丹参酮IIA的药代动力学研究进展

摘 要：综述国内外关于血浆中丹参酮ПA的提取方法、检测方法，临床前药动学及人体药动学的研究进展，为丹参酮ПA的组织分布及代谢研究提供参考。

关键词：丹参酮ПA；提取方法；检测方法；药代动力学

中图分类号：R969.1 文献标识码：A 文章编号：1673-7717(2012)01-0126-02

Research Progress on Pharmacokinetics of Tanshinone IIA

JIANG Qinghua, DENG Jingjing, JIAN Lingyan

(Department of pharmacy，Shengjiing Hospital Affiliated to Chinese Medical University, Shenyang 110004, Liaoning, China)

Abstract: The article reviewed the extraction methods and the detection methods of Tanshinone ⅡA at home and aborad; preclinical pharmacokinetic and human pharmacokinetic study at home and aborad were also reviewed in this article, providing reference for the tissue distribution and metabolism of Tanshinone ⅡA.

Key words:Tanshinone ⅡA; extraction method; detection method; pharmacokinetics

丹参为唇形科植物丹参 Salvia miltiorrhiza Bge.的干燥根及根茎。丹参性苦，微寒；归心、肝经。具有祛瘀止痛，活血通经，清心除烦的功效。临床上常用于治疗月经不调，经闭痛经，瘕积聚，肝脾肿大，心绞痛等疾病。丹参酮IIA ( tanshinone IIA , TS)是从丹参的根中提取分离的二萜醌类化合物，为丹参中的有效成分，具有多种药理活性，如抗菌、抗氧化、扩张冠状动脉、增加心肌血流量等功效[1]。

自20世纪70年代以来，人们对丹参单味药、化学成分及其复方的药理作用机理进行了大量的研究工作，取得了可喜的成绩，但对其体内过程研究的文献却很少。直到90年代，人们才对其在动物及人体内的吸收、分布、代谢和排泄等药代动力学过程进行了许多深入的研究[2]，本文拟就丹参酮IIA的药代动力学研究进展情况进行综述。

1生物样品中丹参酮IIA提取方法的比较

1.1样品的前处理常用的生物样品的前处理包括沉淀蛋白法、液液萃取法和固相萃取法等。丹参酮IIA多用内标法进行定量，常用的内标有丹参酸甲酯[3]、非诺贝特[4]、氯雷他定[5]、4-氯联苯[6]。

沉淀蛋白法是处理含有丹参酮 IIA样品的最常用、最有效的方法，此法操作简单，使用广泛。杨洁芳等[3]分别采用高氯酸、乙腈作为沉淀剂。经高氯酸处理后丹参酮ⅡA绝对回收率很低，可能是由于其被酸分解；而乙腈作为沉淀剂不仅与流动相中的有机相一致，而且沉淀蛋白效果最佳，进样后峰形良好。再结合文献报道[7]，采用1∶3的比例可以沉淀99.8 %的蛋白，综合考虑沉淀蛋白效果和检测限的要求，采用了此比例进行蛋白沉淀。甘发平等[8]分别考察了乙酸乙酯和乙醚萃取，结果发现乙醚萃取时易出现乳化现象，不利于萃取；而用乙酸乙酯为萃取剂且用量为1.5mL时，血浆和脑匀浆中TsⅡA和内标的萃取回收率均符合要求。

1.2血药中丹参酮IIA检测方法

1.2.1高效液相色谱-紫外分光光度(HPLC-UV)法检测波长为270nm。一般使用YMC、Diamonsil、Merk、Inersil、Agilent等型号的C18 (5μm)柱，流动相为乙腈-水-冰醋酸居多。文献报道[6]最低定量浓度为0.05mg• L-1。

1.2.2液相色谱-质谱(HPLC-MS)联用法宋敏等[4]等使用Waters-C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱，预柱为 C18(10mm×4.6mm,5μm)，流动相为甲醇-水 (85∶15)；流速为1.0mL•min-1；进样量为20μL。大气压化学离子化(APCI)正离子选择性反应检测，质谱工作参数为放电电流为6μA，喷雾器温度500℃，雾化氮气压力207kPa，辅助气压力34.5kPa，加热毛细管温度350℃，Ar气CID压力0.21Pa，碰撞能量为25eV。内标为非诺贝特。

