HPLC法测定红药片中人参皂苷Rg的含量

(1．沈阳医学院沈洲医院，辽宁沈阳1．10002；2．辽宁省药品检验所，辽宁沈阳11(XY23)

摘要：目的：用高效液相色谱法测定红药片中人参皂苷rg1含量。方法：采用Symmetry C18(150mm×4.6mm,5μm)色谱柱，乙腈-0.05％磷酸(V:V=20:80)为流动相，检测波长203mm，流速0.9mL/min。结果：线性范围0.1003～4.012μg(r=0.9998，n=6)，平均回收率95.5％，RSD为1.89％(n=6)；结论：本法简便、准确、无干扰，可用于红药片的质量控制。

关键词：高效液相色谱法；红药片；人参皂苷Rg1

中图分类号：R285

文献标识码：A 文章编号：1673-7717(2007)04-1059-02

红药片为常用中成药，收载于部颁《药品标准》中药成方制剂第20册，由三七、川芎、白芷、土鳖虫、红花、当归组成，具有活血止痛，去瘀生新的功能。三七为方中主药，其主要有效成分为人参皂苷Rg1、Rb1、三七皂苷R1等成分。标准中无定量指标，不能有效地控制产品内在质量。本文采用高效液相色谱法对该药中的人参皂苷Rg1进行了含量测定研究。

1仪器及试药

仪器：日本岛津2010高效液相色谱仪；日本岛津2010可见紫外检测器；日本岛津LC Solution色谱工作站。

试药：人参皂苷Rg1对照品(110703-200322)中国药品生物制品检定所提供。乙腈：色谱纯，其他试剂均为分析纯：水为超纯水；红药片：沈阳管城制药有限责任公司。2方法与结果

色谱条件：色谱柱：Symmetry C18(150mm×4.6mm，5μm)；流动相：乙腈-0.05％磷酸(V:V=20:80)；检测波长203nm。在此色谱条件下测定，人参皂苷Rg1的保留时间tR为40min，理论板数大于3000，分离度大于1.5。

2.1线性关系考察　精密吸取浓度为0.1003mg/mL的人参皂苷Rg1对照品溶液1、2μL和浓度为0.2006mg/mL的人参皂苷Rg1对照品溶液2、5、10、20μL注入液相色谱仪，按上述色谱件测定峰面积，以进样量为横坐标，色谱峰面积为纵坐标，进行线性回归，回归方程为：Y=443674X+1376.2，r=0.9998，人参皂苷Rg1对照品在0.1003～4.012μg范围内线性关系良好。

2.2阴性对照实验　按处方量制备缺三七药材阴性对照样品，按“2.6”项操作，测定并比较样品、人参皂苷Rg1对照品、阴性对照样品的色谱图，结果表明：阴性样品不干扰人参皂苷Rg1的测定。

2.3样品精密度及稳定性实验　精密吸取供试品溶液10μL，重复进样6次，记录对照品峰面积，计算BSD为0.87％。精密吸取供试品溶液(批号20040501)10μL，于0、2、4、8、12、24h进样，记录色谱图，于Oh峰面积比较，相对标准偏差(RSD)为0.98％(n=6)。

2.4重现性实验　取同批样品(批号20040501)6份，按“2.6”项操作，结果RSD为1.74％。

2.5加样回收率实验　精密称取已知含量同批样品(批号20041001，人参皂苷Rg1含量为10.2mg／g)约0.125g，精密称定，共计6份，分别精密加入人参皂苷Rg1对照品溶液(0.13mg/mL)20mL，水饱和的正丁醇25mL，余下按“2.6”项操作，测定人参皂苷Rg1含量，平均回收率为95.5％，RSD为1.89％(n=6)。

2.6样品含量测定　取本品10片，除去糖衣，精密称定，研细，取约0.25g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入水饱和的正丁醇50mL，密塞，称定重量，超声处理30min，取出，冷至室温，再称定重量，用水饱和的正丁醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液25mL，至分液漏斗中，用正丁醇饱和的氨试液洗涤2次，每次10mL，合并氨试液，用水饱和的正丁醇提取3次，每次15mL，合并正丁醇液，蒸干，残渣加流动相使溶解，定量转移至10mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得。分别精密吸取对照溶液与样品溶液各10μL，注入液相色谱仪，以外标法按峰面积计算，即得。

3讨论

水饱和的正丁醇溶液能有效提取人参总皂苷，处方中的脂溶性成分被有效的分离出去，在萃取时节省了时间和次数，提高人参皂苷Rg。的回收率。

超声提取法有效缩短提取时间，提高了实验效率。超声提取时间考察了10、20、30、40min，结果30min后提取量不再增加。

流动相曾采用甲醇-水、乙腈-水、乙腈-0.05％磷酸的不同比例进行了试验，结果乙腈-0.05％磷酸的体积比为20:80时，分离效果很好。

注：本文中所涉及到的图表、注解、公式等内容请以PDF格式阅读原文。