宫颈鳞癌组织中APC蛋白的表达及意义

doi：10.3969/j.issn.1007-614x.2014.16.79

摘 要 目的：探讨宫颈各级病变组织中APC蛋白的表达及其与宫颈鳞癌临床病例因素的关系。方法：采用免疫组化ABC法检测15例正常宫颈组织、20例宫颈上皮内瘤变（CIN）、60例宫颈鳞癌组织中APC蛋白的表达，并分析其表达与宫颈鳞癌临床病理因素的关系。结果：正常宫颈、CINⅠ、CINⅡ～Ⅲ及宫颈鳞癌组织中APC蛋白阳性表达率分别为93.33%、75.00%、50.00%、11.67%，差异有统计学意义（P0.05）。结论：APC蛋白可能参与了宫颈病变的发生发展及宫颈鳞癌的浸润转移过程。

关键词 宫颈鳞癌 APC蛋白 免疫组化

Expression and significance of APC protein in tissue of squamous cell carcinoma of the cervix

Zhao Xiaoli

Department of Obstetrics and Gynecology，the people's Hospital of Zhengzhou City，Henan 450002

Abstract Objective：To investigate the expression of APC protein in all levels of cervical lesions and its relationship with clinical factors in cervical squamous cell carcinoma.Methods：Using immunohistochemical ABC method to detected the expression of APC protein in 15 cases with normal cervical tissues，20 cases with CIN， and 60 cases of cervical squamous cell carcinoma by immunohistochemistry ABC method，and we analyzed the relationship between their expression and clinical pathological factors in cervical squamous cell carcinoma.Results：In the normal cervix，CIN Ⅰ，CIN Ⅱ～Ⅲ and cervical squamous cell carcinoma were 93.33%，75.00%，50.00%，11.67% respectively.The difference was statistically significant（P0.05）.Conclusion：APC protein may be involved in the occurrence and development of cervical lesions or invasion and metastasis of cervical squamous cell carcinoma.

Key words Cervical squamous cell carcinoma；APC protein；Immunohistochemical

宫颈癌在临床上属于妇科较为常见的恶性肿瘤，有调查研究显示其发病率仅次于乳腺癌，位居所有妇科恶性肿瘤中第二位，对女性的身心健康都会构成较为严重的威胁，并且同时也给家庭以及社会造成较为沉重的经济负担。宫颈癌80%～85%为鳞状细胞癌[1]，APC蛋白是Wnt信号转导通路的成员之一，它的不正常激活在多种肿瘤的发生过程中起着至关重要的作用。本研究旨在通过阐明宫颈鳞癌患者手术切除组织标本中APC蛋白的表达水平以及该蛋白的表达与临床病理特征之间有着怎样的联系，探讨APC表达在宫颈鳞癌的整个疾病过程中所扮演的角色，有助于进一步深入研究宫颈鳞癌分子机制，能够为寻找宫颈鳞癌早期诊断和生物防治的敏感、特异性指标和方法提供重要信息。

资料与方法

2011年8月-2014年2月收集蜡块标本，所有组织均经病理学检查证实，宫颈鳞癌组织60例，其中13例伴淋巴结转移。组织学分级（WHO）：G1～G2：39例，G3：21例；按照FIGO（2000）临床分期：Ⅰ期27例，Ⅱ期24例，Ⅲ/Ⅳ期9例；患者年龄25～65岁，中位年龄45岁。CIN（宫颈上皮内瘤变）Ⅰ：20例，CINⅡ～Ⅲ：20例。正常宫颈组织：选取15例在相同时期由于子宫肌瘤而进行子宫全切术所切取的正常宫颈上皮组织作为整个试验 的对照。

样本入组标准：本次试验所入组的患者在接受手术之前均没有进行任何治疗，均有完整的术后病理资料，宫颈鳞状细胞癌诊断准确。对照组宫颈外观表面光滑，术前TCT检查示宫颈无异常。其中鳞癌Ⅲ/Ⅳ期的患者由于其实施手术的时间较为延后，试验中所使用的标本均为宫颈活检组织。

试剂与方法：采用美国Santu Cruz公司生产的兔抗人APC多克隆抗体，稀释浓度1：100；ABC免疫组化试剂盒及DAB底物试剂盒均购自美国Vector Laboratories公司；采用卵白素-生物素-辣根过氧化氢酶复合物法，具体步骤按说明书进行。

结果判定：染色判定标准应用半定量分析法。按阳性细胞百分率：①0%～5%：0分；②6%～25%：1分；③26%～50%：2分；④51%～75%：3分；⑤76%～100%：4分。

按细胞染色深浅：①无染色0分；②浅黄色1分；③棕黄色2分；④黄褐色3分。

最终的实验结果取2项评分的乘积，>4分则为阳性，

统计学方法：用SPSS 17.0统计学软件处理数据，计量资料采取t检验，计数资料采取χ2检验。当P

结 果

APC蛋白在不同宫颈组织中的表达：正常宫颈，CINⅠ、CINⅡ～Ⅲ及宫颈鳞癌组织中APC 蛋白阳性表达率分别为93.33%，75.00%，50.00%，11.67%，差异有统计学意义（P

讨 论

APC蛋白异常表达在很多肿瘤组织当中较为常见，如肝癌、乳腺癌等组织中都检测到APC蛋白表达减弱[2～4]。此次试验结果发现，从正常宫颈组织到宫颈上皮内瘤变组织到宫颈鳞癌组织，APC蛋白阳性表达的概率逐渐下降，这表明APC蛋白表达程度可能与宫颈病变的发生发展相关，APC蛋白可能参与了宫颈上皮细胞的恶性转化过程。随着宫颈癌变的不断继续往下发展，组织中APC蛋白阴性表达的程度也逐渐增加，这表明APC蛋白在宫颈鳞癌的整个病变发生过程中起着一定的作用。

APC蛋白属于亲水蛋白的一种[5]。APC蛋白主要存在于细胞质中，具有多个功能区域，如C端可降解β-catenin、β-catenin结合位点及结合细胞骨架微管的部位[6]。这些功能区域参与构成细胞骨架，在细胞生长调控中发挥重要作用。由Wnt基因介导的信号转导通路又称为Wnt信号通路，该通路的异常激活与多种肿瘤的发生有关。作用机制：存在于细胞外的Wnts蛋白与跨膜受体卷曲蛋白结合后，可以抑制糖原合成APC、酶激酶-3β（GSK-3β），阻碍β-catenin的磷酸化，这样就会导致该物质在胞质中不能正常进行代谢，当其在细胞质内的含量上升到一个界限以后，它就可以从细胞质直接进入胞核，进而与TGF/LEFS进行结合，这样就导致细胞的增值、生长以及周期等正常的调控机制被打乱[7～10]。

总之，根据APC蛋白在不同宫颈组织中的表达情况，提示其在宫颈病变的发生发展及宫颈鳞癌的浸润转移过程中可能发挥了重要的作用，进一步研究将有助于了解宫颈癌变的根本机制，为宫颈癌的早期诊断及生物防治提供理论依据。

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