1.2.3液相色谱-质谱-质谱(HPLC-MS-MS)联用法为适应浓度较低的丹参酮ⅡA的检测，更高灵敏度的HPLC-MS-MS法也被应用于丹参酮ⅡA的药代动力学研究中。HPLC-MS-MS法选择性强，由于生物样本中的其他杂质不被检测，使得空白本底明显降低，提高了对丹参酮ⅡA的检测灵敏度。丁建刚等[1]用液相色谱对样品进行分离，柱后分离进入质谱检测。质谱条件为：电离方式为ESI源，正离子检测；毛细管温度为300℃；喷雾电压为5kV；毛细管电压为5V；鞘气流速为10L•min-1；辅气流速为1.7L•min-1；碰撞气为氦气；扫描模式为选择离子监测(SRM)；检测离子反应为m/z 295277 (丹参酮ⅡA)，碰撞能量为38eV；m/z 285257(内标)，碰撞能量为46eV；运行时间为16min。

1.2.4高效液相色谱-荧光法通过优化流动相、乙腈沉淀法，并选择合适内标，并选择荧光检测法，提高了检测的灵敏度和准确性，同时也减少了杂峰的干扰。

2丹参酮ⅡA的药代动力学研究

2.1 离体研究

丹参酮在胃肠道吸收良好，透膜性较好。在胃中吸收机理可能为被动转运，转运机制有待进一步考察，在肠道中的吸收机理可能为主动扩散，结肠是最佳吸收部位。由于在结肠的转运时间可为小肠的5～10倍，且药物与结肠的接触面积要大于小肠段，此相同量的药物在结肠吸收会比在小肠吸收更好，且有文献报道结肠处有多种菌群和生物转化酶，对其吸收也有促进作用，故结肠处要比其它肠段吸收好，但具体的机理也需要进一步考察[9]。

2.2整体研究

2.2.1临床前药动学研究丹参酮ⅡA及其制剂的临床前药动学研究主要以小鼠[8]、大鼠[6]和Beagle犬[1]为对象，研究方法以血药浓度法为主。丹参酮IIA在小鼠、大鼠血浆中的主要药动学参数分别见表1～2[6，8]。

毕惠嫦等[5]验建立的测定肝微粒体酶中丹参酮IIA的色谱-质谱方法,经回收率、精密度及标准曲线等方法学验证项目考察,表明此分析方法具有灵敏、准确、快速的特点,能成功应用于丹参酮IIA在大鼠肝微粒体酶中的代谢研究并计算酶促动力学参数[10-11]。研究结果显示,丹参酮IIA在大鼠肝微粒体中被迅速代谢；在温孵时间(1～10min)以及蛋白质量浓度(0.05～0.4mg/mL)，丹参酮IIA的代谢呈线性变化。当丹参酮IIA浓度大于2μmol/L时，其代谢速率不再随底物浓度的增加而增加，反而表现速率下降的特性。通过研究不同酶抑制剂对药物代谢的影响，可以了解药物的代谢规律以及可能产生的药物相互作用。噻氯匹啶和酮康唑为CYP2C19和CYP3A1的特异性抑制剂，在本实验中可以显著抑制丹参酮IIA的代谢；奎尼丁(CYP2D6)对药物的代谢也呈现一定程度的抑制，而其他抑制剂对丹参酮êA的代谢无明显的影响。这说明CYP3A1和CYP2C19主要参与了丹参酮IIA的代谢,是丹参酮IIA代谢的一个关键步骤；CYP2D6也部分参与了药物的代谢。由于药物间代谢性相互作用是影响药物在体内浓度水平的一个重要因素，因此抑制丹参酮IIA上述的代谢途径将会降低其代谢速率，提高丹参酮IIA在体内的水平。提示CYP2C19、CYP3A1、CYP2D6的抑制剂与丹参酮IIA之间有潜在的药物相互作用，前者可以降低丹参酮IIA的代谢速率[5]。

2.2.2人体药动学研究杨洁芳等[3]采用高效液相色谱-荧光法检测血浆中的丹参酮ⅡA浓度，灵敏度高，杂峰干扰少，用于研究健康受试者口服丹参酮Ⅱ剂后体内的血药浓度，为研究健康人体药代动力学试验提供测定方法。10名男性健康受试者禁食12h后，清晨空腹，单次口服丹参酮Ⅱ剂1片(80mg)，用温开水250mL吞服，于给药后0.25、0.50、0.75、1.0、1.5、3.0、5.0、8.0、12.0、 24.0、36.0、48.0、60.0h，各取上肢静脉血约3mL，将血浆收集于肝素抗凝的试管中，3000r/min离心10min，分离出血浆，进行血浆预处理或- 80℃冷冻保存至测定。

3结 语

综上所述，丹参酮IIA的药动学研究多集中在对其在血液中吸收状况的研究，而其在各组织中分布状况的研究很少见。丹参酮IIA在人体内的研究大多建立在动物的药动研究基础之上，有确切报道的文献非常少。

因此对丹参酮IIA的药动学研究值得进一步的深入，为临床更好的，更合理的使用丹参提供理论基础。

参考文献

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