞘损伤有关。本研究还观察到，GBS患者血清和脑脊液IL-18含量尚与病情严重程度相一致，重型组显著高于轻型组，表明血清和脑脊液IL-18水平不仅可作为GBS髓鞘损伤的重要标志，还可以作为判断GBS患者病情轻重的依据。

综上所述，IL-18与GBS免疫学发病机制有密切关系, 与GBS的病情及恢复有关。临床上可通过监测IL-18水平变化判断GBS的病情预后。

参考文献

[1] Kamakura K, Kaida K, Kusunoki S, et al. Harmful effects of anti-GalNAc-GD1a antibodies and TNF-alpha on rat dorsal root ganglia[J].J Peripher Nerv Svst, 2005, 10 (2):190-201.

[2] Shih DQ, Targan SR, McGovern D. Recent, Advances in IBD Pathogenesis:Genetics and Immunobiology[J].Curr Gastroenterol Rep, 2008, 10(6) :568-575.

[3] Asbury- AK, Cornblath DR. Assessment of current diagnostic criteria for GBS. Ann Neurol, 1990,27:21

[4] Hughes RAC,Newson-davis J,Verkin G .et al .Controlled trial of predxisolone in acute polyneuropathy. Lancet, 1978, 2: 750-753

[5]王维治.神经病学[M].5版.北京:人民卫生出版社，2006:102.

[6] Okamura H,Tsutsi H,Komatsu T,et a1.Cloning of a new cytokine that induces IFN-gamma production by T cell[J]. Nature, 1995,378(6552):88-91.

[7] Gu Y, Kuida K, Tsutsui H et al. Activation of interferon-gamma inducing factor mediated by interleukin-lbeta converting enzyme[J]. Science. 1997,275(5297):206-209.

[8]文维群，胡章勇.IL-18与疾病相关性的实验研究进展[J].《国外医学》预防、诊断、治疗用生物制品分册.2001,24(1):26-29.

[9]高立芬，IL-18与免疫相关性疾病[J]国外医学免疫学分册.2001,24(3):165-167.

[10] Jander S, Stoll G.Interleukin-18 is induced in acute inflammatory demyelinating polyneuropathy[J]. Neuroimmuno1, 2001,114(l-2):253-258.

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